GeneXpert检测在结核病诊断中的应用

曹鸥婕

[摘要]目的评价GenXpert检测在结核病诊断中的应用价值。方法方便选取2014年2月-2017年3月云南省曲靖市第一人民医院感染科接收308例对象进行检查，以培养法作为诊断“金标准”。结果GeneXpert诊断敏感性、特异性、阴性预测值、符合率高于PPD皮试、T-SPOT.TB，差异有统计学意义（P<0.05）。GeneXpert对结核病的诊断敏感性96.20%、特异度99.33%、阳性预测值99.35%、阴性预测值96.13%、符合率97.73%。相较于比例法，GeneXpert对利福平耐药的敏感性、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率分别为66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%。结论Gen-eXpert检测诊断结核病效果较好，可作为初始诊断的标准技术。

[关键词]结核病；GenXpert检测；诊断

[中图分类号]R521 [文献标识码]A [文章编号]1674-0742（2017）10（a）-0028-03

我国结核病年死亡率13万例，是其他传染性疾病死亡的2倍还要多。约80%结核病为肺结核，筛查、诊断困难是导致结核病进展、耐药的重要原因之一，以骨关节结核病为例，涂片法敏感性不足15%，传统的PCR法污染风险较高，同时这些检查的操作复杂，难度大。培养为基础的鉴定以及药敏试验需要超过2个月，结核菌素试验存在不良反应，禁忌证多。GeneXpert检测是一种全自动病原体快速检测系统，可当日获得试验结果，进行耐药性分析，指导临床治疗。该次研究试以2014年2月-2017年3月该院收治的308例怀疑为结核病的对象进行结核病作为对象，评价GenXpert检测在结核病诊断中的应用价值，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

方便选取该院308例怀疑为结核病的对象进行结核病诊断，其中男250例、女158例，年龄10-79岁，平均（45.6±11.8）岁。最终诊断为结核病患者158例，其中肺结核148例、肺外结核10例。纳入标准：①怀疑为结核病，有发热、咳痰等重典型症状，或出现发热、关节痛等关节结核病典型症状；②采用GeneXpert等结核病诊断技术；③临床资料完整。结核病诊断标准：①肺结核，2份痰液进行图片镜检，或1份痰做Xpert MTB/RIF检测，当患者有耐药结核风险，或合并HIV感染，或病情严重，需要采用XpeIt MTB/RIF初始诊断，对于涂阴疑似肺结核者，采用Xpert MTB/RIF检测或培养诊断，基于血标本的血清学或γ-干扰素释放试验无法诊断活动性结合者；②肺外结核，所有患者怀疑肺外结核，采用相应的样本，进行微生物、组织学价差，采用XpertMTB/RIF检测作为初始诊断。

1.2方法

所有患者进行PPD皮试、结核感染T细胞免疫斑点法（T-SPOT.TB）、Xpert MTB/RIF诊断，肺结核患者痰液进行图片镜检，同时采集痰液、或组织样本，进行培养。（1）PPD皮试：PPD5u在前臂掌侧皮内注射，注射后72h后检查皮肤反应，游标卡尺测量皮肤硬结，若硬结直径<5mm则为阴性，否则为阳性，若出现溃疡、破裂也视为阳性。（2）结核感染T细胞检测，肝素锂抗凝真空采血管采集待测对象的左臂外周静脉血5mL，酶联免疫斑点实验（ELISA），以酶联斑点读取分析仪测算斑点数，依次作为诊断标准。判断标准：①若阴性对照孔点数<6，抗原A孔或B孔斑点数一阴性对照孔斑点数≥6，则为阳性，否则为阴性；②若阴性对照孔点数>6，抗原A孔或B孔斑点数≥2×阴性对照孔斑点数，则为阳性，否则为阴性。（3）GeneXpert检测：怀疑非肺结核者，取痰液标检测，肺外结核取组织液进行监测，采用碱处理一中和离心沉淀法处理，提取DNA转移到新管，进行PCR扩增、杂交，进行结果判断，采用试剂盒附带的评估表，根据显影的膜条贴，结合对照带、扩增对照，测定阳性情况，判断耐药情况。

1.3观察指标

PPD皮试、T-SPOT.TB、GeneXpert诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、符合率对比。XpertMTB/RIF诊断利福平耐药性结果（以比例法作为金标准）。

1.4统计方法

采用SPSS 20.0统计学软件进行计算，敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、符合率采用x²检验比较，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1诊断结果

PPD皮试.T-SPOT.TB.GeneXpert檢测结果如下表1。

GeneXpert诊断敏感性、特异性、阴性预测值、符合率高于PPD皮试、T-SPOT.TB，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.2利福平耐药分析

相较于比例法，GeneXpert对利福平耐药的敏感性、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率分别为66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%。

3讨论

该次研究显示，GeneXpert对结核病的诊断敏感性96.20%、特异度99.33%、阳性预测值99.35%、阴性预测值96.13%、符合率97.73%，达到较高水平。其他学者调查显示，GeneXpert对结核病诊断敏感性、特异性均在95%以上，特异度在99%以上，故被世界卫生组织推荐作为结核病的首选快速诊断技术。当然需注意的是，对于肺外结核，GeneXpert需要获得组织样本，限制了其在肺外结核病诊断中的应用。GeneXpert不仅可用于定性诊断，还可进行药敏性分析，指导治疗，研究中相较于比例法，GeneXpert对利福平耐药的敏感性、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率分别为66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%，特异性、阴性预测值达到较高水平，即若诊断为利福平敏感，则出现耐药的风险较低。不同学者调查研究的GeneXpert对利福平耐药的敏感性存在较大的差异，在40%～70%不等，这可能与流行病学特征差异有关。

GeneXpert检测计数，具有以下优势：①工作流程简单，直接监测痰液以及痰沉淀；②操作简单，仅需要1个步骤准备工作；③整个流程仅需要110min，可进行快速检测；④无需生物安全柜，安全性好，污染率低；⑤对结核分枝杆菌特异性敏感性与培养相近，本组对象敏感性、特异性均在99%以上；⑥还可同时进行利福平耐药；⑦培训所需的时间短，即使是非结核试验室的专业人员，也能够快速掌握。GeneXpert因具有以上优势，相较于其他血清学诊断计数，具有高特异性、阴性预测值。需注意的是，对于痰涂片为阴的标本，GeneXpert的敏感性为60%～80%rn，但仍高于其他监测方法，对于肺外结核淋巴结组织、脑脊液等其他组织样本，敏感性也在8%～92%之间，该次研究出现的6例假阴性，均为肺外结核，肺外结核敏感性为40%。

GeneXpert检测诊断结核病效果较好，可作为初始诊断的标准技术，特异性、阴性预测值较高。

（收稿日期：2017-07-09）