猪血凝性脑脊髓炎

朝鲁门格日乐

（鄂尔多斯市伊金霍洛旗动物疫病预防控制中心，内蒙古 东胜 017200）

猪血凝性脑脊髓炎是由猪血凝性脑脊髓炎病毒（PHEV）感染引起的一种急性、高度接触性传染病。该病主要侵害1～3周龄哺乳仔猪，以仔猪呕吐、衰竭或显著神经症状为主要临床特征，死亡率高达20%～100%[1]，给养猪业造成了严重的经济损失。

1 病原

猪血凝性脑脊髓病毒（PHEV）属冠状病毒科乙型冠状病毒属，是有囊膜包被的单股、正链RNA病毒，在形态上呈现出帽子型结构特征。病毒粒子为球形，直径120nm，囊膜表面的棒状突起排列如日冕。该病毒在酸性或碱性环境下均能稳定存在，但不耐热，56℃、30min或30℃、72h条件下，病毒即可丧失活性。在低温状态下相对比较稳定，冰冻或冻干状态下能够存活至少1年的时间，因此该病毒可以在冻干状态下进行保存[2]。该病毒最大特性表现在被感染细胞可吸附红细胞，能凝集鸡、小鼠、大鼠、仓鼠和火鸡等动物的红细胞。

2 流行病学

猪是该病唯一的自然宿主，尤其是哺乳仔猪最易感，较大的猪多为隐性感染，而且隐性感染率很高。感染PHEV的发病猪和隐性感染猪为最主要的传染源，带毒猪也可以成为传染源。病毒通常存在于病猪的上呼吸道及脑组织中，经口、鼻感染发病。不同毒株感染不同日龄猪只后，临床表现明显不同。在老疫区，母猪初乳中含有该病毒抗体，仔猪在哺乳过程中获得病毒抗体，因而哺乳仔猪一般呈隐性感染，断奶仔猪已能抵抗该病，发病率较低。新疫区以3周龄以内的哺乳仔猪易感，多数是在引进新种猪之后发病，死亡率高达100%。

3 临床症状

感染仔猪通常具有脑脊髓炎型和呕吐消耗型2种临床表现型[3，4]。前者多为急性暴发，可以在患病早期发现，具有较明显的神经症状，具有脑脊髓炎的典型特征；后者由于表现形式多为呕吐或生长缓慢，所以很容易被诊断为胃肠疾病或营养缺乏，是一种慢性临床表型。出现这2种截然不同临床症状的原因，与病毒本身毒力，以及易感动物自身年龄、抵抗能力和个体差异有关[5]。隐性感染猪虽不发病，但会向周围环境散毒，而且病毒在宿主体内长时间复制，极有可能发生基因变异，使病毒毒力增强。隐性感染猪群亦会相继消瘦，发育迟缓，严重影响经济效益。

呕吐消耗型。呕吐消耗型在临床上主要表现为打喷嚏、咳嗽、精神沉郁、食欲不振、消瘦和呕吐等症状。发病初期，病猪表现为聚堆、打喷嚏、磨牙，还伴有体温升高、被毛逆立等症状。随着发病时间的延长，病猪开始出现各种神经症状，如后肢麻痹、呈划水状运动，四肢共济失调等。最后患病猪因全身衰竭而逐渐昏迷，直至死亡。病程比较短通常为10d左右。新生仔猪在感染后，会出现身体发绀、脱水，最终也以死亡告终。大猪感染后，因为持续呕吐而引发食欲不振，最终病猪因饥饿而导致全身衰竭，直至死亡。

脑脊髓炎型。脑脊髓炎型的症状很可能是从呕吐和腹泻的症状发展而来的。发展为血凝性脑脊髓炎后，大多数病例表现出以神经症状为主的临床症状，发病猪表现为肌肉震颤、神经过敏反应、运动失调，出现划水状姿势，最终以死亡告终。此外，临床症状表明，仔猪的发病日龄越小，症状会越严重，发病仔猪的死亡率高达100%。脑脊髓炎的症状仅限于28日龄以内的仔猪。临床上还有极少数的病猪出现失明和反应迟钝的症状，通常该症状于2～6d后基本恢复正常。

4 诊断

4.1 病理学诊断

对送检病死猪进行病理剖检，内脏组织器官未见有明显的病变，但可见脑组织淤血、水肿，胃肠内充满大量内容物。采集病猪的脾脏、肾脏、脑、脊髓等多个组织，制作石蜡切片并进行HE染色，镜检可见肝脏发生轻度的颗粒变性，肝小叶间门管区静脉严重淤血；脾脏脾小体淋巴细胞结构疏松，少量淋巴细胞胞核浓缩，动脉周围淋巴鞘显著增厚；脊髓灰质胶质细胞围绕在神经元周围形成明显的“卫星现象”；部分肾小管上皮细胞变性、坏死。

临床上呈急性感染的发病猪，脑软膜表面出血和充血现象比较严重，同时脑实质和脑脊髓膜上可见有紫红色小点分布。而慢性感染的猪死亡后，胃充气膨胀，腹围增大，出现恶病质状态。肌肉间结缔组织出现轻度或中度水肿。偶有病例出现肝脏和肾脏实质变性，胃黏膜淤血、充血，肺泡壁毛细血管充血、淤血，表现为间质性肺炎，胃肠呈卡他性炎，尤以小肠最为明显。临床上大多数病例呈现非化脓性脑炎的典型病变。神经细胞发生不同程度的变性，脑软膜和脑内小静脉充血，大脑实质可见有轻微的水肿，血管腔周围单核细胞和淋巴细胞浸润，形成“血管套”现象。疾病呈慢性经过时，镜下可以观察到神经胶质细胞增生，并且聚集在一起，形成胶质结节。此外，在有些病例中我们会看到少突胶质细胞围绕在神经细胞周围增生，形成明显的“卫星现象”，有的神经细胞发生变性、坏死，出现“噬神经现象”；肾小管上皮细胞发生颗粒变性和坏死。

4.2 病毒的分离鉴定

首先采集疑似PHEV感染病猪的脑、脊髓以及脾组织进行病毒的分离，按照基本的操作方法将病料组织研磨并且反复冻融后，进行无菌处理，然后接种于长满单层的易感细胞中进行培养，在接种后72h，观察有无明显的病变出现，如果没有病变，则继续传代培养，传代培养至10代以内如果出现病变则证明病毒分离阳性，反之则说明病毒分离阴性。最后将分离后的细胞病毒液收集后，反复冻融并离心，取少量病毒液，借助透射电镜观察病毒粒子的形态，从而可以进一步鉴定所分离的病毒。PHEV属于冠状病毒属的成员，病毒粒子的形态呈现出典型的“帽子”结构，直径大小为120nm左右，形状为近似圆球形。

4.3 琼脂扩散试验

首先制作琼脂糖平板，然后分别在中间和周围打孔，中央孔与周围孔的间距一般以3mm为宜。在中间的孔中加入抗原，待检血清、阴性和阳性血清分别加入到周围孔中，将琼脂糖平板置于25℃条件下培养24～48h后，观察特异性沉淀曲线，如果抗原与待测血清产生的沉淀曲线与抗原与阳性对照的血清作用产生的沉淀曲线相一致，则可判断该待测血清为阳性，不出现曲线则为阴性。该方法操作简单，可以用于PHEV血清抗体的流行病学调查。

4.4 中和试验（NT）

将PHEV病毒液与不同稀释浓度的待测血清按照1:9均匀混合，37℃温箱孵育1h。然后将混合后的悬液加入到长满单层PK-15细胞的试管中。培养72h后，检测鸡红细胞的凝集活性，以此来检测病毒是否在细胞上增殖。通常把中和抗体的效价大于1:8时，判断为阳性，反之结果则为阴性。该方法主要是利用PHEV病毒粒子中含有的一个特殊的结构，即病毒囊膜表面存在一种特异性结构蛋白-HE蛋白，这种蛋白可以引起鸡的红细胞发生凝集。

5 防治

5.1 隔离和消毒

猪场在发生该病时，首先要将圈舍的其他未感染猪群与发病感染猪群即刻分离开来，然后对猪场圈舍的地面、墙壁、天花板、水槽、食槽等严格进行彻底消毒处理，消毒可用5%的热火碱水。对于已经感染的病死猪，焚烧或者深埋处理，防止病原的进一步扩散和传播。另外对消毒的猪舍要及时地进行通风换气，保持圈舍的清洁卫生。

5.2 加强饲养管理

目前针对PHEV的感染，尚没有比较有效的治疗方法和有效的疫苗，因此饲养管理条件的完善非常关键。由于临床上PHEV主要通过呼吸道和消化道等途径进行传播，因此通过对猪群进行隔离来切断病毒的传播途径，可以有效的防止疾病的进一步流行和扩散。