驻马店地区鸡球虫病虫种的鉴定和分析

张三军，朱凤霞，陈 奎

（驻马店市动物疫病预防控制中心，河南 驻马店 463000）

鸡球虫病是由艾美耳科艾美耳属的球虫寄生于鸡的上皮细胞内所引起的一种原虫病，该病在驻马店地区普遍存在，但由于养殖户的科学防治意识不强，目前是造成未成年家禽群体死亡与生长性能及饲料利用率不佳的主要原因。养鸡场对鸡只感染球虫种类不清楚，使用药物有一定的盲目性。为了有效控制鸡球虫病及科学使用药物、选用球虫疫苗提供依据，笔者对驻马店地区鸡球虫进行了虫种鉴定，具体情况如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 试剂

饱和食盐水、2.5%的重铬酸钾溶液、蒸馏水。1.1.2 器材

电热恒温培养箱、光学显微镜、多媒体显微摄像仪、凯特离心机、烧杯。1.1.3 病料

采自驻马店各地区鸡场新鲜粪便和禽病兽医门诊球虫感染病例鸡的新鲜粪便及肠内容物。共计92个养鸡场（户），采样合计：452份。

1.2 方法

临床检查通过临床检查及感染鸡发病情况确定致病力。解剖感染鸡观察整个肠道的病理变化，了解球虫寄生部位，然后进行卵囊鉴定。

1.2.1 卵囊的检测

将采集的新鲜粪便或肠内容物2g放于烧杯中，加30ml饱和食盐水搅匀，过滤，静置约30min，然后镜检滤液是否有鸡球虫卵囊存在。

1.2.2 卵囊的计数

采用斯陶尔氏法计数，参见文献，在显微镜下观察计数球虫卵囊，得数乘以100即为1g新鲜粪便或肠内容物卵囊数。

1.2.3 卵囊的纯化与收集

取5～10g新鲜待检样品，加常水搅匀,粪便筛过滤，取滤液分装至离心管中，放于离心机中2500转/min，离心10min。弃去上清液，向沉淀物中加饱和盐水至离心管1/2处进行离心漂浮（2500转/min，离心10min）。吸取上层液，加2倍蒸馏水混匀，离心。连续2～3次洗去饱和盐水，收集卵囊。

1.2.4 卵囊的孵育增殖

将收集球虫卵囊加入2.5%的重铬酸钾溶液，在培养皿中混合，放于25℃温箱中，培养2～3d，此间多媒体显微摄像仪观察卵囊发育进程，每次不少于100个卵囊，每2h镜检1次，记录孢子化时间，最后清洗除去重铬酸钾，适当稀释得到孢子化卵囊，备用。

1.2.5 卵囊的测量与记录

将增殖得到的卵囊在显微镜下观察，测量卵囊大小，求出最大值、最小值和平均值，并记录卵囊形状、颜色、内部构造、卵膜孔的宽度。

2 结果

根据卵囊的鉴定并结合上述感染鸡球虫的寄生部位、致病性及病变等指标与参考的国内文献对比确定虫种。

2.1 驻马店地区艾美耳球虫感染率和感染球虫种类情况（见表1）

表1 驻马店地区鸡艾美尔球虫感染率和种类

2.2 驻马店部分地区不同日龄段鸡球虫的感染情况（见表2）

表2 不同日龄段鸡球虫的感染情况

3 讨论与分析

3.1 球虫种类

通过剖检，试验鸡肉眼可见的球虫引起肠道的变化结合卵囊大小和形状指数、最短潜伏期、致病性及等指标进行鸡球虫种类的判断。卵囊大小可以用来单纯鉴定巨型艾美耳球虫。由于球虫寄生程度不一，从表1和表2结果来看各种球虫常常混合感染，所以可能在同一病例鉴定到2种以上球虫。

3.2 主要致病种类

目前，全世界公认的鸡艾美耳球虫有9种，在我国均存在。从实验的结果来看驻马店地区球虫感染率36.5%，主要查出了6种艾美耳球虫，其中柔嫩艾美耳球虫感染率最高，达26.11%，其能引起盲肠球虫，是雏鸡致死的主要原因，所以平时要注意对该虫种有效的药物预防治疗。由于该次实验也结合门诊病例，调查结果应较正常偏高。

3.3 影响因素

病料采集的季节和时间以及被采样鸡的预防和用药情况对球虫的检出有一定影响。这次调查驻马店市地区鸡球虫感染率较高，可能与调查时间有一定关系。该次调查时间为2017年3月～9月，这个季节恰逢驻马店地区湿热多雨季节，有利于球虫卵囊的生长发育。

3.4 防治方案

从笔者这次对鸡球虫虫种的鉴定和调查来看，柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫是地方优势虫种，15～42日龄为高发日龄。因此，可根据球虫种类、高发日龄选用抗球虫药，优化用药方案，对科学使用抗球虫药有一定的指导作用。

鸡球虫病在驻马店地区普遍存在，且有的调查点感染强度很高，而养殖户的科学防治意识不强，存在球虫耐药性增强、防治经费投入较大、药物残留严重等问题，使用球虫疫苗控制球虫病在很多方面有很多优势，也是未来发展趋势，这次驻马店地区虫种的鉴定也为养鸡场（户）球虫疫苗的选择提供依据。