岳子强,陈琼科,吴 清
(1.重庆市巴蜀中学高2018级22班,重庆 400013;2.重庆市人民医院三院院区中西医结合科/检验科,重庆 400015)
本研究观察金银花、蒲公英体外抑菌作用,总结如下。
药材:金银花、蒲公英均购于重庆市人民医院三院院区中药房。
菌珠:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌由重庆市人民医院三院院区检验科冻存。
试剂:氯化钠、营养琼脂粉、琼脂培养基、蒸馏水、生理盐水均由重庆市人民医院三院院区提供。仪器:电子天平、立式电热压力蒸馏灭菌器、恒温水浸锅。
金银花及蒲公英水煎液的制备:称取药材粉末约10g,精密称定;加蒸馏水50mL,用大火煮开后转小火煎煮30min,趁热抽滤;滤渣再加蒸馏水50mL同法煎煮1次,抽滤;合并两次滤液,浓缩至含生药1g/mL.4℃保存备用。
实验菌珠:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌由重庆市人民医院三院院区检验科微生物室提供的菌种,经扩大培养获得。
菌悬液的制备:分别将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌接种于琼脂培养基斜面,37°培养24h,然后以无菌水冲洗,配成含菌落数约为108个/mL的菌悬液备用待用[1]。
抑菌试验方法:测药物的抑菌直径圈直径定性分析药物的抑菌作用。 采用琼脂扩散法[2],每平加0.1mL菌液,涂布整个培养基表面,37°吸附30min。正面均匀放置4个直径约为6mm的无菌不锈钢牛津环。再用移液器在孔中加金银花、蒲公英及两者混合液约0.1mL,37°恒温培养箱内培养24h,观察并记录抑菌圈的有无及直径大小(重复2次,每次做4孔,求直径的平均值)。按抑菌圈直径的大小作为判定敏感度高低的标准,抑菌圈直径大于20mm为极敏,15~20mm为高敏,10~14mm为中敏,10mm以下为低敏,无抑菌圈为不敏[3]。
金银花、蒲公英水提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌环的抑菌直径皆大于15mm,金银花水提取物对大肠杆菌的抑菌环直径小于10mm,但蒲公英水提取物对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的抑菌环直径皆大于15mm,两种联合对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的抑菌环均大于20mm。金银花及蒲公英水提取物对金黄色葡萄球菌均有抑制作用,蒲公英对大肠杆菌也有抑制作用,但金银花对大肠杆菌的抑制作用较弱,但两者联合后对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有抑制作用,而且比单用效果更强。见表1。
表1 金银花及蒲公英抑菌作用比较 (mm,±s)
表1 金银花及蒲公英抑菌作用比较 (mm,±s)
药物 抑菌环直径平均值金黄色葡萄球菌 大肠杆菌金银花 16.14±0.53 9.43±0.64蒲公英 16.43±0.62 15.12±0.71金银花加蒲公英 21.26±0.49 20.92±0.58
金银花[4]又名忍冬花,是忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花。金银花味甘,性寒。具清热解毒、疏散风热功效。用于痈肿疔疮、喉痹、丹毒、风热感冒、温病发热、热血毒痢等。蒲公英[5]是菊科植物蒲公英、碱地蒲公英或同属植物的全称。蒲公英性寒,具有清热解毒、散结消肿、清利湿热等功效。现代药理研究表明,金银花主要含有有机酸以及黄酮类化合物,如绿原酸、咖啡酸、原儿茶酸等,另含木犀草素、木犀草苷、挥发油、皂苷、鞣质等,具有抗病毒、抗毒素、解热抗炎等作用,所以对多种致病菌有抑制作用[6]。本实验观察到金银花水提物对革兰氏阳性菌有明显的抑制作用,对革兰氏阴性菌抑制作用较弱,这与杨海霞等[7]观察研究的结果一致。蒲公英主要成分包括黄酮类、酚酸类、挥发油类等,具广谱抗菌消炎、调节免疫及抗肿瘤等作用,故对革兰氏阳性菌及阴性菌皆有明显的抑菌效果,这与孟静思[8-9]的研究结果相符。二者联合应用抑菌作用比单药作用均强。这也为临床用药提供了试验抑菌,同时从以上可以看出,中药复方制剂的疗效是现代药理研究中药单体所不能比拟的,更不能取代,两者联合增强了效果,同时也 改变了抗菌谱。当然中药复方制剂的工艺有待进一步完善提高,才能更好地应用于临床。本实验只是对金银花、蒲公英进行了粗提,下一步将进一步观察研究其抑菌有效成分及最低抑菌浓度。
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