组织常驻记忆性T细胞与银屑病

刘娜 覃慧 郑捷

200443上海市皮肤病医院（刘娜）；上海交通大学附属瑞金医院皮肤科（覃慧、郑捷）

银屑病为免疫介导的慢性炎症性皮肤病，复发是其特点之一，且复发一般位于原皮损部位［1⁃3］。白细胞介素23（IL⁃23）/IL⁃17轴在银屑病的发病中具有重要作用［4］。γδT细胞为银屑病产生关键致病性细胞因子IL⁃17最主要的细胞［5］，应用咪喹莫特诱导的银屑病样鼠模型中，γδT细胞Vγ4+T细胞亚群具有记忆功能并长期存在于小鼠皮肤，再次经咪喹莫特刺激后能够产生比初次反应更强更快的反应［6］。Vγ4+T细胞的特征与组织常驻记忆性T细胞（TRM）的特征相似，可能也是银屑病在相同部位复发的关键性细胞。我们综述银屑病与TRM之间的联系。

一、银屑病发病的免疫学机制

目前认为，银屑病早期阶段，皮肤损伤导致细胞死亡，释放的DNA与角质形成细胞（KC）产生的抗菌肽LL37结合，产生DNA/LL37复合物，与类浆细胞样树突细胞（pDC）内的Toll样受体（TLR）9结合，从而使pDC产生干扰素（IFN）Ⅰ型即IFN⁃α和β。DNA/LL37复合物可以通过TLR7活化pDC，通过TLR8活化髓样树突细胞（DC），干扰素Ⅰ型也可以活化髓样DC［7］。

DC活化后产生IL⁃12和IL⁃23，从而活化CD4+T细胞、CD8+T细胞、γδT细胞，产生IFN⁃γ、IL⁃17和IL⁃22，这些细胞因子作用于KC，通过KC进一步活化免疫系统［7］。KC产生更多的抗菌肽如S100A7、S100A8、S100A9和LL37，作用于DC促进其活化。KC产生更多的趋化因子如CCL20，CCL20通过其配体CCR6使分泌IL⁃17的Th17和γδT细胞达到皮肤局部。KC分泌CXC型趋化因子配体（CXCL）1、CXCL2和CXCL8，吸引中性粒细胞在炎症局部聚集，KC分泌CXCL9、CXCL10和CXCL11吸引Th1细胞在炎症局部聚集［7］。这些趋化因子吸引大量的炎症细胞聚集在皮肤局部，进一步扩大炎症反应。此外，KC也可以分泌一些前炎症因子如IL⁃1、IL⁃6和肿瘤坏死因子α（TNF⁃α），导致皮损迁延不愈［7⁃8］。对银屑病患者及银屑病样鼠模型的研究表明，产生IL⁃17A、IL⁃17F、IL⁃22、TNF⁃α的γδT细胞和Th17细胞，以及诱导这些细胞活化的DC产生的IL⁃23在银屑病发病中起重要作用（即IL⁃17/IL⁃23轴），针对IL⁃17/IL⁃23轴的生物治疗逐渐成为银屑病的一线治疗方法［4，9］。

在IL⁃23及咪喹莫特诱导的银屑病样鼠模型中，真皮γδT细胞是产生IL⁃17的最主要细胞。γδT细胞或IL⁃17R缺陷显著减少IL⁃23诱导的表皮增厚及中性粒细胞浸润。此外，银屑病患者皮损中γδT细胞比例增加，健康人γδT细胞比例约占CD3+T细胞的4%左右，而银屑病患者为40%左右，与γδ⁃T细胞（除γδT细胞外的其他CD3+T细胞，主要为CD4+及CD8+T细胞）相比，能够分泌更多的IL⁃17。这些结果表明，真皮的γδT细胞在银屑病的发生发展过程中具有重要作用［5，10］。

二、TRM

在获得性免疫中，记忆性T细胞可以对曾接触的抗原发生快速有效的免疫应答。以往的研究将记忆性细胞分为2群：中枢记忆性T细胞（TCM）和效应记忆性T细胞（TEM）。TCM表达趋化因子受体CCR7和血管地址素L选择素CD62L，使之从外周血进入淋巴结。TEM仅表达低水平的CCR7和CD62L，但表达能够使他们进入外周组织的受体，在皮肤为皮肤淋巴细胞抗原（CLA）［11］。在过去的十年中，发现有另外一群重要的记忆性T细胞——TRM，该群细胞主要分布于环境与宿主的上皮屏障组织中如胃肠道、呼吸道和皮肤，TRM能够对局部的病原体快速反应而不需要从外周血招募T细胞。TRM是组织特异的，如皮肤组织TRM，是由成为TRM之前的皮肤T细胞通过皮肤上皮屏障接触到病原体或抗原后转变而来。由于接触的病原体及上皮屏障的不同，不同组织的TRM不同［1，11］。初始T细胞活化所在的局部淋巴结微环境决定了其表达的组织归巢分子，在皮肤引流淋巴结活化的初始T细胞表面表达CLA及CCR4、CCR6、CCR8和CCR10［11］。

无菌环境下的小鼠皮肤中仅有少量TRM，应用单纯疱疹病毒或病毒疫苗使皮肤局部急性感染病毒后，在感染皮肤部位长时间存在大量的CD8+TRM，再次感染相同的病毒时能够快速清除病毒，而不需要抗体及循环T细胞的参与［1］。虽然病毒感染局部具有高浓度的TRM，但感染过后具有长寿命、高保护性的TRM可以遍布整个皮肤，从而对不同部位的皮肤感染提供保护［12］。

正常情况下皮肤局部的TRM对局部已知的病原菌提供高效保护作用。但是当T细胞对无害的环境或者自身抗原产生反应后转化为TRM时，易于导致TRM相关疾病，如银屑病、过敏性哮喘等［1］。根据TRM的生物学特征，其导致的皮肤疾病边界清楚，长期存在于特定的部位，虽然抗炎治疗能够缓解疾病，但停药后如果刺激因素存在，疾病通常在相同部位复发，且皮损范围可与治疗前一致。在致病原的作用下，TRM可以在48 h内发生快速炎症反应，在致病原不断刺激下，导致疾病逐渐进展［1，13］。根据TRM导致的皮肤疾病的临床特征，推断银屑病是典型的TRM介导的炎症性疾病。

三、TRM与银屑病的相关研究

从免疫学方面推断，银屑病是TRM介导的疾病。首先，E选择素可以完全阻断T细胞从外周血到达皮肤局部，应用E选择素治疗银屑病完全无效［14］。其次，应用银屑病患者非皮损处皮肤转移至免疫缺陷鼠，可以发展为典型的银屑病皮损。这些研究结果表明，致病性TRM存在于银屑病患者的非皮损处，不需要从外周血招募［15］。

皮肤 CD8+TRM的表面标志为CD103［16］。有研究表明，银屑病患者表皮在窄谱中波紫外线及生物制剂（抗TNF⁃α拮抗剂英夫利西单抗及针对IL⁃12/IL⁃23 p40亚单位的乌司奴单抗）治疗后，治疗好转的患者表皮中具有高表达CD103和CD49a标志且能够分泌IL⁃17A的CD8+T细胞，这群细胞具有TRM的特征，而且在银屑病复发中具有重要意义［2］。

TRM表面的标志包括糖蛋白CD69，CD69被认为是活化T细胞的标志，但目前认为其也可以在静息状态的TRM表面表达并阻止其迁移至淋巴结［17］。有研究表明，在银屑病患者及IL⁃23诱导的小鼠模型中γδT细胞表面CD69表达上调［18］。在银屑病患者中具有TRM功能的γδT细胞表面的标志是哪些分子，需要进一步研究。

四、具有记忆样功能的γδT细胞与银屑病

获得性免疫的最主要特征是再次遇到相同抗原时能够迅速使更多数量的免疫活性细胞参与反应［6］。传统的αβT细胞具有明确的记忆特征，而在银屑病的发生发展中起关键作用的γδT是否具有记忆特征及其表面标志等迫切需要了解。最近有研究显示，在咪喹莫特诱导的银屑病样鼠模型中，Vγ4+γδT17细胞在近端引流淋巴结处增殖，经外周血达到远端的皮肤和淋巴结，并在远位淋巴结及远端皮肤持续存在数月［6］。与首次咪喹莫特刺激相比，再次应用咪喹莫特刺激在皮肤远位记忆样Vγ4+γδT17细胞能够更快地增殖并产生更多IL⁃17，导致更快的皮肤炎症反应。转移实验证实，记忆样Vγ4+γδT17反应更快，而且表面的IL1R1表达更多，对于IL⁃1β具有更快的增殖反应。这些结果表明，局部皮肤炎症通过长时间改变真皮γδT细胞的组成和特征，再次用咪喹莫特刺激后，导致更快更强的反应［18］。

进一步研究表明，咪喹莫特诱导的银屑病样鼠模型中具有记忆特征的细胞为Vγ4+Vδ4+T细胞，而不是其他细胞（Vγ4+Vδ4⁃T细胞、Vγ6+T细胞及αβT细胞），应用抗体阻断Vγ4后，再次应用咪喹莫特刺激时，疾病表型与阻断前首次刺激的表型一样［19］。记忆性Vγ4+Vδ4+T细胞表面也表达CLA、CD103。应用咪喹莫特首次刺激后，Vγ4+Vδ4+T细胞在淋巴结扩增，然后分布到远位的皮肤及淋巴结，并在远位持续6个月之久。再次应用咪喹莫特激发，银屑病样鼠模型能够快速出现，Vγ4+Vδ4+T快速增殖，并具有更强的产生IL⁃17的能力［19］。

上述结果表明，咪喹莫特诱导的银屑病样鼠模型中Vγ4+Vδ4+T细胞具有TRM的分子标记及其特征。无菌小鼠γδT细胞数量也很少，与TRM相似，在感染或在炎症状态下增殖并停留在皮肤，提供对病原菌的保护或作为致病性细胞长期存在于皮肤［6］。在银屑病患者中γδT细胞为主要产生IL⁃17的细胞［5］，其是否是银屑病患者的TRM并导致银屑病发生发展需要进一步研究。

五、结语

银屑病以复发为特征，且每次复发都在同一部位。虽然目前治疗银屑病的方法很多，但疾病仍经历不断的复发和缓解的循环。γδT细胞为银屑病患者和咪喹莫特或IL⁃23诱导的银屑病鼠模型中主要产生IL⁃17的细胞，研究这些细胞及分子机制对于阐述银屑病的复发机制、研究阻断TRM功能的药物以及减少疾病复发具有重要意义。