高危HPV阴性宫颈癌患者的临床病理特征研究

陈倩，方绳权

（湖北省肿瘤医院 妇瘤科，湖北 武汉 430079）

宫颈癌（cervical cancer，CC）是妇科最常见的恶性肿瘤。其中，浸润癌多发于45～55岁，原发癌多发于30～35岁，对女性健康产生严重威胁。近年来CC发病率逐年升高，全球每年约50万新发CC患者，给包括我国在内的发展中国家CC患者家庭造成较重负担[1]。临床公认CC和癌前病变的主要病因为高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）持续感染，故加大对高危型HPV感染情况监测，对HPV阳性患者进行有效干预，能从根本上降低CC发病率[2]。薄层液基细胞学技术检测是临床上常用的筛查CC方法，提高宫颈上皮内瘤变诊断的敏感性，降低假阴性率[3]。由于HPV感染是CC的主要原因，因而HPV-DNA检测也是CC筛查的重要手段，但无法明确高危HPV阴性CC患者的发病机制，且高危HPV阴性CC患者的预后较差[4]。本研究对高危HPV阴性CC患者的临床病理特征进行探究，以期为后期临床治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2013年1月-2017年1月该院收治的1 123例CC患者的临床资料。年龄为18～60岁，平均（43.28±8.37）岁。纳入标准：①年龄≥18周岁；②临床资料完整。排除标准：①妊娠期；②合并严重的心、肝、肾及肺功能障碍。

1.2 方法

1.2.1 采集标本非月经期内采集3 d内未进行阴道冲洗、阴道内给药，且24 h内无性生活的患者样本。方法如下：使用窥器将子宫颈暴露，将专用的HPV子宫颈刷放在子宫颈口，然后轻轻顺时针转动5圈，取出子宫颈刷放入已加入专用细胞保存液的取样管内保存。样本在4℃保存，24 h内检测。

1.2.2 仪器和试剂专用HPV子宫颈刷、HPV-DNA提取试剂盒、医用核酸分子快速杂交仪、HPV核酸扩增分型检测试剂盒、第2代杂交捕获技术检测试剂盒。

1.2.3 薄层液基细胞学检测采用Auto Cyte液基薄片制片机（美国Tripath Imaging公司）自动制片，染色，并使用光学显微镜检查。以TBS分类法作为诊断依据进行细胞学诊断：①正常范围；②低度鳞状上皮内病变（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）；③意义不明确的非典型鳞状细胞（atypical squamous epithelial cells of undefined significance，ASCUS）； ④鳞状细胞癌；⑤高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）。

1.2.4 高危型HPV分型检测使用医用核酸分子快速杂交仪，并通过导流杂交基因芯片技术对子宫颈脱落细胞标本进行分型检测，根据基因芯片上HPV分型的分布位置判断HPV分型。高危HPV的13种型别检测为任何一型即可诊断为高危型HPV阳性，未检测到任何一型诊断为高危型HPV阴性。DNA分离和提取、PCR扩增、导流杂交、酶标显色及判断结果等操作严格按照说明书进行操作。采用HC-Ⅱ法对高危型HPV阴性标本进行HPV-DNA检测，荧光读数与阴性测定值（RLU/CO）比值＜1.0诊断为高危型HPV感染阴性，≥1.0诊断为高危型HPV感染阳性。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS 19.0统计软件，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组高危型HPV患者的年龄构成比较

两组高危型HPV患者的年龄构成比较，采用χ2检验，差异无统计学意义（P＞0.05）。患者多发于36～50岁，且以腺癌为主。见表1。

2.2 两组高危型HPV患者的病理类型比较

两组高危型HPV患者腺癌比较，采用χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），高危型HPV阴性组患者腺癌比例高于高危型HPV阳性组患者。见表2。

2.3 两组高危型HPV患者的临床分期比较

两组高危型HPV患者的临床分期比较，采用χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05），高危型HPV阴性组Ⅱb+Ⅲ-Ⅳ期比例高于高危型HPV阳性组。见表3。

表1 两组高危型HPV患者的年龄构成比较 例（%）

2.4 HPV-DNA检测和薄层液基细胞学检测筛查价值比较

HPV-DNA检测和薄层液基细胞学技术检测比较，该研究中1 123例CC患者的HPV-DNA检测对高危HPV阴性CC患者的诊断敏感性和阴性预测值。见表4。

表2 两组高危型HPV患者的病理类型比较 例（%）

表3 两组高危型HPV患者的临床分期比较 例（%）

表4 HPV-DNA检测和薄层液基细胞学检测筛查价值比较 %

3 讨论

CC的发生与HPV感染有密切相关性，HPV普遍存在于自然界，且有超过100种类型，但多数HPV病毒能通过人体免疫力清除，不会致病，仅少数HPV病毒可致癌[5]。依据HPV病毒的致病能力将其分为高危型和低危型，高危型HPV持续感染是造成CC的主要致病因素，因而清除高危型HPV感染对降低CC发生率有重要意义[6]。临床筛查主要通过查找宫颈涂片中的异常细胞，宫颈细胞涂片的广泛使用在很长一段时间内被认为是一种能成功筛选CC的方法，能降低其发病率[7]。但宫颈细胞图片本身局限性较大，敏感性低，重复性差。已有研究指出[8]，HPV阴性患者仍然存在CC风险，RODRÍGUEZ-CARUNCHIO等[9]通过HC-Ⅱ法对CC患者的HPV感染进行检测，阴性率为10.2%，提示笔者在临床可采用HPV检测对CC患者进行筛查。

本研究结果显示，由于子宫颈细胞染色体畸变、基因甲基化及p53基因突变等遗传学变化而引起高危型HPV阴性CC患者发病的主要因素。随着子宫颈疾病的不断进展，HPV病毒可能脱失，进而造成HPV检测结果呈阴性。临床薄层液基细胞学技术检测的特异性较高，应用于对高危型HPV阴性CC患者的筛查，若仅对HPV进行检测，可能会导致漏诊的出现。但若与薄层液基细胞学技术检测联合使用，可降低漏诊率，提高检测阳性率[11]。在本研究中笔者发现，临床若患者经HPV检测为阴性，但其存在异常阴道流血、性交后出血及子宫颈表面柱状上皮外移等体征或临床症状异常时，应联合薄层液基细胞学技术检测对患者进行筛查[12]。

综上所述，HPV-DNA检测能较好诊断高危型HPV阴性CC患者。应加强对36～50岁HPV阴性的检测，预防和降低CC的发病率、死亡率。

参 考 文 献：

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