宁夏银北地区慢性HBV感染者病毒基因型的分布与临床的关系

王小红 程玉娥 李露露

753200宁夏石嘴山市第一人民医院，石嘴山市

近年来的研究发现，HBV的复制、HBeAg血清学状态、病毒基因型及基因变异在CHB疾病进展中发挥重要作用。

本研究对81例慢性HBV感染者的标本进行基因分型测定及乙肝病毒DNA定量、乙肝两对半定量、肝功能以及肝脏纤维化程度检测，分析慢性HBV感染者病毒基因型在宁夏银北地区的分布情况以及与各检测指标之间的联系，现报告如下。

资料与方法

2017年1月-2018年11月收治慢性HBV感染患者81例，诊断均符合中华医学会2015年修订《慢性乙型肝炎防治指南》的诊断标准[1]，并排除合并甲、丙、丁、戊型等其他肝炎病毒感染以及自身免疫性肝病、药物性肝损害、酒精性肝病等。其中男61例，年龄20～76岁；女20例，年龄25～76岁。其中慢性乙肝42例，乙肝后肝硬化27例，原发性肝癌12例。

方法：采用荧光PCR法对入选病例标本进行基因分型测定及乙肝病毒DNA定量检测，用免疫分析法定量检测HBV血清学标志物，血清学检查肝功能，Fibroscan无创性超声诊断仪检测肝脏纤维化程度，并对结果进行相关性分析。

观察指标：观察慢性HBV感染者病毒基因型在宁夏银北地区的分布情况；观察入选慢性HBV感染者乙肝病毒DNA定量、乙肝病毒e抗原、ALT、AST以及肝脏纤维化程度与乙肝病毒基因分型的相关性；以及探讨分析乙肝病毒基因型与入选慢性乙型肝炎组、乙肝后肝硬化组、原发性肝癌组3组临床患者之间的关系。

结 果

研究病例纳入情况：收集病例81例，男61例，平均年龄(48.54±12.43)岁；女20例，平均年龄(52.7±12.81)岁；慢性乙型肝炎42例(51.9%)，乙肝后肝硬化27例(33.3%)，原发性肝癌12例(14.8%)。

宁夏银北地区慢性HBV感染者病毒基因型分布情况：81例宁夏银北地区的慢性HBV感染者中共检测出B、C、D、C/D重组型4种基因型，其中B型3例(3.7%)，C 型 64例(79%)，D 型 3例(3.7%)，C/D重组型3例(3.7%)，未检测出基因型8例(9.9%)。本结果表明，宁夏银北地区的慢性HBV感染者中病毒基因型分布主要以C型为主。经Fisher确切概率法统计分析，B、C、D、C/D重组4组基因型在不同性别人群中的分布差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

宁夏银北地区慢性HBV感染者病毒基因型分布与疾病程度的关系：宁夏银北地区慢性HBV感染者基因型中C型在肝癌组中100%、肝硬化组中96%，均高于慢性乙型肝炎组78.4%及其他基因型组，但组间分布差异经Fisher确切概率法统计分析差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

宁夏银北地区慢性HBV感染者病毒基因分型与临床指标的关系：4种基因型组中平均年龄、ALT、AST、HBV DNA、肝脏纤维化程度及乙肝病毒e抗原的情况。对乙肝病毒载量进行Log对数转换，以Log10(HBV DNA)copies/mL表示，除乙肝病毒e抗原组外其他临床指标组经正态性及方差齐性检验，均为非正态分布或方差不齐，故差异比较采用秩和检验进行，经统计学分析宁夏银北地区慢性HBV感染者4种基因型与ALT、AST、HBVDNA、肝脏纤维化程度指标差异无统计学意义(P＞0.05)，基因分型与年龄组差异有统计学意义(P＜0.05)。乙肝病毒e抗原组在4种基因型中经Fisher确切概率法分析差异有统计学意义(P＜0.05)。

讨 论

近年研究发现，HBV基因型的类别与HBV的感染途径、自然史、临床表现、药物疗效、病毒变异以及疾病进展有关。到目前为止，根据HBV核苷酸全序列异质≥8%或表面抗原S基因序列核苷酸差异度≥4%，已将乙肝病毒株分为A到H8种基因型。大量研究表明乙肝病毒基因型具有一定的地域分布特点，并且乙肝病毒的传播方式、临床疾病谱、预后判断、疫苗预防及抗病毒治疗效果与其关系密切，因此了解HBV基因型具有重要的临床意义。

表1 患者基因分型情况[n(%)]

表2 慢性HBV感染者病毒基因型在相关疾病中的分布情况(n)

LI等在中国收集了1 148个HBV基因组序列[2]，统计分析显示中国东北地区以C型为主，华南地区以B型为主，西南地区以B型和C型为主，西北地区以C/D型为主。因此，基因型B和C是中国大陆地区流行的主要HBV基因型，在汉族人中常见。其中北方以C型为主，南方以B型为主，而少数民族不同于汉族，藏族和彝族以C型为主，维吾尔族人群以D型为主。本研究发现，宁夏银北地区慢性HBV感染者基因型主要为C型，分布与全国一致，但与报道的宁夏地区HBV感染者基因型以B基因型为主，其次为C基因型不符，这是否与宁夏银北地区为老工业基地，人口构成以外地移民人口为主，宁夏本地人口不占优势有关，需进一步扩大样本量来研究证实。同时发现4种基因型在不同性别人群中的分布差异无统计学意义，但在年龄组分布差异有统计学意义(P＜0.05)，这就预示在以后工作中需重点关注年龄化问题。鉴于本研究纳入的病例样本量偏少，不足以明显划分出不同年龄段之间的差异，需以后扩大样本量进行统计分析。

有研究表明：在以B、C为优势的地区，C型具有较强的致病能力，预后差；C型基因和高病毒载量已被证明是肝癌发展的独立危险因素。本研究显示，HCC组、LC组C基因型的比例均明显高于CHB组及其他基因型组，证实了C基因型与肝癌的进展密切相关[3]。

有研究报道，C基因型引起的肝脏疾病临床表现的严重程度较B型高，包括较高的肝癌术后复发率、延迟的血清转换、较高的DNA拷贝数、较高的ALT水平[4]。通过对81例患者乙肝两对半的检测显示，C型、C/D重组型乙肝病毒e抗原阳性率明显高于其他基因型，差异具有统计学意义(P＜0.05)，提示C型、C/D重组型乙肝病毒复制较活跃，易形成持续的病毒血症，免疫清除期较长，从而导致持续的炎症损伤加重病情。

本研究显示4种HBV基因型在ALT、AST、HBV DNA及肝脏纤维化程度均无显著性差别，此结果可能与研究样本量相对较小有关，需以后扩大样本量分析以明确。

综上所述，宁夏银北地区慢性HBV感染者基因分型以C型为主，且C型与较严重的HBV感染相关性肝病病情有关，乙肝病毒基因分型结果与ALT、AST、HBV DNA及肝脏纤维化程度是否存在联系，还需进一步统计研究。