注射用马来酸桂哌齐特工艺研究

刘风韵, 可成友

(沈阳化工大学 制药与生物工程学院， 辽宁 沈阳 110142)

近年来，心脑血管病发病率和致死率逐年升高，心脑血管类药物的研发及工艺改造面临着更高的要求和挑战.马来酸桂哌齐特是新一代的哌嗪类药物，其在脑血管疾病[1-5]、心血管疾病[6-9]、外周血管疾病[10]等方面的治疗效果已得到国内外认可，是目前治疗心脑血管类疾病的一线药物.目前，国内市售的马来酸桂哌齐特注射液均为水针剂，关于马来酸桂哌齐特冻干剂的研究极少 .为满足临床用药需求，提高产品稳定性，填补冻干剂型市场空白，本文对马来酸桂哌齐特冻干剂的工艺进行了研究.

1 实验部分

1.1 药品、试剂、仪器及设备

马来酸桂哌齐特标准品(质量分数为99.76 %)、马来酸桂哌齐特顺式异构体(质量分数97.18 %)，上海江莱生物科技有限公司；马来酸桂哌齐特(质量分数99.21 %)，武汉风竹林化学科技有限公司；山梨醇，山东寿光市华力糖醇有限公司；氢氧化钠(分析纯)，国药集团；活性炭，唐山华能科技炭业有限公司.

PHS-3C型pH计，上海精密科学仪器有限公司；BSA224S-CW型电子分析天平，赛多利斯公司；RE-52型玻璃双蒸水器，上海亚荣旋转蒸发器；xt20595型冷冻干燥机，北京百思佳特科技有限责任公司；LC20A型HPLC，岛津公司.

1.2 实验方法

1.2.1 溶液制备工艺

分别制备无辅料马来酸桂哌齐特溶液和添加山梨醇或甘露醇的马来酸桂哌齐特溶液：

(1)制备规格80 mg/支： 室温下，称量马来酸桂哌齐特80 g，无辅料或加入辅料(山梨醇或甘露醇)60 g，溶于1 200 mL注射用水中；用1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为4±0.5，加水至2 000 mL，混匀；加入100 g的活性炭，在50 ℃下，搅拌吸附20 min，用双层滤纸脱碳过滤；用0.22 μm微孔滤膜除菌过滤；分装成2 mL/支，置5 mL西林瓶中.

(2)制备规格320 mg/支： 室温下，称量马来酸桂哌齐特320 g，无辅料或加入辅料(山梨醇或甘露醇)300 g，溶于4 800 mL注射用水中；用 1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为4±0.5，加水至10 000 mL，混匀；加入500 g的活性炭，在50 ℃下搅拌吸附20 min，用双层滤纸脱碳过滤；用0.22 μm微孔滤膜除菌过滤；分装成10 mL/支，置20 mL西林瓶中.

1.2.2 冻干工艺

将西林瓶放在隔板上，隔板温度设为0 ℃；封闭干燥，隔板温度从0 ℃降至-35 ℃，对冻干溶液进行固化4 h；打开冷阱，维持18 h；将隔板温度依次升至-5 ℃、20 ℃、40 ℃，且隔板在3个温度水平分别维持5 h、4 h、2 h；封盖，避光保存.

1.2.3 检测方法

文中马来酸桂哌齐特质量分数(以下简写为“含量”)、pH值、水分及有关物质均依据马来酸桂哌齐特注射液国家药品标准[WS1-(X-328)-2004Z]进行测定.

水溶液pH值测定：取3.2 g马来酸桂哌齐特干粉溶于100 mL水中，pH值应为3.5～4.5(中国药典2010年版二部附录Ⅵ H).

有关物质测定：避光操作.取含量测定项下的供试品溶液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液.按照含量测定项下的方法测定，精密量取对照溶液20 μL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20 %；再精密量取供试品溶液和对照溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至供试品溶液主峰保留时间的2倍.供试品溶液色谱图中，顺式异构体峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/2；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/10；其他未知杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的1/2.

水分测定：取注射用马来酸桂哌齐特，按照水分测定法(中国药典2010版附录Ⅷ M 第一法A)测定，含水分不得过1.0 %(质量分数).

马来酸桂哌齐特质量分数测定：按照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录Ⅴ D)测定.

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈和0.05 mol/L磷酸氢二钠缓冲液(用磷酸调pH值至4.5±0.1,体积比为40∶60)为流动相，检测波长为230 nm，柱温30 ℃.精密称取马来酸桂哌齐特顺式异构体对照品适量，加流动相制成每1 mL中约含0.2 mg马来酸桂哌齐特顺势异构体的溶液(A)；精密量取溶液(A)1 mL，此溶液置50 mL量瓶中，加对照品溶液稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液(B)；精密量取溶液(B)20 μL注入液相色谱仪，理论板数按马来酸桂哌齐特峰计算，一般不低于5 000，马来酸桂哌齐特与顺式异构体的分离度应大于1.5.

马来酸桂哌齐特质量分数测定法：避光操作.取马来酸桂哌齐特注射剂40 mg精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相溶解后，稀释制至刻度，摇匀，精密量取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取马来酸桂哌齐特对照品适量，同法测定.按外标法以峰面积计算，即得马来酸桂哌齐特质量分数，含马来酸桂哌齐特应为标示量的95.0 %～105.0 %.

2 结果与讨论

文中涉及百分数除主体含量为标示量的百分含量以外，其余均为质量分数.

2.1 辅料的选择

选用辅料需具有冻干属性，结合主要杂质马来酸桂哌齐特顺势异构体的结构特点，选用符合要求的山梨醇和甘露醇两种辅料进行对比.

按1.2.2方法制备的注射用马来酸桂哌齐特质量情况见表1.

表1 注射用马来酸桂哌齐特质量情况Table 1 The quality of maleate injection cinepazide

从表1数据可知：加入辅料的注射用马来酸桂哌齐特平均含水量比未加入辅料的马来酸桂哌齐特平均含水量高(均≤1 %)；加入山梨醇的注射用马来酸桂哌齐特平均主体含量均比加入甘露醇的注射用马来酸桂哌齐特平均主体含量高，且前者平均杂质总含量均低于后者，所以，选用山梨醇作为冻干剂.

2.2 山梨醇的影响

《辅料大全》中对山梨醇相关性质进行了较为详尽的阐述，详见表2.

表2 山梨醇物理性质及用途Table 2 The physical properties and uses of sorbitol

按1.2.2方法制备注射用马来酸桂哌齐特(80 mg/支)7批，每批8 000 mg，制备完成后于4 500 lx光照条件下放置5 d，其稳定性结果见表3.表3数据显示：在光照条件(4 500 lx)下，马来酸桂哌齐特注射剂(80 mg/支)含量降低，杂质增加；在马来酸桂哌齐特注射剂中加入山梨醇后，对杂质增加程度起到缓解作用，且随山梨醇加入比例增加，杂质增加程度降低.对于320 mg/支规格的马来酸桂哌齐特注射剂，加入相同量的山梨醇后，其主药与山梨醇的用量比要小于80 mg/支规格的注射剂，所以，向320 mg/支规格的马来酸桂哌齐特注射剂中加入相同量的山梨醇，其稳定性应不低于80 mg/支规格的注射剂.

表3 山梨醇不同用量下注射用马来酸桂哌齐特(80 mg/支)稳定性Table 3 The sorbitol different amount bet Injection(80 mg/branch) Stability

注：光照度4 500 lx.

2.3 冻干剂与水针剂的比较

根据1.2.3的投料情况，规格为80 mg/支和规格为320 mg/支的注射用马来酸桂哌齐特小试实验样品检测结果分别见表4，表5.

从小试样品制备及检验结果可知：经冻干工艺制备的注射用马来酸桂哌齐特，主体含量≥99.0 %，pH在3.5～4.5，杂质总含量≤1.0 %，符合国家药品监督管理局规定的质量标准.

与市售马来酸桂哌齐特注射剂(规格：2 mL，80 mg，批号2015011629，生产厂家：北京四环制药有限公司)对比结果见表6.

表4 小试实验样品检测结果(规格：80 mg/支)Table 4 The small scale experimental sample test results (Specifications:80 mg/support)

表5 小试实验样品检测结果(规格：320 mg/支)Table 5 The small scale experimental sample test results (Specifications:320 mg/support)

从表6对比结果可知：自制样品含量与市售品接近，主要杂质马来酸桂哌齐特顺式异构体含量不高于市售品，其他杂质含量明显低于市售品.

表6 实验样品与市售品情况对比结果Table 6 Test samples and commercially available product comparison results case

3 结 论

(1) 在马来酸桂哌齐特注射液中加入山梨醇后运用冻干工艺，对马来酸桂哌齐特注射液主要杂质(马来酸桂哌齐特顺式异构体)增加程度起到缓解作用，即通过加入山梨醇和运用冻干工艺可提高马来酸桂哌齐特注射液的稳定性.

(2) 注射用马来酸桂哌齐特工艺路线为：室温下，将60 g马来酸桂哌齐特粉末溶于900 mL注射用水中，充分搅拌；用1 mol/L NaOH调节pH值为4±0.5，加水至足量，混匀；加入100 g的活性炭，在50 ℃下搅拌吸附20 min，用双层滤纸脱碳过滤；用0.22 μm微孔滤膜过滤；使马来酸桂哌齐特为标示量的95.0 %～105.0 %，pH值调至4±0.5；规格为80 mg/支的分装成2 mL/支，置5 mL西林瓶中(规格为320 mg/支的分装成10 mL，置20 mL西林瓶中)；将西林瓶放在隔板上，隔板温度设为0 ℃；封闭干燥，隔板温度从0 ℃降至-35 ℃，对冻干溶液进行固化4 h ；打开冷阱，维持18 h；将隔板温度依次升至-5 ℃、20 ℃、40 ℃温度水平，且隔板在3个温度水平分别维持5 h、4 h、2 h；封盖，避光保存.