徐端红,贾新彦,胡 梅
(河南农业职业学院,河南郑州 451450)
黄芪多糖是从黄芪根部提取出含量最多的一种天然大分子多糖物质,其在提高动物免疫力、抗病毒能力和促生长等方面具有较大应用价值(辜沅,2017)。黄芪多糖对机体多个免疫器官具有促生长作用,同时,可以在免疫器官出现异常时发挥调节与维护作用(杜立中等,2014;张训海等,2009)。研究表明,黄芪多糖对B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖分化具有促进作用,参与调节细胞免疫和体液免疫(Wang等,2013;Li等,2012)。此外,黄芪多糖可以促进消化道对营养物质的消化吸收,从而达到促进机体生长发挥的目的(Zheng等,2013;Zhong等,2012)。随着养殖业的不断发展和人们对抗生素等药物认知的提升,在食品安全问题日趋严峻形势的情况下,绿色食品受到更多关注,因此新的绿色饲料也成为人们关注的焦点(胡庭俊等,2005)。黄芪多糖凭借其促长增免疫、无毒副作用、无残留和活性多样等显著优势,在动物饲料添加剂方面具有较大应用潜能(Zhu等,2011)。目前关于黄芪多糖在猪、鸡和兔等动物养殖中的应用报道相对较多,而对羔羊的生长特性和免疫力方面的研究相对较少(魏炳栋等,2011;赵娟等,2010)。羔羊断奶前后是山羊生长周期中的一个关键点,4月龄左右羔羊处于快速生长阶段,消化系统发育处于过度阶段,功能尚不完善,对营养物质的消化吸收能力有限,常因营养不良导致生长发育受阻,抵抗力下降,因此,加强对断奶羔羊的饲养管理十分重要(Ye等,2014)。本文将黄芪多糖添加到断奶羔羊补饲的精料中,研究其在促进羔羊生长发育和增强免疫力方面的作用,为黄芪多糖在羔羊健康养殖中的推广应用提供理论依据,也为其作用机理的进一步研究奠定基础。
1.1试剂黄芪多糖粉购自伟立动保。细胞因子和免疫球蛋白ELISA试剂盒均购自Sigma公司
1.2试验动物选取4月龄健康断奶羔羊。
2.1动物分组选取4月龄健康断奶羔羊40只,将其随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照组,在试验组补饲精料中添加黄芪多糖粉,黄芪多糖粉与精料的用量比分别为0.2 g/kg、0.1 g/kg和0.05 g/kg,对照组不添加,正常饲喂,连续饲喂28 d。
2.2血清生化分析和生长激素水平试验结束后,对所有羔羊进行颈静脉采血,分离血清,进行血清生化指标和生长激素水平测定。
2.3平均日增重与料重比试验开始前和试验第28天称取各组羔羊重量,计算其平均日增重量;同时,记录每天加料量,除去损耗量,计算各组羔羊平均日采食量。并计算料重比,计算公式如下:
料重比=平均日采食量/平均日增重量。
2.4免疫球蛋白及细胞因子含量利用ELISA试剂盒测定血清免疫球蛋白IgM、IgG、IgA和白细胞介素 -6(IL-6)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)含量。
2.5羔羊发病率每日观察记录所有羔羊发病情况,分析各组羔羊发病情况。
2.6数据处理利用SPSS21.0软件进行方差分析,LSD法进行多重比较,P<0.01表示差异极显著,P<0.05表示差异显著。
3.1黄芪多糖对血清生化水平和生长激素水平的影响由表1可以看出,试验组和对照组血清中谷丙转氨酶、胰岛素和球蛋白含量差异不显著(P>0.05),试验组血清总蛋白和白蛋白水平与对照组差异显著(P<0.05),而谷草转氨酶差异极显著(P<0.01)。另外,高剂量组和中剂量组的血清总蛋白与低剂量组差异显著(P<0.05),高剂量组的谷草转氨酶与中剂量组和低剂量组差异显著(P<0.05)。而各试验组生长激素水平差异不显著(P>0.05),但均与对照组差异显著(P< 0.05)。
表1 血生化指标和激素水平检测结果
3.2黄芪多糖对平均日增重与料重比的影响由图1~2可知,饲料中添加黄芪多糖后羔羊日增重量均稍高于对照组,平均日采食量均相差不多,通过计算料重比发现,试验组羔羊料重比均低于对照组。
图1 平均日增重和平均日采食量
图2 料重比
3.3黄芪多糖对羔羊免疫指标的影响利用ELISA试剂盒对羔羊血清中的细胞因子和免疫球蛋白进行检测发现,与对照组相比,试验组羔羊血清中IgA含量极显著降低(P<0.01),IgM含量显著升高(P<0.05),IgG含量升高,但差异不显著(P> 0.05),IL-6与 TNF-α 含量下降,但差异不显著(P>0.05)。
表2 免疫指标检测结果
3.4羔羊发病率测定通过对所有羔羊发病情况进行统计发现(表3),对照组羔羊有4只出现腹泻症状,发病率最高(40%),低剂量组为10%,而高剂量组和中剂量组均无发病羔羊。
表3 羔羊发病率
黄芪成分复杂,活性物质多样,作为重要活性物质之一的黄芪多糖,主要由维生素、氨基酸鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和微量元素及未知生长因子等多种物质构成(Yun等,2012)。研究表明,在饲料中添加黄芪多糖可以明显改善动物机体对氨基酸的消化吸收(Lu等,2013)。王雨林等(2010)研究发现,在家禽饲料中添加黄芪对雏鸡生长发育和生产性能均有促进作用,同时可以改善机体免疫力,提高雏鸡对疾病的抵抗能力(Zhang等,2010)。有研究表明,黄芪多糖的用量与动物机体的生长性能有密切关系,但黄芪多糖对动物的作用效果各有差异(陈强等,2013)。黄芪多糖在一定的用量范围内有利于机体生长,超过一定的用量或用量过少都不能达到促生长的目的(张婧飞等,2003)。陈洪亮(2002)发现,不同来源的黄芪多糖对鸡免疫系统具有保护作用,但对鸡的生长性能无明显效果。
本研究表明,黄芪多糖对断奶羔羊有促进生长作用,在相同饲养条件下,添加黄芪多糖的羔羊日增重明显增加。在血生化指标方面,黄芪多糖可以明显影响血清总蛋白、白蛋白等含量,而血清总蛋白和谷草转氨酶水平与黄芪多糖的用量关系更加密切。试验组羔羊的血清总蛋白、白蛋白、生长激素和谷草转氨酶的水平显著高于对照组。试验组羔羊血清中生长激素水平均高于对照组,差异显著(P<0.05),其中高剂量组含量最高。此外,与对照组相比,试验组羔羊平均日增重均偏高,料重比均偏低,这表明黄芪多糖对羔羊的生长发育具有一定的促进作用。免疫指标检测结果表明,饲喂黄芪多糖粉后,羔羊血清中IgA含量下降,IgM含量显著升高,IgG含量升高,IL-6与TNF-a含量下降。此外,试验组羔羊健康水平整体较高,当黄芪多糖粉含量达到0.1 g/kg以上时,试验组羔羊疫病保护率可以达100%。本研究对黄芪多糖在促进断奶羔羊生长能力,增强机体免疫力,提高抗病能力等方面进行了探讨,为黄芪多糖在羔羊健康养殖方面的应用提供了理论依据,并为黄芪多糖的作用机制的研究奠定了基础。