宁夏回族高血压过氧化物酶体增殖物激活受体γ2基因多态性与血脂关系的探讨

刘海燕 张晓伏 徐清斌

【摘要】 目的：探讨宁夏回族高血压PPARγ2基因多态性与血脂的关系。方法：收集宁夏回族146例EH患者、回族112例NT者，采用聚合酶链反应限制性片段长度（PCRRFLP）多态性技术检测PPARγ2 Pro12Ala基因多态性，进一步分析宁夏回族高血压各基因型与血脂的关系。结果：宁夏回族人群Ala12携带者（PA/AA）的基因型分布及A等位基因频率在EH组和NT组间差异无统计学意义（P>0.05），宁夏回族高血压PA/AA基因型组甘油三酯水平低于PP基因型组，差异有统计学意义（P<0.05），在TC、HDLC、LDLC、BMI上差异无统计学意义（P>0.05）。结论：PPARγ2 Pro12Ala基因变异与宁夏回族高血压病无显著关联；PA/AA型高血压患者甘油三酯水平显著低于PP型者。

【关键词】 过氧化物酶体增殖物激活受体；多态性；宁夏回族；血脂

过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）是人类重要的核转录因子之一，其亚型PPARγ是参与调节糖、脂质代谢重要因子，PPARγ基因是一种遗传易感基因，Pro12Ala为PPARγ基因最常见的多态位点[1]，此变异与代谢综合征的关系是当今研究的热点之一，不同的种群研究结果不一，在此笔者关注的是PPARγ2基因Pro12Ala突变与宁夏回族高血压人群血脂的关系。

1材料与方法

1.1研究对象

研究对象来自2009年12月至2010年10月在宁夏医科大学总医院门诊体检及住院且长期居住于宁夏的回族个体。高血压组（EH组）146例，男74例、女72例，平均年龄（48.28±16.03）岁。正常对照组（NT组）112例，男63例、女49例，平均年龄（45.1±16.16）岁。

1.2方法

1.2.1收集一般临床资料，如姓名、年龄、性别、民族、家族史等。测量身高、体质量，计算体质量指数BMI。

1.2.2生化指标清晨空腹12h抽取外周的静脉血，行生化检查检测血尿酸（UA）、空腹血糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等。

1.2.3外周血抽提DNA静脉血EDTA-Na抗凝使用DNA小量抽提试剂盒提取血液基因组DNA。

1.2.4PCR扩增引物利用Premier5.0软件设计，上游引物为5CAAGCCCAGTCCTTTCTGTG3，下游引物为5AG TGAAGGAATCGCTTTCCG3。PCI反应体系20μL，反应条件：94℃预变性3min，94℃变性30s，50℃退火30s，

基金项目：宁夏医科大学青年基金项目（XQ2012010）

72℃延伸30s，循环35次，72℃延伸10min。对PCR扩增产物进行酶切，酶切产物经电泳系统电泳并软件分析电泳结果。

1.2.5PCRRFLP分析结果受检者DNA经PCR扩增后，可产生267bp特异扩增产物。扩增产物HpaII酶切后，Pro12野生纯合子（PP）呈二个电泳带型224bp，43bp，A la12突变纯合子（AA）呈一个电泳带267bp，Pro12A la突变杂合子（PA）电泳带呈三个电泳带267bp、224bp和43bp。见图1。

1.3统计学处理

采用SPSS 17.0软件进行数据分析，组间计量资料用（±s）表示，计数资料以频数表示，组间均数比较用t检验，方差不齐采用近似t检验。计数资料频数比较用χ2检验。检验水准a=0.05。

2结果

2.1EH组和NT组一般临床资料

EH组和NT组在年龄、性别、TC、HDLC、LDLC上无统计学差异（P>0.05）；在收缩压、舒张压、BMI、TG上有统计学差异（P<0.05）。见表1。

2.2EH组和NT组PPARγ2基因型及等位基因比较

两组PP、PA和AA三种基因型总体分布频率无统计学差异（χ2=2.118，P=0.282），P、A等位基因间差异无统计学意义（χ2=2.054，P=0.152）。见表2。

2.3宁夏回族高血压PPARγ2不同基因型间血脂水平的比较

PA/AA基因型组和PP基因型组的TG水平有显著差异（P<0.05），在TC、HDLC、LDLC、BMI上差异无统计学意义（P>0.05）。如表3。

3讨论

Pro12Ala基因多态性位于PPARγ2外显子B上，由于第34位核苷酸C→G的替换，而造成PPARγ2特有氨基酸序列发生改变，从而引起其功能的变化。Ala等位基因频率在不同种族中有差异，日本人为4%、萨摩亚人为8%、美国人为10%[2]。本研究发现宁夏回族高血压人群与正常人群A等位基因分别为7.5%和4.5%，与上述报道亦有所差异。

回族是我国具有代表性的少数民族之一，宁夏是我国回族聚居的主要地区之一，由于回族禁止与非信仰伊斯兰教的民族间通婚，因此形成了遗传上相对隔离的“隔离群体”。通过比较发现，本研究与既往多个研究结果存在差异，可能是样本量大小、基因多态性位点的作用强度不同、不同种群的遗传背景差异以及疾病、饮食习惯等不同导致的上述差异。总之，全面认识PPARγ2 Pro12Ala基因变异与宁夏回族高血压、血脂紊乱的相关性对研究我国不同人群代谢综合征的发病机制、早期预防及临床治疗起指导作用。

参考文献

[1] 张玉领，陈培，刘家秀.过氧化物酶体增殖物激活受体γ2基因Pro12Ala多态性与2型糖尿病相关性的Meta分析[J].中国糖尿病杂志，2013，21（05）：412415.

[2] 郑萍，秦勤.PPARγ基因多态性与冠心病及其危险因素相关性研究概况[J].中国分子心脏病学杂志，2012，12（02）：121124.

[3] 张晓伏，李新茹，薛新宏，等.过氧化物酶体增殖物激活受体γ2基因Pro12Ala多态性与宁夏汉族原发性高血压的关系[J].中国煤炭工业医学杂志，2017，30（08）：885889.

[4] 张晓伏，李新茹，薛新宏，等.過氧化物酶体增殖物激活受体γ2基因Pro12Ala多态性与宁夏回、汉族原发性高血压的关系[J].临床心血管病杂志，2018，34（01）：4751.

[5] 李秀丽，章琳，李影娜，等.PPARγ_2基因Pro12Ala多态性与2型糖尿病及其一级亲属血脂的相关性研究[J].西安交通大学学报（医学版），2013，34（05）：632636.