牛皮杜鹃种子萌发和组织培养初探

李永德

（延边大学农学院，吉林延吉 133002）

牛皮杜鹃（拉丁学名：Rhododendron aureum Georgi）：常绿矮小灌木，花期 5～6 月，果期 7～9 月。具有较高的经济价值。牛皮杜鹃叶大花美，是东北稀有的常绿观赏植物。它生于高山冻原和石质山坡上，有利于水土保持，在维持生态平衡方面起着重要的作用。此外，它还是育种的种质资源，是三级国家保护植物。

牛皮杜鹃的有性繁殖即种子繁殖出苗率低，植株生长较慢，不易培育。本研究对牛皮杜鹃种子进行了温度、贮存方法、温水浸种处理等的萌发试验，以达到为该种稀有植物的种质保存和开发利用提供科学依据。

1 材料

供试材料是牛皮杜鹃种子，试验时间是2017年4～6月。

2 方法

2.1 种子采收

牛皮杜鹃的果实在9～10月份充分成熟便可采集果实，放置于实验室晾晒并摊开，一定不要太阳曝晒。并抖出种子，再用细筛将种子筛出，并装入袋子，放在室内干燥的地方，以备用。

2.2 种子处理

先将种子消毒，留些未消毒种子做对照试验；为了缩短种子在土中的吸水时间，加快出苗，可用冷水或40℃以下温水浸泡24h或者48h。

2.3 种子的发芽试验

将种子计数放入内放有滤纸的培养皿中，每皿中放入100粒种子，分别放置于不同温度的恒温培养箱中进行培养，并在15～20℃和25～30℃条件下光照12h，在不同浸种时间、不同水温、不同培养浓度和不同贮存方法下研究牛皮杜鹃种子的萌发情况并予以记录，全部设7次重复，以避免偶然性和实验误差的出现。种子的萌发以培根突破种皮为标准，萌发后继续用配置的营养液在温室内培养，注意种子含水率的均衡，记录发芽情况。

2.4 组织培养

组织培养用野生牛皮杜鹃茎尖、茎段和无菌苗的茎尖、茎段叶片、根作为外植体，重点研究培养需要的最适合培养基种类和培养程序，还有培养过程中要防止污染并且减少褐变的方式，制造出牛皮杜鹃组织培养程序和快速繁殖体系。

2.4.1 外植体选取。用幼嫩的无菌苗作为接种材料时，带芽茎段作为外植体的成活率和增值率较高；但是以野生牛皮杜鹃植株作为外植体时，枝条中部及下部腋芽作为外植体，对减轻污染有较好的效果，外植体采集时间最佳为3月中旬～4月上旬，切取茎尖时较大的组织效果较好。

2.4.2 外植体消毒。牛皮杜鹃种子萌发的幼苗，采取0.1%升汞和吐温2～3滴溶液进行深层的消毒，时间为15min，野生牛皮杜鹃种子的茎尖，应先用70%的酒精表面消毒20s，再用0.1%升汞和吐温2～3滴溶液深层消毒10min，野生牛皮杜鹃种子的茎段，需要先用70%酒精表面消毒30s，然后用0.1%升汞+吐温2～3滴溶液深层消毒15min。

3 结果与分析

3.1 不同温度对牛皮杜鹃种子萌发的影响

牛皮杜鹃种子萌发所需天数随温度升高而减少，15～20℃时需要 28～29d，25～30℃时为 19～20d，但在30℃时，许多种子开始萌动。萌发速率在30℃时表现为最高，种子发芽率可以达到95%，25℃时为80%，表明牛皮杜鹃发芽适合温度大约是25℃，这就和张长芹对云南杜鹃花的试验结果十分相近。15～20℃变温这一组虽略慢于25～30℃这一组，但萌发率较高，这应该是由于杜鹃花在自然环境下适应日夜温差导致的，这一特点可用于在春秋季节露天育苗。在一定较低变温的温度环境下可以提高种子发芽率，有利于水分和氧气进入种子，可促进酶的活动，从而利于种子的发芽。

3.2 不同的贮存方法对牛皮杜鹃种子发芽的影响

将风干脱粒的种子放在-30℃低温保存、脱粒室温贮存、不脱粒室温贮存3种种子在20℃恒温箱里面进行培养。发现风干脱粒组是最好的，萌发率可以到达68%，很明显比脱粒室温贮存组61%和不脱粒贮存组的52%高，且萌发速率也较快了，提高了出苗的整齐度，脱粒室温贮存严重影响了种子的萌发率，这可能因为杜鹃种子细小，所含营养物质很少，再加上无休眠期，由于室温下消耗养分更多所致。但是低温贮存可以延长种子的寿命。在果实中贮藏的种子，干燥度不够，种子呼吸强度又高，养分消耗就更高，因而影响了种子的活力保持。

3.3 不同浸种时间对子发芽率的影响

浸种24h的种子发芽率最低，为55%，随着浸种时间的变长至48h，发芽率提高到73%，而且发芽速率也加快，增强了出苗的整齐程度。对照干播种子发芽率只有53%；而用20℃水浸种的发芽率比干播种子发芽率高一些。可以看出，浸种时间的长短和水温高低是影响发芽的重要原因。