采用化学发光免疫分析法筛查丙肝的结果分析

董璐艳，王菊英，苏　明，魏　军，3，李　锋，3

(1.宁夏医科大学临床医学院医学检验学系，银川　750003； 2.宁夏医科大学总医院医学实验中心，银川　750004； 3.宁夏临床病原微生物重点实验室，银川　750004)

丙型病毒性肝炎(丙肝)，是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的一类传染病，极大的危害人们的健康和生命。HCV主要侵犯肝脏，导致慢性肝炎，其中部分患者可发展为肝硬化，甚至肝癌[1]。据世界卫生组织统计，目前全球约有1.85亿HCV感染者，感染率为2.8%，并且每年有约35万因HCV感染导致死亡的病例[2，3]。在我国多地发生丙肝疫情的暴发，发病率和死亡率有越来越高的趋势[4]。本研究旨在将2011～2015年宁夏医科大学总医院门诊及住院患者的所有血清抗-HCV结果进行回顾性分析，探讨化学发光免疫分析法对丙肝筛查的适用性，了解宁夏地区丙肝的感染现状，为预防、诊断和控制丙肝提供科学思路。

1　材料和方法

1.1研究对象研究对象均来自宁夏医科大学总医院2011年1月～2015年12月的门诊及住院患者，涵盖了宁夏所有区县人群，共计209 889例。其中男性106 169例，女性103 720例；0～10岁20 562人、11～20岁9 204人、21～30岁29 049人、31～40岁31 345人、41～50岁39 275人、51～60岁34 309人、61～70岁29 155人、70岁以上16 990人。同一患者的重复检测结果不再计入。

1.2试剂和仪器试剂包括Vitros抗-HCV试剂盒，丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒，凯杰生物工程有限公司HCV-RNA试剂盒。仪器包括Vitros 3600全自动免疫分析仪，SIEMENS ADVIA2400全自动生化分析仪，ABI PRISM 7500型核酸扩增荧光检测仪。

1.3方法

1.3.1实验方法：采用化学发光免疫分析法(CIA)检测抗-HCV，速率法检测ALT，荧光定量RT-PCR法检测HCV-RNA。

1.3.2病例分组及判断标准：依据美国《2003CDC实验室丙肝抗体检测及结果报告指南》将抗-HCV检测结果S/CO值分为弱阳性(0.9≤S/CO值≤8.0)和阳性(S/CO>8.0)两组。依照《丙型肝炎防治指南》(2015更新版)[5]临床诊断标准，据病人“流行病学史+临床表现+实验室检查(如ALT，HCV-RNA指标)”等，进行“急性丙肝”的确诊；据病人“流行病学史、抗-HCV，HCV-RNA，肝组织病理学检查”等，进行“慢性丙肝”的确诊。

1.4统计学分析用SPSS 20.0统计软件进行数据处理，不同性别组间、年龄组别间结果差异比较采用卡方检验，丙肝感染阳性率的年龄趋势分析采用回归分析的曲线估计作图，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1HCV感染状况209 889例患者中抗-HCV结果有反应性的为2 829例(占1.35%)，其中弱阳性组为1 268例(占研究人群的0.60%)，阳性组为1 561例(占研究人群的0.74%)。最终1 549例被确诊为丙肝(感染率为0.74%)，占抗-HCV有反应性总病例的54.75%。其中急性丙肝24例(占1.55%)，慢性丙肝1 525例(占98.45%)。在S/CO值>8.0组，1 523例被确诊患丙肝，确诊率为97.57%；在0.9≤S/CO值≤8.0组，26例被确诊为丙肝，确诊率为1.68%，且其确诊率随S/CO值的增大而升高。

2.2感染HCV的人群分布特征确诊感染HCV的人群中，男性807例，女性742例，男女丙肝感染率分别为0.38%和0.35%，差异无统计学意义(χ2=1.432，P=0.231)。按年龄分组，0～10，11～20及>60岁组患者丙肝阳性率低，21～60岁年龄段患者丙肝阳性率较高，差异有统计学意义(χ2=254.901，P<0.01)，见表1。将丙肝阳性率随年龄变化作趋势分析显示，10岁以下儿童丙肝阳性率最低，随年龄增加逐步上升，31～40岁年龄段阳性率最高，后随年龄增加逐步降低，见表1，图1。各科室均有患者分布，肝病门诊最多，共575例(占37.12%)，其次为内科科室共256例(占16.53%)，外科科室共196例(占12.65%)，感染科共141例(占9.10%)，妇产科共91例(占5.87%)，肿瘤科共71例(占4.58%)，儿科共31例(占2.00%)，其他科室共188例(占12.14%)。

表1

感染HCV人群不同年龄组间差异比较

图1　丙肝感染阳性率随年龄变化趋势图

2.3抗-HCV假阳性的人群分布特征最终1 230例抗HCV有反应性的病人被确诊未感染丙肝，仍有50例病人因为病史资料相关实验室检测结果等缺失未确诊是否患有丙肝。将该人群按年龄分组，0～10岁年龄组抗-HCV假阳性率最高(约占该年龄段抗-HCV有反应标本的83.33%)，随年龄增加假阳性率逐渐降低，31～40岁年龄组最低，40岁后随年龄增加假阳性率逐渐增高，差异有统计学意义(χ2=153.606，P<0.01)，见表2。比较该组患者的就诊科室分布，分布最多的科室为产科，共113例(占9.1%)；其次为肿瘤科，共107例(占8.70%)；再次为儿科，共80例(占6.50%)；口腔颌面外科，共40例(占3.25%)。

表2

抗-HCV假阳性人群年龄差异比较

3讨论丙肝大多起病隐匿、症状不明显，不易引起大家注意，但其发展为慢性肝炎的比例很高[6]。2006年对我国31个省160个疾病监测点的1～59岁常住人群约8万人份血清标本检测结果显示，我国1～59岁人群组丙肝感染率为0.43%。该研究结果提示宁夏地区丙肝感染率约较全国检测稍偏高。分析其原因可能是前者选取我国31个省的常住人群为研究对象，而该调查研究选取宁夏医科大学总医院的患病人群，从而导致其丙肝感染率统计结果比普通人群高。要注意加强对门诊及住院患者丙肝的筛查，做到早诊断、早治疗。

该地区确诊患丙肝的人群中，男女丙肝的感染率无明显差异。其高发年龄段与蒋庆等[7]人报道基本相符，医院内各科室均有丙肝患者分布。2014年中国《丙型病毒性肝炎筛查及管理》[8]卫生行业标准中明确定义：有医源性暴露史(包括手术、透析、不洁口腔诊疗操作等)、准备进行特殊或医疗侵入性操作的人群(如输血或应用血制品者、接受各种内镜检查者、各种有创导管及其他有创诊疗者等)是需要丙肝筛查的高危人群，基本涵盖了医院各科室人群。因此，我们既要加强对高发年龄段人群丙肝的筛查，又要重视加强院内感染的预防和控制。

采用化学发光免疫分析法检测抗-HCV，若结果为弱阳性时，其假阳性率极高。本研究发现，儿童及老年人的假阳性率比例高，而中年患者假阳性率低。妇产科、肿瘤科、儿科及口腔颌面外科的患者丙肝假阳性率相对其他科室患者较高。分析原因可能为：①存在其他IgG抗体的干扰，如：儿童，尤其是6月龄内母乳喂养的婴儿，其体内含有来自母亲乳汁的IgG抗体；老年人易并发风湿类疾病，ASO，RF，ANA 等都会导致抗-HCV假阳性。②口腔颌面外科的患者有相当部分病人为非综合征型唇腭裂患儿，据王菊英等[9]人的报道，引起该人群出现假阳性的原因尚不清楚，有可能因为其代谢产物与 HCV抗原存在相似的表位，刺激机体产生的抗体与试剂HCV抗原发生了交叉反应，抑或是这些异常蛋白质干扰了CIA反应。③产科大部分患者为孕妇，关于该人群及肿瘤病人产生抗-HCV假阳性原因的研究很少，这些患者体内代谢产物与正常人相比发生明显改变，不排除存在一些复杂抗体的干扰，但原因尚待进一步确证。

应用RT-PCR方法检测HCV-RNA可以缩短检测窗口期，因此已成为HCV感染诊断、疗效监测及血液筛查的重要手段[10]。但HCV-RNA检查对实验室及操作人员的要求很高，很多实验室达不到开展分子诊断实验室的资质。重组免疫结合试验(RIBA)曾被推荐为检测丙肝的确证实验，但其成本高、且仍有少部分病人不能完全确诊。因此化学发光免疫分析法更适合对丙肝的初步筛查，可用前两种方法对丙肝可疑患者进行辅助确诊。从对诊断丙肝的灵敏度、特异度和成本考虑，采用化学发光免疫分析法均可满足临床对丙肝初筛的需要。但采用CIA法检测抗-HCV抗体，当0.9≤S/CO值≤8.0时，虽然对丙肝感染有一定的诊断价值，鉴于其假阳性率很高，对于该部分患者的结果报告我们要慎重。Home[11]曾提出，若检测抗-HCV为反应性，建议进一步检测HCV-RNA，若HCV-RNA为阳性表明存在丙肝现症感染，要采取治疗措施清除病毒；若为阴性，考虑为非现症感染，建议采用其他实验进一步补充确认(如：为解决生物学假阳性的HCV感染问题，可考虑另一种HCV抗体检测方法进行检测，如果检测者被怀疑在过去6个月内患有HCV感染或有临床证据表明有HCV感染或如果对测试样品的处理或存储有疑问，可重复HCV-RNA检测)。因此为减少误诊率的发生，我们可以在报告单上添加备注，建议患者进行HCV-RNA或RIBA等补充实验，或建议其1～3个月后进行抗-HCV复检。综上，我们应不断完善对丙肝的筛查和监测体系，为丙肝的早期诊断、疗效判断、预后评估提供依据[12]。

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