婴儿早期应用乳酸杆菌四联菌对预防过敏性疾病的临床研究

张 欢，丘小汕

(1.广东省惠州市中心人民医院，广东 惠州 516000；2.中山大学附属第一医院，广东 广州 510000)

近年来，婴幼儿过敏性疾病的发病率呈全球性增长趋势[1]，尤其是有过敏性疾病家族史的婴儿为发生过敏性疾病的高危儿。有关过敏性疾病的发病机制尚未完全明确，经典“卫生假说”认为儿童由于早期缺乏对传染性病原体、共生微生物(如肠道菌群或益生菌)和寄生虫的暴露，从而抑制疫系统的自然发育并增加了过敏性疾病的易感性[2]。目前临床研究主要集中在益生菌对已患有过敏性疾病的患儿的治疗作用[3]，国内对婴儿过敏性疾病的预防作用报道较少，其可能机制仍不清楚。本研究通过分别前瞻性观察健康足月出生婴儿和一级亲属有过敏性疾病史的高危儿均予早期服用乳酸杆菌四联菌3个月，以期为临床提供一种安全有效早期预防婴儿过敏性疾病的简易方法，现总结报道如下。

1 对象与方法

1.1研究对象选取2013年9月至2016年6月在惠州市中心人民医院出生30～42天龄健康足月出生婴儿共325例，根据一级亲属是否患有过敏性疾病(如特异性皮炎、过敏性鼻炎、哮喘、药物过敏等)分为A、B两组。A组为一级亲属曾患过敏性疾病，入组152人，其中随访脱落14人(失访率9.2%)，有效随访138人；B组则无一级亲属曾患过敏性疾病，入组173人，其中随访脱落33人(失访率19%)，有效随访140人。A、B两组中各随机双盲对照分为试验组和对照组，其中A组中益生菌组(n=72)与对照组(n=66)，B组中益生菌组(n=61)与对照组(n=79)。A、B两组中的益生菌组和对照组之间样本数基本相同，样本间胎龄、出生体重、男性比例等比较差异均无统计学意义，见表1。以上研究对象在纳入本研究前均征得其法定监护人的知情同意。

表1 A、B组中益生菌组与对照组一般资料比较

1.2方法试验组予口服乳酸杆菌四联菌(上海首源生物技术有限公司分公司，生产批号20150228-12)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei MP-137)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus MP-108)四联菌(益生菌含量每袋(2克)不少于100亿)，对照组不予口服乳酸杆菌四联菌，两组患儿如出现相关过敏性疾病时均按临床规范予对症治疗。

1.3观察项目①两组婴儿随访观察至满1周岁，每个月电话回访，记录发生湿疹、特异性皮炎、喘息的发生率及复发情况。其中特异性皮炎的严重程度通过SCORAD评分来评价[4]，面积计算使用九分法，严重程度以红斑、浮肿和/或丘疹、脱皮、苔藓形成和干燥各级分数的总和计算，主观临床表现包括瘙痒、失眠，主要由家长估测评分。SCORAD评分由下述公式计算而得:面积/5+3.5×严重程度+主观评分。②两组婴儿1岁龄时约返院抽血检测血清总IgE，用ELISA法检测血清IFN-γ、IL-12 、IL-4、TGF-β1水平。

1.4统计学方法采用SPSS 19.0对资料进行统计学分析。计数资料以百分率表示，比较采用卡方检验。计量资料以均数±标准差表示，比较采用t检验。P< 0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1湿疹发生情况比较A、B两组中益生菌组湿疹发生率均较低于对照组，差异有统计学意义(P< 0.05)，见表2。

表2 益生菌组和对照组湿疹发生情况 [n(%)]

2.2特异性皮炎发生情况比较A、B两组中益生菌组特异性皮炎发生率均低于对照组，SCORAD评分也低于对照组，差异有统计学意义(P< 0.05)，见表3。

表3 益生菌组和对照组特异性皮炎发生情况比较

2.3喘息发生及复发情况比较A、B两组中益生菌组喘息发生率低于对照组，喘息复发率也低于对照组，差异有统计学意义(P< 0.05)，见表4。

表4 益生菌组和对照组喘息发生及复发情况比较 [n(%)]

2.4实验室指标比较A、B两组中益生菌组1岁龄时血清IgE、IL-4水平低于对照组，而血清IL-12、TGF-β1、IFN-γ水平高于对照组，差异均有统计学意义(P< 0.05)，见表5。

表5 A、B两组中益生菌组和对照组1岁龄时血清指标比较

*与对照组比较，P< 0.05

3 讨论

婴儿湿疹、喘息、特异性皮炎均为临床上常见的婴幼儿过敏性疾病，在世界范围内，以上几种过敏性疾病的发病率逐年增高，曾有流行病数据显示我国部分城市婴儿湿疹发病率高达40%[5]，而一岁以内婴儿在呼吸道感染病程中发生喘息症状的高达50%[6]。现已证实，婴幼儿期反复发作湿疹、喘息，其与远期过敏性疾病的发生息息相关[7]。因此，早期干预婴幼儿过敏性疾病的发生和过敏历程，对儿童健康成长起到至关重要的作用[8]。

益生菌参与抑制过敏反应的机制尚未完全明确[9]。一项随机双盲安慰剂对照临床研究，该项研究有150名母亲和婴儿参与，在预产期前2～4周给予孕妇服用益生菌(鼠李糖乳酸杆菌，LGG)，以及产后婴儿服用益生菌不少于6个月，其研究结果表明:益生菌组与安慰剂组比较，益生菌组儿童生后两年内发生变态反应性疾病的风险降低，表明益生菌可以预防过敏性疾病的发生[10，11]。本文的研究结果显示无论一级亲属是否患有过敏性疾病，应用益生菌的A组及B组与对照组比较，湿疹发生率、特异性皮炎发生率、喘息发生率及复发均明显减少，差异有统计学意义，说明早期添加乳酸杆菌四联菌对婴儿过敏性疾病有一定的预防作用。一项随机临床对照研究，湿疹婴儿随机分三组，水解配方乳组、加乳酸杆菌GG组和加双歧杆菌Bb-12组，研究结果显示:湿疹严重程度评分(SCORAD)在随机化前这些婴儿SCORAD评分平均为16，两个月的补充治疗后，分别为13.4、1和0，6个月后三组的SCORAD指数均为0。其研究结果提示:补充益生菌不单单可以早期控制变态反应炎症，而且对患变态反应病的儿童病情相对轻[12]。本文研究结果显示，A、B两组中益生菌组特异性皮炎发生率均低于对照组，且SCORAD评分也低于对照组，差异有统计学意义，说明早期添加乳酸杆菌四联菌对婴儿患特应性皮炎风险减低，且可以减轻疾病的严重程度。

“肠道菌群假说”认为肠道正常菌群的某些种可以刺激免疫系统而不引发对机体有害的炎症反应，因为肠道正常菌群的组成中含有建立肠相关淋巴样组织(gut-associated lymphoid tissue，GALT)早期发育的刺激物，激发Thl型免疫应答[13]。肠道正常菌通过分泌IL-10、转化生长因子(TGF-B)抑制Th2诱导的过敏反应，并诱导产生口服免疫耐受，促进IgA分泌[14，15]，增强黏膜防御机制，起到抗过敏作用。本文研究结果表明，益生菌组婴儿体内IgE 、IL-4明显低于对照组，而其TGF-β1、 IL-12、IFN-γ水平高于对照组，差异均有统计学意义，表明乳酸杆菌可能通过降低体内IgE、IL-4水平，上调TGF-β1、 IL-12、IFN-γ水平，从而达到预防过敏性疾病的作用[16，17]。目前研究认为益生菌对GALT免疫性细胞的影响反映在减少Th2分泌细胞因子IL-4，同时增加Thl分泌IFN-γ。IL-4可诱导IgE合成，而IFN-γ则抑制IgE合成，使未致敏T淋巴细胞(Th0)分化倾向于Thl，促进Thl/Th2免疫应答的发育平衡，有助于诱导口服免疫耐受[18，19]。临床发现经乳酸杆菌降解的牛奶可使IL-4的产生减少，益生菌通过修改有害抗原的结构改变它的免疫原性，使细胞因子的产生发生变化，导致不同免疫反应发生。

综上所述，婴儿早期服用乳酸杆菌四联益生菌3个月可一定程度上预防过敏性疾病的发生或减轻相关症状，其机制可能与益生菌通过调节体内TGF-β1水平，进而上调IL-12、IFN-γ水平及下调体内IL-4、IgE水平有关。