乙酰甲喹在鸡体内代谢是否产生MQCA的研究

汤庆彩 何方洋 彭庆军 贾芳芳 卢金荣 郑迎春 （①北京勤邦生物技术有限公司 北京 102206 江苏益客食品集团有限公司 江苏 南京 河北省辛集市畜牧局 ④北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心）

乙酰甲喹又名“痢菌净”，与喹乙醇均属于喹噁啉类合成药物，具有广谱抗菌性[1-3]。由于这两种药物价格低廉，并且具有促进畜禽生长等优点，因此被广泛应用于畜禽养殖业。乙酰甲喹和喹乙醇残留对人体会产生致癌性、抗药性等不良后果，国际上大多数国家将其列为限用药物，我国虽已制定“动物性食品中兽药残留最高限量”标准，但滥用和超标使用兽药的状况仍十分严重[4-7]。目前检测乙酰甲喹和喹乙醇药物的方法有：液相色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法，酶联免疫法等。

喹乙醇在动物体内进行代谢，其中3-甲基－喹噁啉-2-羧酸(MQCA)是该药物的标志性代谢物[9-11]，因此，在检测喹乙醇残留量时，通常情况下分析MQCA。在现有的监控禽产品质量风险的系统中，MQCA相对乙酰甲喹来说，具有更高的监控力度。因此，如果乙酰甲喹的代谢产物中包含MQCA，则会直接干扰产品的质量判定。为确认乙酰甲喹(痢菌净)在鸡体内的代谢物是否包含MQCA，本文以黄羽肉鸡为研究对象，以期为禽产品质量风险监控及乙酰甲喹(痢菌净)的使用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 2017年4月25日，于北京周边购买20只健康黄羽肉鸡。

1.1.2 乙酰甲喹(痢菌净)药粉 所用乙酰甲喹(痢菌净)药粉共计3份，市场采购1份(以下简称药粉1)、养殖户提供2份(以下简称药粉A和药粉B)。

1.1.3 仪器设备 LC-20AD高效液相色谱仪：日本岛津制作所；XEVO TQ超高效液相-质谱联用仪：沃特世科技(上海)有限公司(Waters)。

1.1.4 酶联免疫试剂盒 喹乙醇代谢物残留酶联免疫检测试剂盒(型号KA08003H)：北京勤邦生物技术有限公司生产。

1.2 方法

1.2.1 分组 从20只健康黄羽肉鸡中随机选取2只宰杀，经测定不含喹乙醇代谢物；将剩余18只分成3组，每组6只，第一组饲喂药粉1，给药量分别为0、5、10、50、100、200mg，代谢24h后宰杀；第二组饲喂药粉A，给药量分别为0、5、10、50、100、200mg，代谢24h后宰杀；第三组饲喂药粉B，给药量分别为0、5、10、50、100、200mg，代谢24h后宰杀。宰杀后，每只鸡均取肌肉、肝脏，均质后于-20℃冰箱储存。

1.2.2 样本前处理 液-质联用、ELISA两种检测方法，均是在酸性条件下使用乙酸乙酯提取鸡肉中可能存在的喹乙醇代谢物。

2 结果与分析

2.1 测定药粉

2.1.1 喹乙醇含量 分别使用50%甲醇-水将“药粉1”、“药粉A”、“药粉B”配置成浓度为10μg/ml的溶液，使用高效液相色谱仪测定其中喹乙醇的含量。检测结果表明：3种乙酰甲喹(痢菌净)药粉中均不含有喹乙醇，故排除因药粉中含有喹乙醇而造成饲喂后产生MQCA的可能性。

2.1.2 喹烯酮含量 据已有研究结果，喹烯酮主要代谢物中包含MQCA[12-14]。分别使用50%甲醇-水将“药粉1”、“药粉A”、“药粉B”配置成浓度为1μg/ml的溶液，使用高效液相色谱仪测定其中喹烯酮的含量。检测结果表明：3种乙酰甲喹(痢菌净)药粉中均不含有喹烯酮，故排除因药粉中含有喹烯酮而造成饲喂后产生MQCA的可能性。

2.2 喹乙醇代谢物

样品制备后，使用液-质联用、酶联免疫试剂盒同时测定，结果及对应给药量统计如附表：

附表 液-质联用法和酶联免疫试剂盒法测定结果

3 结论与讨论

3.1 药粉间差异

目前市场销售含乙酰甲喹(痢菌净)成分的兽药品牌众多，纯度不一，其有效含量存在差异，造成养殖环节使用量不易把控。

3.2 类似药物干扰

通过测定上述三份乙酰甲喹(痢菌净)药粉，明确不含有喹乙醇、喹烯酮。若饲喂后产生喹乙醇代谢物，其来源排除由喹乙醇、喹烯酮在鸡体内代谢所产生。

3.3 产生喹乙醇代谢物

将乙酰甲喹(痢菌净)药粉按梯度饲喂黄羽肉鸡，经24h代谢，其代谢物中包含MQCA，且含量与给药量呈正相关。

4 结语

（1）乙酰甲喹(痢菌净)代谢物种类复杂，本次研究表明，MQCA是其代谢过程中的产物之一。关于乙酰甲喹(痢菌净)代谢机制、代谢物种类等，有待更深入的研究。（2）养殖生产过程中，使用乙酰甲喹(痢菌净)则直接干扰判定产品中MQCA含量。引导养殖个体规范用药，整顿兽药行业生产标准，需要更多企事业单位参与其中。

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