石见穿及其提取物抗肿瘤的研究进展

刘 媛，钱荣康，钱荣华，3

(1. 湖南中医药大学医学院，湖南 长沙 410208；2. 湖南省双峰县钱荣康诊所，湖南 双峰 417700；3. 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室，湖南 长沙 410208)

在现今社会，肿瘤的进一步恶化是影响人体健康和生命最严重的疾病之一。近年来，恶性肿瘤在我国和全球的发病率和病死率持续上升[1-3]。我国近年的癌症数据统计分析表明，癌症患者每年都在增加[4]，且治疗失败导致死亡的患者也越来越多[5]。传统的治疗方法一般是手术治疗、放射治疗和化学药物治疗，但是放疗和化疗具有很多不良反应，且肿瘤患者对化学药物会产生耐药性，是肿瘤患者治疗以失败告终的主要原因。抗肿瘤药物不少都来自于天然药物，且中医成功治疗恶性肿瘤已有不少报道，如当归补血汤抗结肠癌[6]、左金丸抗胃癌[7]等。中医注重整体观念和辨证论治，使治疗方案更全面也更具个体特色，中药药效持续稳定，且不良反应较少。在中国，很多医院都利用中医治疗癌症,且已经取得较好的疗效[8]。

石见穿为唇形科鼠尾草属植物华鼠尾草(Salvia chinensia Benth)，以全草入药，别名紫参、月下红、小红参、紫丹花等，分布于我国南方地区。石见穿药性凉，味微苦、辛、平，归胃、肝、肺经，具有活血化瘀、清热解毒、消肿止痛的功效。石见穿在中医临床上常用于治疗各类感染性疾病，如胃炎[9]、肝炎[10]、乳腺炎、痈肿疮毒和妇科疾病如输卵管阻塞性不孕[11]、子宫内膜异位症[12]等。药理实验研究证明，石见穿拥有良好的抗癌效果，对多种恶性肿瘤均有较好治疗作用。当前，研究者们已从石见穿中提取出多种有效成分，如多糖类、三萜类、甾醇类、多酚类等[13]。近年来关于石见穿及其提取物抗癌作用的研究越来越多，取得了许多成果，同时也存在着一系列的问题，需要进一步相关研究加以解决。现对石见穿及其提取物抗肿瘤的研究进展做简要综述，以便后续的深入研究以及临床应用。

1 抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡

药物抗肿瘤的主要机制之一是抑制癌细胞增殖和促进癌细胞凋亡。Zhao等[14]发现，石见穿多酚作用于多种癌细胞系，均具有细胞毒性作用，诱导细胞周期阻滞在G0/G1期、诱导细胞凋亡和线粒体损伤的作用，如对人乳腺癌细胞MCF-7人结肠癌细胞HCT-116和COLO 205、人肺癌细胞A549、人胰腺癌细胞MiapaCa-2均有细胞毒性作用，尤其是COLO 205细胞和MCF-7细胞毒性作用最强。梁启超等[15]研究发现，石见穿多糖作用于人胃癌细胞SGC-7901后，具有显著的抑制细胞增殖作用，其作用效果与作用时间和石见穿多糖的浓度呈正相关。郑海音等[16]运用流式细胞技术测定了多种浓度的石见穿多糖作用于肝癌细胞SMMC-7721后对细胞凋亡率的影响，结果表明，石见穿多糖具有诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用，而且作用效果与浓度呈正相关。张子涵等[17]发现，24 h时石见穿含药血清对肝癌细胞有一定的抑制作用。魏清等[18]发现，石见穿有效成分总甾醇对人胃癌细胞SGC-7901具备显著抑制其增殖的功效，且石见穿总甾醇的细胞毒性作用能促进人胃癌细胞SGC-7901的凋亡。徐敬宣等[19]通过提取石见穿各个活性部位，作用于多种恶性肿瘤细胞，观察其增殖抑制作用，结果发现，石见穿各部位对人结肠癌细胞株LOVO、人胃癌细胞株MKN45、BGC823、人肺癌细胞株 A549、人乳腺癌细胞株MCF-7均有增殖抑制作用，以氯仿部位和乙酸乙酯部位作用最强。魏清等[20]发现，随着石见穿多糖的浓度增加，其诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡作用增强。钱晓萍等[21]研究表明，石见穿提取物熊果酸对多种恶性肿瘤细胞具有抑制增殖作用。熊果酸作用于结肠癌细胞LOVO、胃癌细胞MKN45、BGC823和肺癌细胞A549以及乳腺癌细胞MCF-7后，均有抑制细胞增殖的作用，尤其对肺癌细胞A549的抑制作用最强。Yun等[22]通过石见穿提取物熊果酸相关实验发现，熊果酸对肝癌细胞HepG2和SMMC-772细胞均有抑制其增殖的作用。Chen等[23]研究发现，熊果酸作用于肝癌细胞HepG2时存在抑制细胞增殖的作用，其产生的作用效果比对照药物5-氟尿嘧啶更强。Chen等[24]通过MTT实验和流式细胞仪技术检测了熊果酸对食管癌细胞Eca-109的抑制增殖作用和诱导凋亡作用。通过MTT结果发现，与对照药物5氟尿嘧啶相比，熊果酸对细胞的增殖抑制作用更强。流式细胞仪检测结果表明，熊果酸作用食管癌细胞后使癌细胞停滞在G0/G1期，细胞分裂增殖减少，并且诱导食管癌细胞凋亡。其作用机制可能与熊果酸抑制了Bcl-2基因表达，促进Bax和P27 kip基因表达相关。Yu等[25]研究表明，熊果酸通过调控肿瘤抑制基因P53，抑制了肝癌细胞SMMC-772的增殖。Ali等[26]研究发现，石见穿提取物香草醛能抑制小鼠艾氏腹水癌细胞(EAC)的增殖。Wang等[27]研究发现，熊果酸能够通过下调ERK和P-ERK l/2信号通路的表达，从而抑制卵巢癌细胞CAOV3的增殖，并且通过下调促凋亡基因Bcl-2表达来促进卵巢癌细胞凋亡。Li等[28]研究发现，石见穿提取物熊果酸和齐墩果酸作用于人结肠癌细胞系HCT15，均具有抑制HCT15增殖的作用，且使细胞周期停滞于G0/G1期，熊果酸较齐墩果酸抑制增殖作用更强。Wen等[29]研究表明，石见穿提取物熊果酸与BRCP抑制剂Ko143均可影响抗癌药的药物动力学，通过下调乳腺癌耐药蛋白BCRP的表达来抑制乳腺癌对化疗药物的耐药性，提升药物的敏感性从而提高疗效。陈宇飞等[30]研究发现，石见穿提取物桦木酸通过阻滞肝癌细胞HepG2肿瘤干细胞的细胞生长周期，抑制肝癌细胞HepG2肿瘤干细胞的增殖和诱导其凋亡，凋亡率达到了10.86%。

2 抑制肿瘤血管生成和抑制肿瘤细胞转移

恶性肿瘤发生转移标志着疾病的进一步恶化，抑制恶性肿瘤细胞的转移有利于缓解恶性肿瘤疾病的进程，延长患者的生命周期。恶性肿瘤发生转移的主要途径是淋巴道转移、血管转移和接种转移三种方式。肿瘤血管的生成在肿瘤的发生发展与转移中起重要作用，是肿瘤发生转移的主要途径之一。抑制肿瘤血管生成能有效地防止肿瘤发生血管转移。柳芳等[31]通过采用肝癌H22小鼠移植性肿瘤模型和肝癌H22鸡胚尿囊膜移植瘤模型进行石见穿提取物抑瘤实验。结果表明，在肝癌H22小鼠移植性肿瘤模型中，与对照组比较，石见穿提取物中剂量组的抑瘤率为42.28%(P<0.01)；此外，VEGF和MVD的表达在小鼠肝癌H22移植瘤组织中明显降低(P<0.01)。在肝癌H22鸡胚尿囊膜移植瘤模型中，石见穿提取物低剂量组可以明显抑制肿瘤血管生长，抑制率为50.67%(P<0.01)。权雯等[32]研究发现，石见穿活性部位氯仿和乙酸乙酯部位作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和肺癌细胞A549均有抑制细胞增殖的功能，且氯仿部位所产生的抑制作用明显优于乙酸乙酯部位。张善兰等[33]发现，石见穿醇提取物对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)具有抑制增殖、迁移和小管形成作用，且抑制作用与石见穿醇提取物浓度呈正相关。石见穿提取物熊果酸和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)抑制剂Ko143通过作用于BCRP，均能显著影响瑞苏伐他汀在体内和体外的药物动力学，通过下调BCRP的表达，抑制乳腺癌细胞对化疗药物的耐药性，从而影响血管生成抑制乳腺癌发展和转移。朱红岩等[34]研究发现，石见穿多糖作用于人胃癌细胞MGC-803细胞，随着石见穿多糖浓度的增高，MGC-803细胞的划痕愈合能力逐渐减弱，细胞迁徙能力减弱，穿膜细胞数目减少并且细胞内白细胞介素-8(IL-8)蛋白表达水平逐渐降低。这些结果表明石见穿多糖可抑制人胃癌MGC-803细胞的生长和迁移，其产生的作用机制可能与降低IL-8表达水平相关。

3 免疫和细胞因子调节

免疫调节功能障碍可引发疾病的发生，免疫调节正常有利于促进内环境的稳定。肿瘤细胞可以抑制机体免疫力，通过提升机体的免疫力有助于癌症的治疗。程卓等[35]发现，石见穿多糖能提升小鼠的脾脏与胸腺指数，调整其脾脏和胸腺内处于细胞周期分裂期的免疫细胞比例，能有效提升免疫力低下小鼠的免疫力。通过促进刀豆蛋白A，使脾脏与胸腺细胞体外增殖能力增强，提升免疫低下小鼠分泌IL-1β和NO的能力，增强巨噬细胞内IL-1β含量和Caspase-1活性来增强环磷酰胺诱导的免疫力低下小鼠的免疫功能。Shu等[36]研究发现，石见穿多糖能有效抑制肝癌H22荷瘤小鼠细胞的增殖，缓解肿瘤细胞转移，其作用机制可能与石见穿多糖促进CD4+T细胞增殖和调节血清细胞因子,提升CD8+T细胞和自然杀伤细胞毒性，下调血清中前列腺素E2的水平相关。柳芳等[37]通过观察肝癌H22荷瘤小鼠中石见穿提取物的抑癌率和VEGF表达水平发现，石见穿提取物中剂量组抑癌效果最好，抑瘤率为48.93%，石见穿提取物中各剂量组血清TNF-α和VEGF表达均有下调，且中剂量组VEGF表达下调最大。这些结果表明石见穿提取物抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤细胞的生长，其产生的作用机制可能与下调VEGF细胞因子水平相关。程卓等[38]检测了石见穿多糖对CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)的影响。结果表明，石见穿多糖能够提升荷瘤小鼠脾脏胸腺指数，促进脾细胞增殖，提升CD8+T细胞和自然杀伤细胞的占比，促进CD4+T细胞分泌免疫促进因子IFN-γ和IL-2，而减少分泌免疫抑制因子IL-4和IL-10。

4 中医临床应用

中医治疗肿瘤源远流长，组方中各个中药具有各自的药理作用，又发挥着协同作用共同对抗肿瘤，且中药疗效稳定不良反应少，临床常配伍石见穿来治疗各种肿瘤。杜一江等[39]观察到，采用抗癌中药方(石见穿、郁金等17味药组成的方剂)联合西医治疗手段治疗中晚期肝癌，有效率可达94.38%。吴成亚等[40]在二术郁灵丹上加减组成芪术郁灵汤(黄芪、莪术、白术、郁金、威灵仙、石见穿)，运用石见穿软坚散结、解毒抗癌，辨证治疗食管癌取得了较好的疗效。刘恭喜等[41]通过分析《肿瘤方剂大辞典》中收录的用来医治胃癌的常用方剂组方，筛选出包括石见穿在内的46个高频中药，新组处方23个，表明石见穿为肿瘤常用中药。陆德铭教授自创乳癌术后方(生黄芪、石见穿等10味药)，该方治疗乳腺癌多年取得了较好成果[42]。刘沈林[43]治疗胃癌的经验效方，益气健脾化积方(炙黄芪、党参、炒白术、当归、炒白芍、三棱、陈皮、法半夏、莪术、石见穿、蛇舌草、炙甘草)对胃癌的化疗有增效作用，且石见穿在该方中有活血化瘀散结的功效。刘苓霜辨证治疗肺癌，运用了石见穿清热解毒，配合益气养阴的中药，使患者病情得到缓解[44]。张培彤治疗晚期恶性淋巴瘤的经验校方六君二母汤，取得了较好的疗效，石见穿在该方中对减弱化疗的毒副作用，预防恶性肿瘤的转移和复发起到了重要作用[45]。

5 展 望

近年来，关于石见穿抗肿瘤作用机制的研究越来越多，这些机制主要有：①石见穿抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡；②石见穿抑制肿瘤血管生成和抑制肿瘤细胞转移；③石见穿具有免疫和细胞因子调节的功能。研究者们对石见穿的各个有效成分的研究越来越深入，石见穿在临床上也已经成为常用的抗癌中药。但其抗肿瘤作用分子机制以及药用有效成分尚未完全明确，中药组方中各个药物发挥怎样的作用以及作用机制也尚未完全阐明，有待于进一步深入研究，为临床用药提供更清晰明确的指导，为肿瘤患者提供更好的个体化治疗，延长其生命周期。