2016-2017年北川县H5型高致病性禽流感免疫抗体监测及分析

王雪 李海全 万青山 肖香 陈桥 黄宇

1.四川省北川羌族自治县农业局

2.四川省三台县农业局

禽流感是一种由A型流感病毒引起的多种家禽及野鸟的高度接触性传染病，被OIE列为A类传染病，我国也将其列为一类动物疫病，为强制免疫病种。2016-2017年期间，为分析春秋两季集中免疫质量，及时掌握流行病学动态和免疫效果，笔者在每年的5月和11月对辖区内部分规模场、散户进行H5型高致病性禽流感抗体的血清学监测采样和检测，现将近2年的检测结果报告如下。

一、材料与方法

1.试剂。自配阿氏液，1%鸡红细胞悬液，pH7.2的0．Olmol/L磷酸盐缓冲液（PBS），H5型禽流感抗原，及阴、阳对照血清（由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供），批号:20160401，20170512。

2.采样。

（1）采样选择。共对17个养鸡场、180个村218户采样。如表1。

表1北川县高致病性禽流感监测场点

（2）采样要求。每个家禽均采用翅静脉采取血液，并记录地址、日龄、养殖规模、免疫次数、最近免疫时间、品种及使用疫苗的相关资料。

（3）采集内容。共采集鸡血583份、鸭血25份、鹅血10份，每个样品采血量1.5～2.0ml。

3.检测方法。血凝抑制试验:采集血液后，及时分离出血清，并参照H5高致病性禽流感诊断技术（GB/T 18936-2003）和禽流感微量红细胞凝集抑制试验（SN/T1182.2-2004）的规定，采用血凝抑制试验，集中对血清样品进行实验室检测，并作系统分析。

4.结果判定。以完成抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。只有阴性对照孔血清滴度不大于2 log2．阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。HI价小于或等于3 log2判定HI试验阴性；HI价等于4 log2为可疑，需重复试验；HI价大于或等于 5 log2 为阳性。

二、结果与分析

2016年全年共检测免疫禽血清310份，其中合格255份，平均合格率为82.3%。2017年全年共检测免疫禽血清308份，其中合格237份，平均合格率为77%。结果见表2。

表2 2016-2017年北川县H5高致病性禽流感免疫抗体检测结果 份

1．规模场检测结果。在2016年总检测数90份中，合格79份，平均合格率为88%，2017年总检测数80份中，合格71份，平均合格率为89.5%。

2.散养户检测结果。在2016年总检测数220份中，合格176份，平均合格率为80%，2017年总检测数228份中，合格166份，平均合格率为72.8%。

三、结论与讨论

1.规模场的抗体水平普遍比较高，这些养殖场基本上是外地购买鸡苗，蛋鸡居多，选址严格，周围有天然的免疫屏障，有专业的兽医技术人员驻场或作技术指导，疫苗有专规范保存和运输，按照科学的免疫程序进行接种。商品代养殖场均经两次禽流感免疫，有时新禽二联和重组禽流感间隔免疫。

2.有的散养户禽流感免疫抗体合格率始终较规模场低的原因主要有以下几方面：（1）免疫程序不科学。有些散养场养殖户防疫意识淡薄，重点靠春秋两季集中免疫，基础免疫过迟或加强免疫的间隔时间过长，加之北川地处山区，家禽多散养林间，存在免疫困难，免疫效果差；（2）疫苗的运输和保存不当。北川山区养殖户不集中，村社间距离远，疫苗浪费严重，禽流感灭活油乳苗稀释后要在当天内用完，禽流感一新城疫重组二联活疫苗稀释后2小时内用完。有些养禽户家禽散养不方便抓，多用二联苗饮水，自行挤到水槽内，之前没有限水，无法保证2小时内喂完，水槽也没清理干净，家禽免疫效果不得而知；（3）疫苗使用前准备不充分，未按免疫剂量接种，加大或减少剂量。疫苗使用前温度回到室温的水平，油乳剂要充分摇匀，加上注射过程中操作技术不熟练，出现空打或少打。有的还随意减少或加大剂量，造成免疫抑制或不能产生足够的抗体，以致抗体水平偏低；（4）禽苗首免10～14日龄，但是散养户考虑到家禽日龄比较小，一般不让免疫。以致抗体水平低。

3.需要注意的是，本次检测的规模场样品170份中，阳性率虽然都达到80%以上，但是尚未出现达100%免疫合格率的鸡群，仍需要认真分析免疫过程中的各种问题，按照强制免疫计划做好强制免疫工作。2017年比2016年春秋防规模场检测合格率要略高，原因应该是2017年局里加强了规模场管理，大部分用的是重组禽流感，而有文献表明重组禽流感比新禽二联苗效果要好。农业部2017年起增加对H7型高致病性禽流感免疫，新禽二联苗将退出市场，但是禽流感不能饮水免疫对于散户抗体达标始终存在困难，

4.HI主要检测血清中针对HA蛋白的抗体，具有特异性，HA抗体的产生在很大程度上反映了机体对病毒感染的抵抗力水平。因此，免疫是预防和控制禽流感最有效的手段。在家禽生产中，长期对AI的血清学监测是十分必要的，同时多做宣传，定期培训县内的基层防疫员，了解疫苗注射流程及必要性，最终提升禽流感的抗体合格率。