酶标仪的使用及注意事项

（辽宁省阜新市动物疫病预防控制中心，辽宁阜新 123000）

酶标仪在畜牧兽医实验室已成必备仪器，该仪器应用较广泛，日常免疫抗体检测应用较多，猪瘟、蓝耳病、口蹄疫抗体的检测都需要使用。对于兽药残留，肉质瘦肉精的检测等实验也需使用。该仪器操作简便、快速、结果易判定，准确率较高等特点。

酶标仪的型号较多，使用范围不同。选择该仪器时根据检测的样品和使用试剂的不同来选择。许多试剂公司配套供应酶标仪。该仪器针对固相载体形式的不同，各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。酶标仪的主要性能指标有测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。酶标仪的可测范围与线性范围视各酶标仪的性能不同，普通的酶标仪在0-2.000，新型号的酶标仪上限拓宽到2.900，超范围值常以“*”或“over”或其他符号表示。选用酶标仪时应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围。

使用时环境条件对仪器的结果读取有影响，直接影响结果的准确性。仪器设备的放置位置和环境要适当，应将仪器放置于无电磁场和干扰电压的水平台面，保持环境干燥，避免水汽和烟尘对仪器的损伤，避免阳光或强光直射而造成的老化。使用时尽量保持环境温度在15℃～40 ℃，湿度在15%～85%之间，保持环境稳定。保持使用电压的稳定性，避免突然断电和使用后未关闭仪器前断电造成的仪器非正常关闭。

在实验中为保证结果准确性，延长仪器使用寿命，操作时应遵守仪器的使用注意事项及日常维护保养。仪器操作过程中应注意，在测试结果前应提前开机预热15～30min，避免开机后马上检测造成的结果偏差。检测的试剂应恢复常温后再使用，对于所配置试剂用的水质pH值，水质纯净度等应符合要求，温度水质都会造成实验结果偏差很大或实验的失败。洗板时建议配套使用洗板机洗板，洗得干净，避免交叉污染。酶标仪检测应避免腐蚀性试剂的使用。操作时样品撒到仪器上应对仪器擦拭并消毒。不同试剂盒的要求均不相同，应根据试剂盒说明修改仪器上参数，因试剂盒造成的测量结果偏差应根据实际情况及时修改参数，避免测量结果偏差，到达最佳测试结果，使实验成立。加入底物后终止的时间要掌握好，过短过长都 可能造成偏差甚至实验结果不成立。测定时有时选择单波长测定，有时选择双波长测定，双波长测定即每孔先后测定两次，第一次在最适波长，第二次在不敏感波长，两次测定间不移动ELISA板的位置，最终测得的值为两者只差。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。各种酶标仪性能有所不同，使用时应详细阅读说明书。

仪器不用时应定期开机保养，保证检测时正常运行状态。为保证结果准确性仪器应定期校准。校验方法可应用比尔定律对酶标仪进行自行校准。准确称取分析纯重铬酸钾0.35克，溶于100ml 0.2摩尔/升的稀硫酸中，以此作为原液，在用0.2mol/L的稀硫酸进行倍比稀释。得到0.35%、0.175%、0.0875%、0.04375%、0.021875%、0.0109375%六个浓度标准液，将液体加入96孔微量板中，每个浓度加两排共16孔，每孔200μl。将加好溶液的微量板放在酶标仪上，用450nm单波长测量。结果若六个浓度测量结果吸光度的平均值与浓度呈线性关系，可看出酶标仪测定结果准确无偏差。酶标仪是垂直光路，垂直光的特点是样品吸光度受液体浓度和稀释的影响小，受被检样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等影响较大。为保证结果准确应选择透光性好干净的酶标板，操作时避免接触到孔底部，避免底部污染造成的结果偏差。如仪器损坏要联系仪器厂家技术人员，不要自行拆除修理，以免损坏内部部件。

酶标仪的使用快捷简单，但要注意每一个操作细节才能保证结果的准确。