探讨肝病患者HBsAg、HBeAg与HBV DNA定量水平的相关性和临床价值

沈 蓉，黄 新，姚红玉，曹利华，宋健辉

（启东市人民医院，江苏 南通 226200）

乙型肝炎多为散发性，无一定的流行周期及季节性，我国是乙肝高发区，中国曾是乙肝高感染率的国家，1992年全国血清流行病学调查人群乙肝病毒感染率达60%，表面抗原携带率为9.75%，全国乙肝病毒携带者约为1.2亿人。其中1/4最终要发展为慢性肝炎，现有慢性肝炎病人1300万左右，每年新发的肝炎（多为乙型）病人约230万[1-3]。原发性肝癌的发生率仍有38/10万，提示对肝癌早诊早治及病因的研究还需持续深入进行。在乙肝患者中，部分病人由于病毒长期活动未能控制，则易发生肝纤维化，并可进展为肝硬化、肝癌。因此如何通过检测指标的高低来衡量病情程度，从而控制病情的进展，降低肝硬化、肝癌患者的发生率和死亡率，是迫切需要解决的问题。

1 资料与方法

1.1 临床资料

入选患者共200例乙肝病例，男性149例，女性51例，均为2011年6月～2014年12月我院肝病队列库中慢性肝病患者，其中慢性乙肝128例，肝硬化35例，原发性肝癌16例，既往均未抗病毒药物。

1.2 血清学检测指标及方法

采用负压静脉采血法，离心分离后，提取血清，冻存与-20°C以下冰箱备检。采用双抗体夹心时间分辨免疫荧光法定量检测血清中的HBsAg、HBeAg，试剂由上海新波生物技术有限公司提供。HBsAg参考范围≥0.2 ng/ml的样品判断为阳性，否则为阴性。浓度值＞150 ng/ml的血样应稀释后再计算浓度值，稀释后浓度应在线性范围内。HBeAg参考范围本试剂盒CUT OFF值为0.5 PEIU/ml。采用PCR体外扩增的方法，通过荧光信号的变化，定量检测血清中的HBV-DNA的含量。HBV-DNA定量采用PCR-荧光探针法，参考值测定拷贝数＜500。该试剂由上海科华实业有限公司提供。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0或Graphpad.prism4.0软件进行x2检验、r检验统计分析。

2 结 果

2.1 不同慢性肝病男女性发病构成性比

结果显示，慢性乙型肝炎患者男女发病构成性比2.12:1，肝硬化患者男女发病构成性比为4.83:1，肝癌患者男女发病构成性比为3:1。见表1。

表1 不同慢性肝病男女性构成比例

2.2 慢性肝病HBsAg、HBeAg与HBV DNA定量的分析

HBsAg定量平均数为4317.65±4006.43，HBeAg平均数为505.19±522.57，经统计分析γ=-0.41，P＜0.05，HBV DNA平均数为6.97±1.65，经统计分析γ=-0.44，P＜0.05，HBsAg和HBeAg与HBV DNA定量均呈负相关性。见表2。

表2 HBsAg、HBeAg与HBV DNA定量的相关性分析

4317.65±4006.43 HBeAg 505.19±522.57 -0.41 ＜0.05 HBV DNA 6.97±1.65 -0.44 ＜0.05±s γ P HBsAg 200指标 n x

2.3 对三种肝病的HBeAg与HBV DNA阳性率比较

HBeAg定量分析采用x2检验x2=26.72，P＜0.005，表明三种肝病HBeAg阳性率之间有显著意义；慢肝与肝硬化相比，经统计分析x2=4.005，P＜0.05有显著意义；慢肝与肝癌相比，经统计分析x2=5.43，P＜0.025有非常显著意义；肝硬化与肝癌相比结果较接近，经统计分析x2=0.62，P＞0.05无显著意义。

三种肝病HBV-DNA定量分析采用x2检验x2=4.68，P＞0.05无显著意义；慢肝和肝硬化比较x2=0.0017，P＞0.5无统计意义；慢肝和肝癌比较x2=4.57，P＜0.05有意义；肝硬化与肝癌比较x2=4.95，P＜0.05有意义。

3 讨 论

表面抗原大量存在于感染者血液中，是HBV感染以及检测的主要标志。它具有抗原性，可诱导机体产生特意保护性的抗-HBs，也是制备疫苗的最主要成分。E抗原为可溶性蛋白质，传染性强，游离存在于血液中，虽然很早就被发现，在病理上认为是HBV复制以具有强感染性的一个指标，但其功能尚不清楚。乙肝病毒DNA是HBV感染最直接、特异性强和灵敏性高的指标，HBV-DNA阳性，提示HBV复制和有传染性。HBV-DNA越高表示病毒复制越厉害，传染性强。中国以及亚太地区乙肝治疗指家均指出：乙肝病毒的持续复制是乙肝致病的根本原因，乙肝治疗的根本目的是抑制病毒复制。

本研究显示，入选的肝病患者血清HBsAg与HBeAg定量相关分析，γ=-0.41，P＜0.05，表明HBsAg与HBeAg有负相关性，入选肝病患者血清HBsAg与HBV DNA定量相关分析，γ=-0.44，P＜0.05，表明HBsAg与HBV DNA复制水平亦呈负相关，与丁佳臣等报道的一致。但也有孙丹凤、陆许贞等研究认为HBsAg与HBV DNA定量水平呈正相关，可能本研究中研究病例数量少，病例中有使用抗病毒药物等因素有关，有待进一步考证。

本研究还显示，从慢性乙肝至肝硬化、肝癌的HBeAg、HBV-DNA定量数据的阳性数及阳性率统计分析，HBeAg、HBV-DNA的阳性率随着肝病程度的严重反而逐渐下降，这也提示肝标志物的定量检测数逐渐下降反而是肝病进展的信号，因结合B超，CT等辅助检查加以鉴别。

国内近年来一些医务工作者也曾探讨过慢性乙型肝炎患者血清中HBsAg、HBeAg、与HBV-DNA定量的关系，徐敬轩，谢而付等认为同时检测HBVDNA与HBeAg能更好地用于临床诊断与疗效观察，HBeAg随着HBV-DNA拷贝数的增加而增加，而HBsAg却呈下降趋势。谢而付，黄佩珺等在研究慢性HBV感染者血清中HBV-DNA与HBsAg、HBeAg的关系中选取555例HBsAg阳性的慢性HBV感染患者血清标本，有338例检出HBVDNA阳性，阳性率为60.9%，对HBV-DNA浓度取对数后分为3组，＞6组，3-6组，＜3组。三组之间HBsAg、HBeAg存在显著差异，随着HBV-DNA拷贝数的增加，HBsAg量呈下降趋势，而HBeAg浓度呈上升趋势，且均存在相关性。对肝病的治疗和评估有一定的指导意义。

慢性乙肝、肝硬化和肝癌已经成为人类健康的常见病、多发病。本研究通过对不同慢性肝病患者的HBsAg、HBeAg与HBV DNA定量的相关性分析，积极探索相关血清学指标对肝癌早期鉴别诊断以及慢性乙型肝炎患者预后进展的判断。

综上所述，加强对HBsAg、HBeAg、HBV-DNA定量的联合检测，可以及早的采取措施，控制病情的进展，从而降低肝硬化、肝癌患者的发生率和死亡率。

[1] 张文瑾,范振平.慢性乙型肝炎抗病毒治疗[J].中国临床医生,2012,40(1):7-10.

[2] 孙 慧,吴金明.乙型病毒性肝炎肝细胞损伤机制的研究进展[J].医学综述,2008,14(21):3296-3300.

[3] 王晓琳,邹桂舟,叶 珺,等.乙肝表面抗原在慢性乙型肝炎病毒感染临床不同阶段的变化[J].实用医学杂志,2014,30(17):2756-2767.