pH值反调技术在注射用替加环素生产工艺中的应用

王燕清 陈嘉璐 罗灼辉 曾华哲*

（1 丽珠医药集团股份有限公司，广东 珠海 519020；2 丽珠集团丽珠制药厂，广东 珠海 519020）

替加环素由惠氏（Wyeth）公司研发，美国FDA于2005年6月至2006年7月批准惠氏的替加环素（Tigecycline，商品名Tygacil注射用替加环素）为治疗复杂腹腔内感染和复杂皮肤感染的一线药物[1]，其化学结构式见图1。该品种是甘氨酰四环素类抗生素中获得批准的第一个产品。替加环素对G+菌、G-菌、厌氧菌有广谱抗菌活性, 包括多重耐药性的G+菌，如MRSA、MRSE、抗青霉素的肺炎链球菌、VRE。对不同耐药机制的耐四环素致病菌同样有效[1-3]。

图1 替加环素结构式

注射用替加环素在储存过程中会因为产品中存在水分而使其差向异构体增加的比例增加，要控制产品中的差向异构体的量小于3%，必须严格控制产品的水分在留样过程中始终不能超过2%，条件极其苛刻。但实际产品在留样过程中会因为胶塞本身含有水分等各种因素，很难保证产品在两年的留样过程中始终保持在2%以内，从而导致产品的差向异构体超标。本实验拟在生产工艺中增加pH值回调技术，可使产品的差向异构体在40 ℃加速留样6个月内增加不超过0.5%，绝对值不超过1.0%，而且水分可控制在4%以内，在提高产品质量的同时使生产更具有可控性。

表1 不同pH处方工艺40 ℃加速稳定性情况

表2 不同pH起点返调的处方40 ℃加速稳定性情况

表3 不同pH返调终点的处方40 ℃加速稳定性情况

表4 不同原料厂家制备成的制剂40 ℃加速稳定性数据

1 材 料

1.1 实验器材：冷冻干燥机、pH计、水分仪、高效液相色谱仪。

1.2 原料药：替加环素、购自。

1.3 试剂：NaOH、HCl、注射用水、2M的NaOH溶液、2M的HCl溶液。

2 方法与结果

2.1 反调工艺的初步考察：按处方量配制溶液四份，取两份，以2M盐酸分别调pH至4.0、4.8；另取2份，以2M盐酸调pH至4.0，再以2M氢氧化钠分别返调溶液pH至4.8、5.2，冻干，考察加速实验稳定性变化情况。结果详见表1。

由以上数据可见，在一定pH范围内，药液经返调处理，产品稳定性明显高于未经返调的产品，pH4.8与pH4.0返调至4.8处方相比，加速6个月内，返调处理可降低EPI增长率达 0.9%，且返调幅度越大，EPI增长率越低，稳定性越高。另外，普通生产工艺下，如果不将产品的水分始终控制在2.0%以下，产品的差向异构体无法达到质量标准规定的3%以下；但是，经过反调的生产工艺，即使水分最终达到4.0%，产品仍然合格。

2.2 返调起点的考察：按处方量配制溶液若干份，取三份，以2M盐酸分别调pH至4.0、3.5、3.0，再以2M氢氧化钠返调pH至5.2，冻干，考察加速实验稳定性变化情况。结果详见表2。

由实验结果可得出结论，返调起点对产品的稳定性有明显的影响，在一定的pH范围内，返调前pH值越低，返调幅度越大，杂质EPI越小，产品越稳定。因此试探着往更低的考察。

研究数据表明，把返调起点控制在pH 2.0～2.5，加速实验6个月内，能把EPI增长控制在0.5%以内。因而处方工艺返调起点可定在pH 2.0～2.5。

2.3 返调终点的考察：由2.1可知，当返调起点相同时，不同的返调终点对产品的稳定性也会产生一定的影响，因此，我们继续考察不同返调终点的影响情况。

按处方量配制溶液若干份，取两份，以2M盐酸调pH2.5，再以2M氢氧化钠分别返调pH至5.2、6.0。冻干，考察加速实验稳定性变化情况。结果详见表3。

实验数据表明，以pH2.5为返调起点时，返调至pH5.2与返调至6.0，加速6个月内稳定性差异较小，返调至6.0，成品EPI略优约0.1%；另一方面，考虑到替加环素进口注册标准中制剂以5.3 mL生理盐水复溶后pH要求在4.5～5.5，故把返调终点定在pH4.8～5.4。

2.4 生产工艺适应性验证：为了验证确定后的生产工艺，选择了市场上获得的其他三个不同厂家的小试原料，按照确定的生产工艺进行小试生产，并留样考察其稳定性情况，结果见表4。

由以上数据可知，该生产工艺适合于该产品其他厂家原料用于制剂生产，且研究表明该工艺下，即使产品的水分高于进口注册标准规定的2%达到4%时，产品稳定性没有发生明显的变化。

3 讨 论

3.1 注射用替加环素在生产过程中，如果采用普通工艺，必须严格控制产品的水分，保证留样过程中始终小于2%，方可保证产品质量。

3.2 采用pH反调工艺，可提高产品的稳定性，可大大降低产品差向异构体的产生，保证产品的差向异构体有效期内小于1%。

3.3 采用pH反调工艺，大大提高了注射用替加环素的生产可控性，在产品的水分达到4.0%以内，产品稳定性良好。

参考文献

[1] Wyeth Pharmaceutics Tygacil (Tigecycline) for Injection [package insert] [M].Philadelphia, PA: Wyeth Pharmaceuticals Inc,2005.

[2] Athwan ID.Tigecycline clinical evidence and formulary positioning[J].Int J Antimicrob Agents,2005,25(3):185-192.

[3] Zhanel GG,Homenuik K,Nicholk,et al.Eglycy lcyclines a comparative review with the tetracyclines[J].Drugs,2004,64(1):63-88.