养猪场5种常见疫苗不同组合的免疫效果研究

熊忠良 温文生 史小娜 丁凡 程敏华 杨纯杰 王肆玖 吕长军

摘要 [目的]优化免疫接种程序，减少疫苗接种次数以及减轻猪场疫苗接种工作量。[方法]对猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病以及猪喘气病5种猪场常见猪病的疫苗按照不同组合采用混合注射、分点注射以及单苗注射等接种方式进行免疫试验。[结果]通过田间16轮次的重复试验和效果观察发现，3种不同免疫方式对猪群不同时期的抗体水平、日增重以及育成率等没有显著差异。[结论]5种疫苗不同组合混合接种在临床上具有可行性，为猪场因地制宜地制定免疫程序提供参考。

关键词 疫苗;不同组合;免疫效果

中图分类号 S858.28文献标识码 A文章编号 0517-6611（2018）33-0061-04

猪瘟（CSF）、蓝耳病（PRRS）、猪伪狂犬（PR）、猪圆环病毒病（PCVD）以及猪支原体肺炎（MPS，又称“喘气病”）是我国猪场临床最常见的5种传染性疾病。为了预防以上疾病，猪场通常采用疫苗免疫接种，但由于猪场猪病复杂繁多，需要接种的疫苗也很多，往往在制订免疫程序时发生时间上的冲突，另外在免疫接种时需要多次注射，这样不但会造成猪群的多次应激，不利于猪的生长，而且增加了防疫人员的工作量。为了减少免疫接种次数，又能达到同样的免疫效果，笔者在一普通规模化养猪场的商品猪群中将猪瘟等五种猪病疫苗按照不同组合进行免疫接种试验。

1 材料与方法

1.1 试验地点

湖北汉川市某规模化猪场，生产母猪800头，自繁自养，封闭式管理，猪群总体健康状况良好，为CSF阴性猪场。虽然该场是PRRSV阳性猪场，部分母猪也检测到PRVgE-Ab阳性，但各项生产成绩和技术指标正常。供试猪为该场母猪所产的健康仔猪，每头试验仔猪打耳标，做好标记。

1.2 疫苗

猪圆环病毒2型杆状病毒灭活疫苗（CP08株），简称亚单位圆苗，批号为20170606;猪瘟活疫苗（细胞源），简称猪瘟苗，批号为20170703;猪伪狂犬病耐热保护剂活疫苗（C株），简称伪狂苗，批号为20170402;高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（JXA1-R株），简称蓝耳苗，批号为20170204，以上疫苗均由武汉中博生物股份有限公司生产。猪支原体肺炎复合佐剂灭活疫苗（P株），又称喘泰克，双针型（简称喘气双针），批号为MHB-17014，一针型（简称喘气单针），批号为MHB-17017，由美国普泰克公司生产。

1.3 检测试剂 CSFV-Ab检测试剂盒、PRRSV-Ab检测试剂盒、PRVgE-Ab检测试剂盒均为韩国金诺（MEDIAN）诊断试剂盒;PRVgB-Ab检测试剂盒为爱德士（IDEXX）诊断试剂盒;PCV2-Ab检测试剂盒由武汉中博生物股份有限公司研制提供。操作方法及结果判定标准均按照各试剂盒说明书进行。

1.4 试验分组

每轮次试验使用仔猪90头，分为3组，每组30头。Ⅰ组为疫苗混合接种组，Ⅱ组为疫苗两侧接种组，对照组（CK）为单苗接种组，对照组除“圆+喘”2种灭活苗为混合接种外，蓝耳苗、猪瘟苗及伪狂苗均按照不同时间先后单苗接种。试验时间为2017年8月16日至2018年3月28日，共完成16轮次的重复接种试验，共使用仔猪1 440头。

1.5 接种方案

3组仔猪除1日龄使用伪狂苗1 mL滴鼻相同外，其余均不相同。另外，蓝耳苗、猪瘟苗以及伪狂苗等活疫苗接种前均要进行稀释，按照以下方案进行配苗。具体接种方案见表1。

1.6 采血及抗体检测

每轮次每组30头仔猪中各选择10头仔猪进行采血，分别在7、21、35、42、56、63、77、91日龄连续采血，分离血清后检测CSFV-Ab、PRRSV-Ab、PRVgE-Ab、PRVgB-Ab以及PCV2-Ab等抗体水平，再从每组10份血样中再随机选择具有完整检测数据的5头仔猪血样进行跟踪分析，统计16轮试验中各组仔猪的80头猪血样分别在不同日龄各种抗体水平和阳性率。

1.7 日增重计算

分别在28和91日龄对每组30头仔猪中未采血的20头仔猪逐头称重，采用自由采食的饲喂方式，计算各组试验仔猪在28～91日龄的平均日增重。

1.8 临床观察

1.8.1

免疫副反应。副反应判定标准如下：疫苗接种前后体温变化1.0 ℃以上，接种20 min内出现呕吐、呼吸困难、卧地不起、尖叫、口吐白沫、四肢抽搐、全身皮肤紫癜以及休克死亡等症状，发生任何一种症状即判定为副反应。

1.8.2 育成率计算与病原学检测。观察仔猪的生长发育情况，统计发病死亡情况，计算各组育成率，另外对部分病样进行病原学检测。

2 结果与分析

2.1 血清抗体检测结果

2.1.1 猪瘟抗体检测结果。

从图1可以看出，Ⅰ、Ⅱ、CK组猪瘟抗体平均阻断率分别为33.41%、45.83%和46.07%，对照组（CK）的平均阻断率较高，这可能是因为对照组仔猪在28、63日龄分别用猪瘟单苗接种，而Ⅰ组和Ⅱ组则分别用几种疫苗同时分点或混合注射，从而对抗体整齐度产生一定影响。

从图2可以看出，7日龄Ⅰ、Ⅱ、CK组仔猪CSF抗体平均阳性率分别为66.3%、73.8%和68.8%，此后逐漸下降，28日龄猪瘟初免后Ⅰ组仍呈下降趋势，56日龄降至17.5%，但在63日龄经过“瘟+伪”混合接种加强后，猪瘟抗体阳性率明显上升，91日龄Ⅰ组猪瘟抗体阳性率明显高于Ⅱ组和对照组（CK）。

2.1.2 猪蓝耳病抗体检测结果。

在猪蓝耳病疫苗的免疫猪群中，可以通过抗体水平的离散度，抗体值的高低等间接评价疫苗的免疫效果[1]。从图3可以看出，Ⅰ、Ⅱ、CK组PRRSV抗体S/P值分别为1.14、1.52和1.55，虽然Ⅰ组S/P值相对较小，免疫效果不如Ⅱ组和对照组（CK）。

从图4可以看出，7日龄后PRRS抗体阳性率先下降再逐渐上升，91日龄Ⅰ、Ⅱ、CK组PRRS抗体阳性率分别为94%、100%和98%，结合抗体S/P值、阳性率及临床表现可知，试验后期PRRSV阳性率高可能是疫苗和野毒感染共同作用的结果。

2.1.3 猪伪狂犬病抗体检测结果。

从图5、6可以看出，3组仔猪PRVgE-Ab S/N值绝大多数大于0.6，呈阴性，说明PRV野毒感染压力小，7日龄PRVgE-Ab抗体平均阳性率分别为37%、21%和17%，应属于母源性抗体，随着时间的推移，仔猪母源抗体逐步消失，91日龄绝大多数仔猪PRVgE-Ab为阴性，Ⅰ、Ⅱ、CK组PRVgE-Ab抗体平均阳性率分别为5%、11%、12%。

从图7、8可以看出，3组PRVgB-Ab S/N值均逐步增加，抗体阳性率也逐步降低。结合抗体检测、临床表现以及病原学检测可知，91日龄PRVgB-Ab抗体阳性率应该主要是由疫苗接种产生的。

检测结果表明，63日龄猪瘟和伪狂犬2种活疫苗同时分点和混合注射均不影响各自免疫抗体的产生，与单苗接种相比，3组间无明显差异。

2.1.4 猪圆环病毒抗体检测结果。

从图9、10可以看出，对照组的PCV2-Ab抗体平均值相对较小，且PCV2-Ab抗体阳性率也相对较低，可能与Ⅰ组和Ⅱ组均接种圆环苗2次，而对照组只在14日龄接种1次有关。不管接种1次还是2次，91日龄各组PCV2-Ab抗体阳性率分别为75.8%、82.5%和71.3%，3组间没有显著差异（P>0.05）。

2.1.5 猪喘气病观察结果分析。

评价猪喘气病疫苗的免疫效果主要从生长速度、日增重、饲料报酬、临床病例、抗体水平及病理变化等方面着手，因条件有限未进行饲料报酬和抗体水平测定。Ⅰ组和Ⅱ组先后接种2次双针型喘气苗，对照组只接种单针型喘气苗1次，经观察3组试验仔猪喘气病临床病例均很少，剖检也很少发现肺脏上有典型的肉样病变，在生长发育、日增重及育成率等方面3组间也没有明显差异，说明单针型和双针型均能有效预防喘气病的发生。

2.2 仔猪日增重结果

统计16轮试验中的每轮每组试验仔猪28～91日龄的平均日增重。Ⅰ组仔猪的平均日增重为（467.5±51.1）g，Ⅱ组仔猪的平均日增重为（485.9±47.0）g，对照组仔猪的平均日增重为（461.4±39.8）g。28～91日龄Ⅱ组仔猪的平均日增重最高，高于Ⅰ组和对照组，但差异不显著（P>0.05）。

2.3 免疫接种副反应情况统计

根据副反应的判定标准，分别统计16轮试验中几种疫苗组合接种所导致的副反应头数。由表2可知，几种疫苗组合接种后引起1.1%～1.7%的应激反应，均在正常范围内，其余几种单苗（猪瘟苗外）或组合苗接种后几乎没有观察到明显的应激反应，尤其是猪瘟苗和伪狂犬苗2种活苗在63日龄不管是混合接种还是分开两侧接种均没有发现仔猪出现副反应，说明猪瘟苗和伪狂苗同时接种是安全的。

2.4 仔猪死亡情况与育成率

统计7～91日龄16轮试验各组仔猪的死亡情况及总的育成率。由表3可知，16轮仔猪初试总头数1 440头，7～91日龄共死亡仔猪143头，主要是由于腹泻及呼吸道疾病造成的，其中Ⅰ组死亡47头仔猪，Ⅱ组死亡51头仔猪，对照组死亡45头仔猪，Ⅰ、Ⅱ、CK组仔猪育成率分别为90.2%、89.4%和90.6%，经t检验发现3组间没有显著差异（P>0.05）。

2.5 临床发病死亡仔猪病原学检测

由表4可知，CSFV和PRV病原学检测均呈阴性，PCV2也只有1头仔猪呈阳性，说明这3种疾病的压力较小，但送检病样中PRRSV病原检测阳性率均较高，另外该场保育猪中副猪嗜血杆菌病较为突出，结合临床表现、病理剖检等，认为试验仔猪死亡可能与这2种疾病混合感染有关。

3 讨论

为了优化免疫接种程序，减少免疫接种次数，减轻基层兽医的工作量，国内许多专业人士对临床常见的几种猪苗进行各种联合试验，其中猪瘟、猪口蹄疫和高致病性蓝耳病3种疫苗联合使用试验最多[2-9]，试验结果对临床应用均具有一定的指导意义。朱子健等[10]将PCV2灭活疫苗和猪瘟活疫苗同时分点注射和混合注射，结果表明2种免疫方式均不影响各自免疫抗体的产生，但用2种灭活苗混合后稀释活苗进行接种试验国内尚未见报道。

“喘泰克”是美国PORTATEK公司产品，为第4代支原体肺炎疫苗，有双针型（P株抗原60 μg/mL）和单针型（P株抗原80 μg/mL）2种，该苗物理灭活，不含灭活剂。亚单位圆苗（CP08株）是国内首个杆状病毒表达的基因工程亚单位疫苗，该苗采用的β-丙内脂（BPL）灭活剂能在疫苗液体中完全水解为无毒性的β-羟基丙酸，因此成品苗中无残留有害成分，临床上常与喘泰克混合使用。由于2种疫苗均为灭活苗，且均为复合水性佐剂和成苗中无残留灭活剂等特点，为2种疫苗混合接种甚至稀释活苗提供了临床应用的可能性。

该试验是将“圆+喘”2种灭活苗混合后分别稀释蓝耳病活苗和猪瘟活苗以及将猪瘟活苗和伪狂犬活苗进行混合接种等，以期探索“死苗+活苗”和“活苗+活苗”混合使用的免疫效果，尤其是“圓+喘”2种灭活苗混合稀释活苗的接种方式，虽然在一定时间段内存在不同程度上影响活苗抗体水平的可能性，但是通过16轮次的重复田间试验发现，混合接种、分点接种以及单苗接种对猪群日增重、生长状况以及育成率等方面没有显著差异，为猪场因地制宜地制定免疫程序

提供一定的参考与借鉴。

关于疫苗混合接种的问题，尤其是多种疫苗或“死苗+活苗”混合接种的问题，有的学者持谨慎态度。该试验通过16轮次田间的重复试验发现，某些特性疫苗按照一定的接种方式、免疫时间以及规范操作，进行混合或分点同时接种，其免疫效果与单苗接种无明显差异，而某些指标还优于单苗接种组，同时该试验是在江汉平原上的一个普通的大型猪场进行的，具有一定的代表性，不过由于该场是一个蓝耳病阳性猪场，且猪场环境相对较差以及其他疾病的困扰等，对试验产生一定的干扰和影响，其试验结果可能具有一定的局限性，因此有必要与实验室相关研究相结合，以便更好地在临床上推广应用。

参考文献

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