防城港市边境地区儿童地中海贫血基因类型分析

马秋琼 周丽 严芝光 张丽娟

【摘要】目的调查防城港市边境地区儿童地中海贫血发生率、基因类型及分布特征。方法搜集防城港市边境地区0～6岁儿童997例外周血进行血常规分析，血常规筛查阳性标本再进行地贫基因检测。结果血常规筛查阳性标本369例，地贫基因检出α地贫136例，β地贫39例，α复合β地贫11例。该地区儿童地贫基因携带率为18.66%，其中α地贫14.74%[（136+11）/997]（含α复合β），β地贫5.02%[（39+11）/997]（含α复合β）。该研究检出6种α地贫等位基因SEA/、α3.7/、α4.2/、ααWS/、ααQS/、和ααCS/，其中以SEA/最为常见，构成比为51.95%（80/154）；检出8种β地贫突变类型CD4142（CTTT）、28（A>G）、CD17（A>T）、IVSⅡ654（C>T）、IVSⅠ1（G>T）、CD7172（+A）、CD26（GAG>AAG）、CAP+4043（AACC），最常见的为CD4142（CTTT），构成比为46.94%（23/49）。结论防城港市边境地区0～6岁儿童地中海贫血发生率较高，查明其基因类型及分布特征，为地贫防控工作提供了资料。

【关键词】防城港市；边境地区；儿童；地中海贫血；基因检测

中图分类号：R556 文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2018.02.007

Analysis of gene types of thalassemia in children in Fangchenggang border area

MA Qiuqiong，ZHOU Li，YAN Zhiguang，ZHANG Lijuan

（The First Peoples Hospital of Fangchenggang，Fangchenggang 538021，China）

【Abstract】ObjectiveTo investigate the incidence，genotypes and distribution characteristics of thalassemia in children in Fangchenggang border area.MethodsA total of 997 children aged 0～6 years old from Fangchenggang border area were collected for blood routine analysis， and then blood routine screening for positive specimens and thalassemia gene detection were performed. Results369 positive specimens were screened out by blood routine test，and 136 cases were diagnosed as αthalassemia，39 cases as βthalassemia and 11 cases as αthalassemia combined with βthalassemia by thalassemia gene detection.The gene carrying rate of children with thalassemia in this area was 18.66%.Among them，that of αthalassemia was 14.74%（included αthalassemia combined with βthalassemia） and that of βthalassemia was 5.02% （included αthalassemia combined with βthalassemia）.Six kinds of αthalassemia alleles（SEA/，α3.7/，α4.2/，ααWS/，ααQS/ and ααCS/） were detected，of which SEA/was the most common，with a composition ratio of 51.95%（80/154）.Eight βthalassemia mutation types including CD4142（CTTT），28（A>G），CD17（A>T），IVSⅡ654（C>T），IVSⅠ1（G>T），CD7172（+A），CD26（GAG>AAG） and CAP+4043（AACC） were detected，of which CD4142（CTTT） was the most common，with a composition ratio of 46.94%（23/49）.ConclusionThe incidence of thalassemia in children aged 0～6 years old in Fangchenggang city is high.And to find out genotypes and distribution characteristics can provide data for the prevention and control of thalassemia.

【Key words】Fangchenggang；border area；children；thalassemia；gene detection

地中海贫血（地贫）是广西最常见的遗传性血液疾病，主要表现为慢性溶血性贫血，重型患者胎死宫内或出生后依赖输血生存并绝大部分在幼年期夭折[1]。广西是全国地贫高发地区，α地贫人群基因携带率为17.41%，β地贫人群基因携带率为6.37%[2]。地贫基因携带者一般无明显症状，但夫妻双方为同类型地贫基因携带者，下一代将有25%的概率成为重型地贫患者。重型地贫会给社会和家庭带来沉重的经济负担和精神负担。不同的国家或地区，不同的民族其基因的携带率和基因型不同，研究地中海贫血遗传病基因的携带率和基因种类，是地中海貧血防治决策的基础。防城港市边境地区有5个乡镇与越南接壤，是多民族聚居的地区，主要有汉、壮、瑶、京、苗等民族，一直以来又有与越南人通婚的习惯。推测该地区的地贫携带率和基因型不同于广西的壮族和汉族，故进行本次研究。

1资料与方法1.1研究对象搜集2016年5月～2017年10月防城港市边境地区的997例0～6岁儿童血样为研究样本。

1.2方法

1.2.1试剂与仪器血细胞分析采用法国ABX公司120DF 型血球分析仪及配套试剂； α和β地贫基因诊断试剂为深圳亚能生物技术有限公司提供，基因扩增仪为广州达安DA7600 型分析仪。

1.2.2检验方法及标准采集研究对象静脉血2 ml，EDTAK2抗凝，用全自动血细胞分析仪进行血细胞分析；以平均红细胞体积MCV<82 fl和（或）平均血红蛋白含量MCH<27 pg为地贫血常规筛查阳性指标[3]。阳性标本进行地贫基因检测6种α和17种β珠蛋白基因突变。

1.2.3地贫基因检测方法（1）α地贫基因诊断采用gapPCR/PCRRDB法：检测东南亚缺失型（SEA），37KB缺失型（α3.7），4.2KB 缺失型（α4.2）；Westmead 点突变（αWS）、CS点突变（αCS），QS点突变（αQS）。（2） β地贫基因诊断采用PCR结合反向点杂交（RDB）技术：检测中国人群8个常见突变位点（CD4142>CTTT、IVS2654C>T、CD17A>T、28A>G、CD26G>A、CD7172+A、CD43G>T、29A>G，以及9个位点突变：CCD1415+G、CD27/28+C、32C>A、30T>C、IVS11G>T、IVS15G>C、CD31C、CAP+4043AACC 和CAP+1A>C起始密码子ATG>AGG）。

1.2.4统计学方法根据基因型结果采用Excel 2010对数据进行录入、整理；采用SPSS 17.0 软件进行统计学处理。

2结果在997例0～6岁儿童血样中，通过血常规筛查阳性的有369例，地贫初筛阳性率为37.0%。369例血样再经地贫基因诊断为地贫基因携带者的有186例，其中α地贫136例，β地贫39例，α复合β地贫11例（见表1）。该地区儿童地贫基因携带率为18.66%，其中α地贫14.74%（含α复合β），β地贫5.02%（含α复合β）。本研究检出6种α地贫等位基因SEA/、α3.7/、α4.2/、ααWS/、ααQS/和ααCS/，以SEA/最为常见，构成比为51.95%（见表2）。检出8种β地贫突变类型CD4142（CTTT）、28（A>G）、CD17（A>T）、IVSⅡ654（C>T）、IVSⅠ1（G>T）、CD7172（+A）、CD26（GAG>AAG）、CAP+4043（AACC），最常见的为CD4142（CTTT），构成比为4694%（见表3）。

997例样本中，通过血常规筛查阳性的有369例，地贫初筛阳性率为37.0%，进一步经地贫基因诊断为地贫基因携带者的有186例，基因诊断率为50.4%（186/369），还有49.6%样本血常规筛查阳性但地贫基因检测阴性。有报道显示，90%以上6岁以下贫血儿为缺铁性贫血（IDA），尤其6 个月至2 岁的婴幼儿更为多见。IDA 是临床常见的一种贫血类型，是由于体内铁缺乏导致血红蛋白合成减少所致，与喂养不当、偏食、慢性腹泻等有关，临床上表现为小细胞低色素性贫血，以血清铁蛋白减少为特征，铁剂治疗有效[7]。由于缺乏铁蛋白等相关检查数据，这49.6%提示小细胞却不是地贫的儿童中具体有多少例是缺铁性贫血引起的还有待于进一步调查研究。

本次研究提示防城港市边境地区0～6岁儿童地中海贫血发生率较高，各级医疗机构应该针对可能人群建议其进行相关筛查，自开放二胎政策后，尤其是育龄人群更应当重视遗传咨询和基因诊断，对于孕妇必要时抽取羊水进行产前诊断，预防患有地中海贫血，尤其是重型患儿出生，以达到遏制地中海贫血流行、减轻患病家庭经济负担的目的。

参考文献[1]谢丹尼，李卫.地中海贫血产前基因诊断现状和发展趋势[J].中国计划生育学杂志，2004，12（8）：506.

[2]熊符，孙曼那，娄季武，等.广西壮族自治區人群血红蛋白病的分子流行病学调查[C].//第八次全国医学遗传学学术会议（中华医学会2009年医学遗传学年会）论文集，2009：6465.

[3]徐湘民.地中海贫血预防控制操作指南[M].北京：人民军医出版社，2011：3738.

[4]刘富华，贾艺聪，陈洁晶，等.广西地区13589例地中海贫血筛查结果及基因突变类型分析[J].临床血液学杂志，2015，28（11）：966969.

[5]蒲滨，颜善活.钦州市4304例地中海贫血基因诊断结果[J].中国热带医学[J].2013，13（6）734745.

[6]涂志华，黄慈丹，温英梅，等.海口地区人群地中海贫血基因型分析[J].中国优生与遗传杂志 2013，21（10）：2829.

[7]马芬，李长春，周文君.530例贫血儿童的血常规检测分析[J].国际检验医学杂志，2013，34（11）：14691470.

（收稿日期：2018-01-13修回日期：2018-04-10）

（编辑：梁明佩）