大兴安岭地区2种珍稀菌类母种菌丝培养温度的筛选

庞启亮+胡海冰+梁秀凤+李宏涛+许延敏++刘柱+刘昕哲

摘要 松杉灵芝和荷叶离褶伞是大兴安岭地区的2种野生珍稀菌类。本试验以野生灵芝和荷叶离褶伞分离得到的母种为材料，以PDA为培养基，研究其在不同培养温度条件下的菌丝生长状况，旨在筛选出其最适生长温度，为以后的培养及优化提供必要的数据依据。结果表明，在20 ℃条件下，松杉灵芝和荷叶离褶伞的菌丝长势浓密、洁白、整齐。因此，其最适生长温度均为20 ℃左右。

关键词 松杉灵芝；荷叶离褶伞；最适生长温度；大兴安岭地区

中图分类号 S646.1；S646.2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）22-0052-01

松杉灵芝（Ganoderma tsugae Murr.），又名铁杉灵芝、赤芝、木灵芝、灵芝草，为担子菌纲、多孔菌目、灵芝科、灵芝属，是一种珍贵的食、药兼用真菌，其有效药用成分是普通灵芝的数倍[1-2]。野生松杉灵芝主要分布在寒温带地区，如我国的黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古等地区[3]。多数生长在海拔700～1 400 m的针阔混交林、针叶混交林内。目前，在大兴安岭地区，已开始研究松杉灵芝的人工栽培技术，但由于母种存活率低，在一定程度上造成了产品质量差，经济收益低。离褶伞真菌（Lyophyllum Karst）属于担子菌门（Basidomycota）伞菌纲（Agariomycetes）伞菌目（Agaricales）离褶伞科（Lyoph-yllaceae）[4]。离褶伞真菌不仅美味可口，也是一种珍贵的药用真菌，具有抗衰老、抗肿瘤、提高免疫功能等作用。目前，世界记录离褶伞真菌有200余种[5]，其中我国报道的有19种，主要分布在黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、云南等地区[6]。

松杉灵芝和荷叶离褶伞是大兴安岭地区的2种野生珍稀菌类，具有很高的应用前景和开发价值，在其人工栽培技术的研究过程中，母种培养是最为关键的环节。本试验以PDA为培养基，在不同的温度条件下，培养松杉灵芝和荷叶离褶伞的母种，观察其菌丝的生长状况，筛选出其最适生长温度，为进一步开发研究其人工栽培技术提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试食用菌母种。松杉灵芝菌种：加区主栽灵芝6号和2013年图强野生菌种分离提纯得到的母种；毛尖蘑：野生荷叶离褶伞分离提纯得到的母种。

1.1.2 供试基本培养基及仪器。PDA培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂20 g、加水至1 000 mL，pH值自然。仪器：超净工作台、生化培养箱、平板、接种钩、尺子、记号笔。

1.2 试验方法

在超净工作台里，将不同的供试菌种接种到PDA平板上培养，每个品种分别在3个温度下（20、25、30 ℃）各接种3个平板，进行重复试验。然后将平板放到相应的不同温度的恒温培养箱里倒置培养。除温度不同外，其他培养条件均相同。

在培养期间，从第4天开始，每种供试品种选2个平板进行测量菌落的直径，定时记录松杉灵芝和荷叶离褶伞菌丝的生长速度、生长势、颜色、边缘特征等。最后，根据供试菌种的生长速度和生长势，分析出相应的最适生长温度。具体试验设计如表1所示。

2 结果与分析

2.1 松杉灵芝母种菌丝在不同温度下的生长情况

2.1.1 加区主栽灵芝6号在不同温度下菌丝的生长情况。从表2可以看出，在20 ℃和25 ℃下，加区主栽灵芝6号的日均生长速度基本差不多，都接近于0.60 cm/d，在30 ℃下，其菌丝基本不长。从表3可以看出，在20 ℃下，培养15 d菌丝长满平板，菌丝粗壮稠密且分布均匀，菌丝长满平板后尚未分泌色素；在25 ℃下，培养17 d后菌丝长满平板，菌丝稀疏，分布不均匀，菌丝长满平板后，分泌出少量的色素，菌丝有老化的现象。

2.1.2 图强野生松杉灵芝在不同温度下菌丝的生长情况。从表4可以看出，图强野生灵芝母种菌丝体在20 ℃下的日均生长速度为0.67 cm/d，较25 ℃的快，30 ℃下菌丝基本不生长。在20 ℃下，培养15 d菌丝长满平板，菌丝洁白，粗壮稠密，分布均匀，菌丝长满平板后，接种点的一侧2 cm处分泌了少量色素；25 ℃下，培养17 d后菌丝长满平板，菌丝洁白浓密，分布不太均匀，菌丝长满平板后，接种点附近分泌了大量色素，菌丝老化严重。

2.2 荷叶离褶伞母种菌丝在不同温度下的生长情况

从表5可以看出，荷叶离褶伞在20 ℃下的生长速度为0.387 cm/d，明显高于其他处理，菌丝洁白，粗壮稠密且分布均匀，故其最适生长速度为20 ℃左右。30 ℃时，菌丝死亡。

3 结论与讨论

加区主栽灵芝6号和图强野生松杉灵芝是大兴安岭地区特有的2种野生松杉灵芝，通过试验证明，在20 ℃条件下，其母种菌丝生长速度较快，菌丝粗壮茂密，菌丝均匀整齐分布，而且基本不会出现老化现象；在25 ℃的条件下生长势相对较弱，菌丝均出现老化；30 ℃时菌丝死亡。因此，松杉灵芝母种菌丝的最适生长温度应在20 ℃左右。

荷叶离褶伞经过在20、25、30 ℃的条件下培养处理，结果表明，在20 ℃的条件下，其母种菌丝生长最快，日均生长速度可达到0.387 cm/d，明显高于其他温度处理，菌丝洁白，粗壮稠密且分布均匀。因此，其最适生长温度应该在20 ℃左右。

4 参考文献

[1] 吴兴亮.中国药用真菌[M].北京：科学出版社，2013：12.

[2] 孫巍巍，包海鹰.松杉灵芝提取物体外抗氧化活性的研究[J].中国食用菌，2010，29（6）：39-41.

[3] 吴兴亮，戴玉成，林龙河.中国灵芝科资源及其地理分布[J].贵州科学，2004（2）：27-33.

[4] KIRK PM，CANNON PF，MINTER DW，et al.Dictionary of the fungi 10th edition[M].Trombridge：Cromwell Press，2008.

[5] 李永红，柴红梅，李树红，等.离褶伞研究进展[J].中国食用菌，2008，27（2）：10-12.

[6] 李晓，李玉.中国离褶伞属真菌研究进展[J].食用菌学报，2009，16（3）：75-79.endprint