牛病毒性呼吸道疾病诊断方法

米吉提 张治华 银鸽 （新疆博州温泉县畜牧兽医站 833500）

对养牛业而言，一旦出现牛呼吸道疾病，除了对养牛场的经济效益造成影响外还会影响整个养牛业的发展。导致牛出现呼吸道疾病的具体原因比较复杂，病毒是其中非常重要的病理之一，通过对现阶段已经分离出的病毒分析可以看出，除牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等。牛呼吸道疾病还与一些环境因素产生联系，比如温度、湿度、粉尘等。

1 牛病毒性呼吸道疾病的病毒分离鉴定诊断方法

通过现阶段已经分离出来的病毒分析得出，这些病毒都可以被放在牛肾细胞上进行培养。在针对这些病毒进行现场检测时，可直接从感染呼吸道疾病的牛鼻腔分泌液上进行样本采集。在检测时，采集病牛气管黏膜或者是已经发生病变的肺部组织，同时还可以将一些血液、脾脏器官当做样本进行试验分析。其中BVDV出现两种病变类型，其一是致细胞病变型 （CP），其二是非致细胞病变型 （nCP）。其中CP-BVDV可以让感染细胞逐渐变圆，这样会导致细胞浆液逐渐出现空泡现象，这种状态如果一直持续会形成细胞单层拉网，最终导致细胞死亡。通过对该现状内容进行实际分析可以看出，现阶段在临床上主要是将nCP-BVDV作为分离的主要类型。在这种前提条件下可以直接与一些免疫荧光、RT-PCR等进行结合，实现分离毒株培养物的有效鉴定，能尽可能保证鉴定结果真实、有效。除此之外，IBRV能促使细胞逐渐呈现出圆缩状态，这种状态下，其会渐渐演变成为葡萄样群落，在单层细胞上会呈现出空洞现象[1]。除此之外，在实践中还会偶尔出现合胞体状态，针对这一现状，在实践中如果想对IBRV进行鉴定，看其是否存在致细胞病变的病毒时，需要将通过病毒培养的上清液放置在特定的抗血清、或者是一些单克隆体上进行中和试验。在中核试验实施过程中，要保证所有流程都按照相关标准和规定去完成，这样才能保证中和试验的效果。在中和试验完成之后，通过对试验结果进行分析，一旦确定细胞已经被IBRV所感染，那么在这之中必然会出现核内包涵体。

2 牛病毒性呼吸道疾病的病毒核酸检测诊断方法

除了病毒分离鉴定的诊断方法之外，病毒核酸检测的诊断方法也是近年来在针对牛病毒呼吸道疾病进行判断时比较常见的方式。病毒核算检测方法与病毒分离方法在针对牛病毒性呼吸道疾病诊断时，前者与后者相比具有比较多的优点。这是由于病毒分离法在实际应用过程中很容易受到中和抗体的干扰，导致其敏感性和特异性比较高。另外，核算检测方法能针对一些有感染性的病毒粒子进行检测。病毒核酸检测方法在实际应用过程中，该方法的整体敏感性和特异性比较明显，同时还能在实际应用中直接感受到已经受到感染、或者是一些不完整的病毒基因，利用该方法可以实现对其科学合理的检测。在检测过程中，不仅实现对这些病毒的深入检测，而且还能保证最终的检测结果。有部分专家根据BVDV5’UTR基因序列，结合实际情况，构建特异性引物，并且在其中逐渐形成了能够针对BVDV进行有效检测的RT-PCR方法[2]。这种方法后期被应用到实践中，能从BVDV Oregon C24V中逐渐扩增出相应的特异性片断。除此之外，从猪瘟病毒、IBRV、BRSV等的扩增结果进行分析可以看出，这些病毒的扩增结果呈现阴性。

3 结束语

综上所述，本文在针对牛病毒性呼吸道疾病诊断方法进行分析，介绍病毒分离鉴定和病毒核酸检测两个方法。这些方法在保证最大限度为牛病毒性呼吸道疾病提出有针对性诊断的基础上，能保证诊断结果真实、有效，为后期疾病防治提供准确有效的依据作为支持。

[1]薛飞,朱远茂,马磊.我国牛病毒性腹泻、黏膜病研究进展及防控策略[J].中国奶牛,2016（11）:25-29.

[2]王炜.牛主要呼吸道病毒病血清学调查、牛病毒性腹泻病毒分离株鉴定及疫苗研究[D].北京:中国农业科学院,2014.