银黄兰消脂颗粒的制备与质量标准研究

翟文勇+王莹

[摘要] 目的 制备银黄兰消脂颗粒，并建立其质量控制方法。方法 在2015年3月—2017年3月期间，根据处方制备银黄兰消脂颗粒，采用薄层色谱法 对处方中的银杏叶提取物 进行定性鉴别，采用高效液相色谱法测定总黄酮苷的含量。结果 槲皮素进样量在4.5～13.5 μg/mL之间与积分值呈线性关系，回归方程y=34 358x+28 411，相关系数=0.999 9；山柰素进样量在6～9 μg/mL之间与积分值呈线性关系，回归方程y=28 512x+69 750，相关系数=0.999 6；异鼠李素进样量在2.5～7.5 μg/mL，之间与积分值呈线性关系，回归方程y=34 673x+23 823，相关系数=0.999 8。根据含量测定结果，银黄兰消脂颗粒中总黄酮苷每袋含量符合标准规定。结论 该制剂处方合理，质量控制方法准确、可靠、重现性好。

[关键词] 银黄兰消脂颗粒；总黄酮苷；薄层色谱法；高效液相色谱法

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）11（a）-0174-03

[Abstract] Objective To prepare the yinhuanglan xiaozhi granules and establish its quality control method. Methods The yinhuanglan xiaozhi granules were prepared according to the prescriptions from March 2015 to March 2017， and the ginkgo biloba extract in prescription was for qualitative identification by the thin-layer chromatography， and the content of total flavonoid glycoside was measured by the high performance liquid chromatography. Results The sample size of quercetin was 4.5～13.5 μg/mL， showing a liner correlation with the integral value， and the regression equation y=34 358x+28 411， correlation coefficient 0.999 9； the sample size of kaempferide was 6～9 μg/mL， showing a liner correlation with the integral value， and the regression equation y=28 512x+6 9750， and the correlation coefficient 0.999 6， and the sample size of isorhamnetin was 2.5～7.5 μg/mL， showing a liner correlation with the integral value， and the regression equation y=34 673x+23 823 and the correlation coefficient 0.999 8， and the content of total flavones in yinhuanglan xiaozhi granules in each bag met the standards. Conclusion The prescription of this preparation is rational， and the quality control method is accurate and reliable with good repeatability.

[Key words] Yinhuanglan xiaozhi granules； Total flavones； Thin-layer chromatography； High-performance liquid chromatography

藥理研究表明，银杏黄酮具有降低胆固醇抗氧化扩张冠状动脉和脑血管的作用，可用于防治脑血栓形成和动脉粥样硬化冠心病心绞痛心肌梗死等心脑血管病[1-2]。现对该院在2015年3月—2017年3月期间根据处方制备1种银黄兰消脂颗粒进行研究，现报道如下。

1 仪器与试药

LC-15C型高效液相色谱仪；BS224S型电子天平；BX8200H型超声仪。薄层层析用聚酰胺薄膜；薄层层析硅胶板。正丁醇；乙醇；其他试剂均为分析纯。槲皮素（批号为100081-201509，供含量测定用以99.9%计），山柰素（批号为110861-201310，供含量测定用以93.2%计），异鼠李素（批号110860-201410，供含量测定用以98.6%计），均由中国食品药品检定所提供。

2 处方组成与制备工艺

①处方银杏叶提取物、姜黄、山楂、葛根、黄精、女贞子、丹参、泽泻、决明子、枸杞子、三七等。

②制备方法以上16味，三七粉碎成细粉；黄芪及决明子粉碎成细粉，过（6号）筛，与三七粉配研，混匀；姜黄用乙醇加热回流2次，第1次3 h，第2次2 h，滤过，合并滤液，回收乙醇；取生蒲黄置布袋内，同其他11味加水温浸1 h，煎煮3次，第1次3 h，第2次2 h，第3次1 h，合并滤液，滤过；滤液浓缩至相对密度约为1.17（80℃），放冷，加入乙醇，使乙醇含量达65%～70%，冷藏48 h，取上清液滤过，回收乙醇，减压浓缩至相对密度约为1.35 ～1.40（50℃）的稠膏，加入姜黄的醇提物及三七、黄芪、决明子的细粉，制成颗粒，干燥即得[3-4]。endprint

3 质量标准

3.1 性状

该品为棕色至棕褐色颗粒，味甜，微苦。

3.2 鉴别（银杏叶提取物）

供试品色谱中，在与对照品提取物色谱相应位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色荧光斑点[5]。示意图见图1。

3.3 含量测定

3.3.1 色谱条件的考察 以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360 nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2 500[6-7]。

对照溶液的制备：分别取槲皮素对照品、山柰素对照品、异鼠李素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1 mL各含槲皮素30 μg、山柰素30 μg、异鼠李素20 μg的混合溶液。

供试品溶液的制备：取本品颗粒1袋，精密加入甲醇20 mL，超声处理（功率250 W，频率33 kHz）20 min，放冷，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 mL，置100 mL锥形瓶中，加甲醇10 mL、25%盐酸溶液5 mL，摇匀，置水浴中加热回流30 min，迅速冷却至室温，转移至50 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。

3.3.2 方法学考察 ①空白试验。达峰时间：槲皮素峰位在12 min左右；山柰素峰位于21.4 min左右；异鼠李素峰位于24.5 min左右。

②线性关系考察。槲皮素回归方程y=34 358x+ 28 411，相关系数R2=0.999 9，表明槲皮素进样量在4.5～13.5 μg/mL之间与积分值呈线性关系；山柰素回归方程y=28 512x+69 750，相关系数R2=0.999 6，表明山柰素进样量在6～9 μg/mL之間与积分值呈线性关系；异鼠李素回归方程y=34 673x+23 823，相关系数R2=0.999 8，表明异鼠李素进样量在2.5～7.5 μg/mL之间与积分值呈线性关系。

③系统精密度考察。结果见表1。

④重复性试验。结果见表2。

⑤稳定性试验。槲皮素峰：214 324、215 089、216 203、 218 322、217 325、216 734、217 091，RSD%为0.58%；山柰素峰：224 291、227 822、221 309、223 487、225 746、223 074、227 428，RSD%为0.98%；异鼠李素峰：156 005、158 742、157 087、154 074、154 469、156 077、156 348，RSD%为0.93%。表明供试品溶液在24 h内稳定。

⑥加样回收试验，结果见表3。

结果表明试验方法的回收率高，符合含量测定要求。

⑦样品含量测定。结果见图2、表4。

4 结论

该处方中是以银杏叶提取物的有效成分提取物能明显降低血清中甘油三脂（TC）、总胆固醇（TG）及低密度脂蛋白（ LDL-C）的含量，通过调节脂蛋白-胆固醇代谢，改善血管内皮功能从而改善机体的脂质代谢，可以作为银黄兰消脂颗粒的质控指标。

该组研究结表明，槲皮素进样量在4.5～13.5 μg/mL之间与积分值呈线性关系，山柰素进样量在6～9 μg/mL之间与积分值呈线性关系，异鼠李素进样量在2.5～7.5 μg/mL之间与积分值呈线性关系。槲皮素、山柰素、异鼠李素的精密度也较高，槲皮素、山柰素、异鼠李素在药物中具有一定的稳定性。该组研究结果与覃智强[8]文献中结果向一致，其研究中选取988例患者作为研究对象，研究中治疗有效率为95%。其研究中得到槲皮素、山柰素、异鼠李素具有一定的稳定性。证实：银黄兰消脂颗粒稳定性较高。

综上所述，银黄兰消脂颗粒中总黄酮苷含量较高，每袋含量符合标准规定。该制剂处方合理，质量控制方法准确、可靠、重现性好。

[参考文献]

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[3] 李文雄，孙赫，刘文婷.中医药治疗高脂血症研究进展[J].河南中医，2015，35（2）：439-441.

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[8] 覃智强.中医药治疗高脂血症临床疗效的Meta分析[J].中医临床研究，2017，9（8）：5-7.

（收稿日期：2017-08-05）endprint