乳腺浸润性导管癌超声特征与分子生物标志物的相关性

叶晶晶+余茂武+黄晓民

[摘要] 目的 探讨乳腺浸润性导管癌的超声特征和分子生物标志物表达之间的关系。 方法 回顾性方便收集2014年2月—2017年2月该院收治的134例经手术病理确诊为乳腺浸润性导管癌患者的术前超声影像学资料，包括肿块最大直径、边缘毛刺、纵横比、微钙化、血流分级、腋窝淋巴结转移，并采用免疫组化方法检测ER、PR、HER-2、Ki-67及E-cad的表达情况，研究分析两者的相关性。结果 ER、PR、HER-2、Ki-67和E-cad的表达阳性率分别为71.2%、59.0%、66.9%、69.1%和83.4%。肿块最大直径>2 cm组Ki-67表达阳性率明显高于肿块最大直径≤2 cm组（P<0.05）；边缘毛刺征者ER、PR表达阳性率明显高于无边缘毛刺征者（P<0.05）；有微钙化者HER-2表达阳性率明显高于无微钙化者（P<0.05）；无淋巴结转移者E-Cad表达阳性率高于有淋巴结转移者 （P<0.05）。 结论 乳腺IDC的部分恶性超声表现与病理生物学分子表达之间有一定的相关性，可尝试从超声角度评估乳腺癌分子表达情况，对乳腺癌的个体化诊治及预后评估具有重要参考价值。

[关键词] 乳腺浸润性导管癌；超声表现；雌激素受体；孕激素受体

[中图分类號] R737 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）10（b）-0020-04

[Abstract] Objective This paper tries to explore the correlation of ultrasonographic features and biomarkers in invasive breast ductal carcinoma. Methods Preoperative ultrasound imaging data of 134 cases of surgical pathology confirmed breast invasive ductal carcinoma patients treated in this hospital from February 2014 to February 2017 were retrospectively collected， including the maximum diameter of the tumor， edge burr， aspect ratio， microcalcification， blood flow grade， axillary lymph node metastasis. The correlation between ER， PR， HER-2， Ki-67 and E-cad was detected by immunohistochemistry. Results The positive rate of ER， PR， HER-2， Ki67 and E-cad were 71.2%， 59.0%， 66.9%， 69.1%， 83.4% respectively. The positive rate of Ki-67 in tumor size>2 cm was statistically significantly higher than that of tumor size≤2 cm group （P<0.05）. The positive rates of ER， PR in spicule sign group were statistically significantly higher than that group without spicule sign （P<0.05）. The positive rate of HER-2 in microcalcification group was statistically significantly higher than that group without microcalcification （P<0.05）. The positive rate of E-Cad in metastasis to lymph node group was statistically significantly higher than that group without metastasis to lymph node （P<0.05）. Conclusion There is a certain correlation between the partial malignant ultrasonography of breast and the expression of pathologic biology. It is possible to try to evaluate the expression of breast cancer from the perspective of ultrasound， which is of great reference value for individual diagnosis and treatment of breast cancer.

[Key words] Breast invasive ductal carcinoma； Ultrasonographic features； Estrogen receptor； Progesterone receptor

浸润性导管癌（ invasive breast cancers，IDC）是指导管壁基底膜被导管内癌细胞突破向间质浸润，是乳腺癌中最常见的一种类型。国外学者发现，乳腺癌的生物学行为和病理组织学改变受雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体2（HER-2）、细胞核增值抗原（Ki-67）及上皮钙黏蛋白（E-cad）等表达水平的影响，导致超声影像学上具有特定表现，总结分析乳腺癌影像学特征能够部分反映上述标志物的表达水平[1]。该研究方便选取于2014年2月—2017年2月收治的134例患者，将IDC的超声声像图特征与免疫组化指标相结合进行研究分析，探讨两者的内在联系，希望为在非介入基础上预测上述指标表达水平，希望能为乳腺癌的诊断、个性化治疗、预后评估提供更好的参考，现报道如下。endprint

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性方便收集福建医科大学附属宁德市医院收治的经手术病理确诊为IDC患者134例，具备完整的术前超声及术后病理资料，均为女性，年龄26～77岁，平均46岁。排除非肿块型、乳头Paget′s病、合并其他类型乳腺恶性肿瘤及有远处转移者。排除术前接受放疗、化疗或穿刺活检者。

1.2 仪器与方法

采用PHILIPSIU22和GE LOGIQ E9彩色多普勒超声诊断仪，探头频率5～12 MHz，取仰卧位，充分暴露双侧乳腺及腋窝，根据美国放射学会BI-RADS乳腺超声评估标准记录肿块位置、大小、形态、边界、回声、纵横比、钙化情况、Adler半定量法血供分级、腋窝淋巴结等。

1.3 免疫组化检测

所有标本经10%甲醛固定后石蜡包埋，连续切片，行HE和免疫组化染色，对ER、PR、HER-2、Ki-67、E-cad表达水平进行检测，ER、PR及Ki-67阳性染色定位于细胞核，HER-2及E-cad阳性染色定位于细胞膜，细胞核或细胞膜染为淡黄色至棕褐色为阳性细胞。ER、PR：阳性细胞<10%判为阴性（-）；10%≤阳性细胞≤25%判为弱阳性（+）；26%≤陽性细胞≤50%判为阳性（++）；阳性细胞>50%判为强阳性（+++）。HER-2：（-）和（+）为结果阴性，HER-2（+++）为结果阳性，（++）表示不确定，须再行荧光原位杂交法检测有扩增为结果阳性。Ki-67：>20%阳性为高表达。

1.4 统计方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行检验，组间率的比较采用χ2检验，用[n（%）]表示，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

134例IDC患者双侧发病3例，多灶性5例，共139个肿块。ER、PR、HER-2、Ki-67和E-cad的表达阳性率分别为71.2%、59.0%、66.9%、69.1%和83.4%。肿块最大直径>2 cm组Ki-67表达阳性率明显高于肿块最大直径≤2 cm组；边缘毛刺征者ER、PR表达阳性率明显高于无边缘毛刺征者；血流分级2～3级者HER-2、Ki-67表达阳性率高于血流分级0～1级者；微钙化者HER-2表达阳性率明显高于无微钙化者；无淋巴结转移者E-Cad表达阳性率高于有淋巴结转移者，以上均差异有统计学意义（P<0.05）。ER、PR、HER-2、Ki-67及E-Cad的阳性表达率在纵横比>1与<1两组间差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

3 讨论

乳腺癌的发生及发展是一个复杂的过程，肿瘤的生物学行为受各种原癌基因和抑癌基因影响，进而发生病理学改变，从而具有特定的超声影像学特征[2]。分子生物标志物的表达与乳腺癌的TNM分期、组织学分级及术后生存率关系密切。

在该研究中，肿块有边缘毛刺者占81.3%，ER和PR的表达阳性率分别为71.2%、59.0%，结果显示边缘毛刺征与ER、PR表达呈正相关（P>0.05）。ER、PR存在于正常乳腺上皮细胞中，雌、孕激素通过作用于它们来调控乳腺的生长发育和细胞的增殖。受体的水平与激素反应程度正相关。ElebiF等[3]认为ER和PR表达阳性的IDC患者，乳腺细胞功能依旧存在，对内分泌治疗敏感，预后较阴性者好，这两个指标阴性与乳腺细胞合成激素受体能力降低、癌细胞生长迅速有关，预示存在进展或复发风险“边缘毛刺征”的形成是因肿瘤边缘癌细胞向周围结缔组织扩散所致，可由内向外分依次为癌床带、炎性细胞浸润带和结缔组织增生带，构成一个根粗尖细的齿状致密影。李朝喜等[4]认为有边缘毛刺征的乳腺IDC主要出现在肿瘤侵袭性更低的组织学级别，预后较好。结缔组织增生带可限制肿瘤细胞的进一步扩散，起到早期保护的作用，这可以解释该研究中ER、PR表达阳性的乳腺癌为何较阴性者更易向周围浸润。

在该研究中，肿块伴微钙化者占51.8%，HER-2的表达阳性率为66.9%，结果显示肿块伴微钙化者其HER-2过表达率明显高于无微钙化者（P<0.05）。HER-2是一种具有酪氨酸激酶活性的原癌基因，有研究证实，20%～30%的原发性浸润性乳腺癌有HER-2基因的扩增，是肿瘤复发和生存期长短的独立预后因子，是乳腺癌靶向治疗药物的作用位点。HER-2过表达促进癌细胞增殖， 抑制凋亡，增加侵袭力，诱导肿瘤血管新生，预示着肿瘤恶性程度高， 复发率高。癌细胞代谢旺盛，容易在腺泡和导管内形成钙盐沉积，坏死的细胞碎片也可形成钙化。Vibert JF等[5]发现几乎50%～55%的乳腺癌伴有微小钙化灶。姚洁洁等[6]认为，癌灶中微钙化的形成与HER-2过表达关系密切，病灶肿瘤基因快速增殖，细胞坏死使含铁血黄素堆积导致钙盐沉积。

在该研究中，肿块大小≥2 cm者占54.0%，血流分级2～3级者占58.3%，Ki-67的表达阳性率为69.1%，结果显示肿块大小及Adler血供分级与Ki-67阳性表达率呈正相关（P<0.05）。Ki-67是一种增殖细胞标记，应用较为广泛。Wayne S和Okumura Y等[7-8]在肝癌、白血病和宫颈癌等病种的相关研究证实，在恶性肿瘤细胞中Ki-67的表达水平越高，治疗效果及疾病预后就越不乐观。乳腺癌可分泌肿瘤血管内皮生成因子，可促使肿瘤内部形成丰富的微血管网络[9]。外国学者指出乳腺癌血管排列紊乱，壁薄，形成盲袋状末端及动-静脉畸形[10]。邹志英等[11]对肿块最大直径小于2 cm的IDC分类研究，结果显示，肿块最大直径大于1 cm 组Ki-67阳性表达率明显高于小于1 cm组，这与该组研究结果类似。由此推测Ki-67阳性表达率越高，肿瘤细胞增殖越快，血供越丰富。

在该研究中，肿块伴腋窝淋巴结转移者占36.0%，E-cad的表达阳性率为83.4%，结果显示E-cad表达在有淋巴结转移的乳腺癌患者中明显低于无淋巴结转移的乳腺癌患者（P<0.05）。E-cadherin是一个重要的肿瘤转录抑制基因，Blick T等[11]认为当肿瘤恶性程度增加，失去上皮性的标记E-cadherin，可导致细胞无限增殖且细胞间粘附力下降，易脱离原发灶而发生转移。莫倩珍等[12]报道在中国乳腺癌人群中发现E-cadherin蛋白的低表达与淋巴结转移状态明显相关，这与该研究结果一致。endprint

综上所述，目前尚不能在乳腺癌术前、非手术治疗过程中测定分子生物标志物的表达水平。乳腺IDC超声典型征象在一定程度上反映其表达水平，可作为无创性手段，可在乳腺IDC诊治及评估预后等方面提供可靠数据。

[参考文献]

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[2] 邹志英，王文韬，陈琮瑛，等.小肿块型浸润性导管癌超声特征与Ki-67、ER、PR及Her-2之间相关性研究[J].中国妇幼保健，2015 ，30（35）：6341-6344.

[3] Elebi F， Pilanc KN，Ordu ，et al.The role of ultrasonographic findings to predictmolecular subtype， histologic grade，and hormone receptorstatus of breast cancer[J].Diagn Interv Radiol. 2015（21）：448-53.

[4] 李朝喜，刘杨，王立坤，等.乳腺浸润性导管癌的超声征象与雌、孕激素受体及CerbB-2表达的相关性分析[J].中国妇幼保健，2015 ，30（17）：2820-2822.

[5] Vibert JF，Valleron AJ.Automatic detection of microcalcifications in mammography using aneuromimetic system based on retina.Stud Health Technol Inform，2003（95）：589-594.

[6] 姚洁洁，张静雯，朱樱，等.乳腺导管内癌微浸润癌分子生物标志物的表达及其与超声表现的相关性[J].诊断学理论与实践，2014，13（6） ：588-592.

[7] Wayne S，Robinson RA.Upper aerodigestive tract squamous dysplasia： correlation with p16，p53，pRb，and Ki-67 expression[J].Arch Pathol Lab Med，2014，130（2） ： 1309-1311.

[8] Okumura Y，Nishimura R，Nakatsukasa K，et al.Change in estrogen receptor，HER2，and Ki-67 status between primary breastcancer and ipsilateral breast cancer tumor recurrence[J].Euro JSurg Oncol，2015，41（4）：548-552.

[9] 王輔林，韦立新，陈乐珍，等.血管内皮生成因子、微血管密度与乳腺癌淋巴结转移与预后的关系[J].中华病理学杂志，2000，29（3）：172.

[10] Cosgrove DO，Kedar RP，Bamber JC，et al.Breast disease：color Doppler US indifferential diagnosis.Radiology，1993，189（1）：99-104.

[11] Blick T，Widodo E，Hugo H，et al.Epithelialmesenchymaltransition traits in human breast cancer cell lines[J]. Metastasis，2008（25）：629-642.

[12] 莫倩珍，沈家欣，陈敏娜，等.E-钙黏蛋白表达与乳腺癌临床病理学指标相关性的Meta分析[J].癌变畸变突变，2016，28（4）：284-291.

（收稿日期：2017-07-14）endprint