益母草提取液对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响

朱齐宁，崔 静

(岭南师范学院 生命科学与技术学院，广东 湛江 524048)

随着竞技运动的迅猛发展，对运动员的营养补充要求不断提高,特别是具有调节生理功能，有针对性地改善机体在缺氧环境下运动能力的物质日益重视.我国运动医学工作者进行了不少抗疲劳和耐缺氧的实验研究,研究发现，泥鳅多糖[1]、久泻灵[2]、辣椒和人参提取液[3]，北五味子提取液[4]等中药具有提高机体抗疲劳和耐缺氧能力的效果.益母草为唇形科、属植物，夏季开花[5-6].其干燥地上部分为常用中药，中国大部分地区产的益母草味辛苦、凉，具有活血、祛淤、调经、消水等功效.近年来研究发现益母草还具有抗血小板聚集、凝集，改善冠脉循环和保护心脏，增强心脏收缩力[7]等作用.本研究选用小鼠作为研究对象，探讨益母草提取液对小鼠抗疲劳与耐缺氧能力的影响，为益母草的进一步开发和利用提供科学依据.

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

实验小鼠40只，雌雄各半，4周龄，体重(25～30)g，购于广东医学院动物实验中心.饲养条件：清洁级饲养条件(在本学校动物实验室饲养).饲养室内温度维持在(25±2)℃，湿度维持在(55±5)%.每天定时开紫外线灯消毒1h，定时通风.使用经严格消毒的，营养丰富的专用饲料和纯净水进行喂养.所有小鼠分组分笼饲养，确保小鼠有足够的活动空间，可以让小鼠自由摄食摄水.垫料隔日换一次，确保饲养笼的干燥和卫生.

1.1.2 受试样品

取3 g益母草粉溶于50 mL蒸馏水中，然后置于小烧杯中用酒精灯加热至沸腾，沸腾后，等混合液蒸发至剩下20 mL时停止加热.待混合液冷却后先用纱布把益母草粉过滤出来，然后再用滤纸过滤一遍.最后得到为0.15 g/mL益母草粗提液(每一次制取粗提液用于3次注射).

1.1.3 实验仪器

1 mL注射器，小型动物跑台，秒表，电子称，酒精灯，100 mL小烧杯，纱布，滤纸,250 mL广口瓶，25 L塑料桶,温度计等.

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组及给药方法

按性别、体重随机分成4组，分别为对照不运动组和运动组，实验不运动组，实验运动组,每组10只.

采用臀大肌注射的方式给药，给药的剂量是0.2 mL/只，给药的频率是隔天一次.对照组也以同样的方法注射浓度为0.9%的生理盐水0.2 mL/只，共给药28 d.

1.2.2 训练方案

适应性喂养5 d后，对照运动组和实验运动组小鼠在动物跑台上进行跑步训练，1次/d.运动强度是：第1周频率为(10±0.2) m/min，距离为100 m ；第2周频率为(15±0.2)m/min，距离为150 m;第3周频率为(15±0.2m)/min，距离为200 m；第4周频率为(20 ±0.2m)/分，距离为400 m，共运动训练7周.其余2组不做任何运动.

1.2.3 抗疲劳实验

实验组给药、训练28 d后，让小鼠休息1 d后进行负重(所负重量为小鼠体重的5%，固定在小鼠尾部)游泳.从小鼠放入水中开始计时，以小鼠无力冲起沉入水底为止，记录其负重游泳时间.

1.2.4 耐缺氧实验

实验组给药训练28d后，让小鼠休息1d后进行耐缺氧实验.将小鼠放进250mL的广口瓶中，用凡士林涂抹瓶塞,密封瓶口立即计时，以小鼠停止呼吸为止，记录小鼠的存活时间.

1.2.5 统计方法

2 结果与分析

2.1 实验过程中小鼠的状态

在整个实验过程中各组小鼠精神状态，活动情况均正常，各组小鼠都较活泼，未出现掉毛，体毛凌乱，无光泽，大便形态改变等不良现象，生长变化也未出现较大差异.说明所建立的实验模型和采用的训练方案未造成过度训练，也未给小鼠带来不良的影响.

2.2 益母草对小鼠抗疲劳能力的影响

疲劳是人脑力或体力到达一定阶段时必然出现的一种正常的生理现象，是机体复杂的变化过程.可以分生理疲劳与心理疲劳[8-9].在表1中，对照不运动组的平均游泳时间为2.57 min，对照运动组的平均游泳时间为3.15 min，比对照不运动组有一定的延长.实验不运动组的平均游泳时间为7.70 min，比对照组都有明显的延长.实验运动组的平均游泳时间为13.03 min，比其它3组平均游泳时间明显的延长.小鼠负重游泳时间的差异，显示了益母草提取液对提高抗疲劳能力的有效作用.4组相比，差异显著 (P<0.05).结果显示，益母草提取液可以延长小鼠负重游泳的时间.

表1 益母草对小鼠抗疲劳能力的影响

注：P<0.05,对照不运动组与对照运动组、实验不运动组、实验运动组比较存在差异.

2.3 益母草对小鼠耐缺氧能力的影响

缺氧可以引起机体产生各种反应，生命活动中，心脏和脑缺氧是小鼠死亡的主要原因[10-11].在表2中，对照不运动组的平均耐缺氧时间为12.70 min，对照运动组的平均耐缺氧时间为14.20 min，比对照不运动组有一定的延长.实验不运动组的平均耐缺氧时间为15.45 min，比对照不运动组、对照运动组都有明显的延长.实验运动组的平均耐缺氧时间为24.73 min，比对照不运动组、对照运动组、实验不运动组都有很明显的延长.对照不运动组与对照运动组的差异不显著(P>0.05)，而对照不运动组、实验不运动组、对照运动组与实验运动组相比，有显著性差异(P<0.05).实验结果表明，益母草提取液可以延长小鼠耐缺氧的时间.

表2 益母草对小鼠耐缺氧能力的影响

注：P<0.05,对照不运动组与对照运动组、实验不运动组、实验运动组比较存在差异.

3 结 论

益母草提取液对小白鼠有耐缺氧、抗疲劳及增强运动能力的作用，但由于实验样品较少，提取方法单一，尚属于定性和趋势界定，只能作为众多类似实验结论当中有益的尝试.

[1] 周军,张晨晓,黄开勋.泥鳅多糖对小鼠耐缺氧作用的研究[J].中国药理学通报, 2003,99(10):1182-1184.

[2] 梁永林,殷银霞,吴玉泓,等.久泻灵对小鼠抗疲劳及耐减压缺氧作用的影响[J].中医药通报,2005,4(5):55-57.

[3] 王锋,谭兴和,张礼红,等.辣椒和人参提取液对小鼠游泳及耐缺氧能力的影响[J].科学研究，2007,128(2):26-29.

[4]王文燕,王婧婧,韩振坤,等.北五味子提取液对小鼠耐缺氧和抗疲劳能力的影响[J].蒙古民族大学学报(自然科学版)，2008,23(6):668-670.

[5] 范美华,王健鑫,李鹏,等.益母草的研究进展[J];中国药物与临床，2006(7)：528-529.

[6] 申利红,王胜利.益母草的研究进展[J];安徽农业科学,2010，28(8)：4414-4416.

[7] 富显祖,何永侠,邓莉,等.益母草成分盐酸益母草碱对小鼠急性毒性实验研究[J].时珍国医国药,2015，26(4)：865-866.

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[9]吴新正,何迎春,刘洪平,等.红景天复方对小鼠免疫、耐缺氧、抗疲劳能力的影响[J].湖南中医药大学报,2008,28(1):29-31.

[10]刘晓波，刘晓正，晏彩芬，等.玉葡萄根耐缺氧作用的研究[J].云南中医药杂志,2007,28(11)：39-40.

[11]张旭，张汝学，涂宏海，等.中药复方提高机体耐缺氧能力及机制的研究进展[J].中华中医药学刊,2007,9(25):21-22.