祛银胶囊治疗银屑病的作用机理研究

付 锐，杨 钧

(济宁市皮肤病防治院，山东 济宁 272000）

祛银胶囊治疗银屑病的作用机理研究

付 锐，杨 钧

(济宁市皮肤病防治院，山东 济宁 272000）

目的 研究祛银胶囊治疗银屑病的药效学机制。方法 用小鼠尾部鳞片表皮模型，豚鼠耳部银屑病模型，观察祛银胶囊对银屑病动物模型的影响，用小鼠碳粒廓清功能法观察对小鼠免疫功能的影响。结果 祛银胶囊能促进模型小鼠尾部鳞片表皮的颗粒层形成，改善豚鼠耳部银屑病模型的病理改变，抑制小鼠的非特异免疫功能。结论 祛银胶囊有治疗银屑病的作用。

祛银胶囊；银屑病；银屑病动物模型；药效学

银屑病是常见的自身免疫性疾病之一，具有反复性、难根治的特点。自制中药祛银胶囊由金银花、黄连、拳参、当归、白鲜皮、苦参、槐花等中药饮片提取精制而成，功能清热解毒、凉血润燥、活血止痒,主治寻常型银屑病。参照《中药新药研究的技术要求》，对祛银胶囊进行了治疗银屑病的主要药效学研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物 中药祛银胶囊(济宁市皮肤病防治院制剂室生产)，制剂规格为0.38g/粒，相当于1.55g中药饮片/粒。消银胶囊(陕西摩美得制药有限公司生产)，规格为0.3g/粒，相当于0.574g中药饮片/粒。实验给药剂量均用制剂量表示(g/kg)，灌胃给药时以生理盐水制成所需浓度的混悬液。己烯雌酚注射液(天津金耀药业有限公司生产)，规格为1ml:2mg。注射用硫酸长春新碱(浙江海正药业股份有限公司生产)，规格为1mg/支。盐酸普萘洛尔(江苏云阳集团药业有限公司生产)，规格为原料药。5%心得安乳剂自制：取盐酸普萘洛尔5g用适量50%乙醇溶解，加入月桂氮卓酮5g和聚乙烯吡咯烷酮10g使溶解，再加50%乙醇使成100ml，摇匀，即得。

1.1.2 动物 SPF级KM小鼠，体重18～22g；SPF级Wistar大鼠，体重180～200g；普通级豚鼠，体质量350～400g；动物均购自鲁抗医药股份公司动物中心，动物证号：SCXK(鲁)20130001号。

1.2 实验方法

1.2.1 对小鼠尾部鳞片表皮的影响 参考文献方法[2]，取SPF级KM小鼠，雌雄各半，随机分成5组：中药祛银胶囊高、中、低剂量组(g/kg)，消银胶囊阳性组和阴性组(等容积纯化水)。给药组分别在每天上午8时灌胃给药，剂量为0.2ml/10g，每日1次，连续14d；阴性组给予等容积纯化水。在末次给药24h后处死小鼠，剪取离尾根1.5cm处的背部表皮，做常规组织切片，HE染色。在光镜下观察小鼠尾皮肤的角化层、棘细胞层、颗粒层、真皮层和毛囊的变化，同时计数100个鳞片中观察到颗粒层形成的鳞片数[1]。

1.2.3 对豚鼠耳银屑病模型的影响 参考文献方法[3]，豚鼠雌雄各半，先适应性饲养1周，又将豚鼠双耳去毛后，随机分为空白组12只、实验组54只。实验组采用5%心得安乳剂涂于豚鼠双侧耳背，空白组涂抹基质，每次涂0.3ml，4次/d。涂药2周后，实验组取4只、空白组取2只做病理学检查：实验组耳组织出现角化过度及角化不全、颗粒层变薄、真皮层血管扩张、炎细胞浸润、乳突突出，证明造模成功。实验组剩余的50只豚鼠根据体重和造模结果随机分成5组：中药祛银胶囊高、中、低剂量组，消银胶囊阳性组和阴性组，阴性组和空白组均给予等容积纯化水；均灌胃给药，各组剂量均是1ml/100g·次，2次/d。给药10d后，12%水合氯醛0.35ml/100g腹腔注射，经腹主动脉取血处死，取豚鼠双耳组织，10%甲醛溶液固定，用石蜡包埋，HE染色后，中性树胶封片。置光镜观察，任选5个视野，行Baker法评分。

1.2.4 对小鼠碳粒廓清速率的影响 参考文献方法[4]，采用碳粒廓清法测定中药祛银胶囊对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响。SPF级KM小鼠，雌雄各半，随机分成5组：中药祛银胶囊高、中、低剂量组，消银胶囊阳性组和阴性组(等容积纯化水)。灌胃给药，1次/d，剂量为0.2ml/10g，连续7d；第7d给药后2h，先称体重，然后各鼠均由尾静脉注射印度墨汁0.1ml/10g(临用前用生理盐水稀释5倍)；注射完毕立即计时，分别于注射2min后、10min后、18min后，用预先经250u/ml肝素溶液处理过的毛细管从小鼠左、右眼眶后静脉丛取血0.02ml，立即吹入盛0.1%Na2CO3液2ml的试管中，混匀，于分光光度计600nm波长处测取光密度(OD值)，作为小鼠碳粒廓清速率指标。

2 结 果

2.1 对小鼠尾鳞片表皮的影响

正常组小鼠表皮颗粒细胞较少，给药组为角质不均或消失、棘细胞层增厚、颗粒层增生、基底细胞分裂减少等。表明中药祛银胶囊对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成有明显的促进作用，与阴性组比较，各给药组差异有统计学意义(P＜0.05)；与阳性组比较，中药祛银胶囊高剂量组差异有统计学意义(P＜0.05)；各给药组真皮层和毛囊等未见明显变化。结果见表1。

表1 对小鼠尾部鳞片表皮的影响( ± s)

表1 对小鼠尾部鳞片表皮的影响( ± s)

注:与阴性组比较,*P＜0.05,**P＜0.01；与阳性组比较,＃P＜0.05。

组别 n 剂量 有颗粒层的鳞片数(%)阴性组 10---12.04±4.55*阳性组 10 0.6923.02±6.11**高剂量组 10 2.6431.63±6.64**＃中剂量组 10 1.3225.81±5.13**低剂量组 10 0.6619.40±4.70*

2.2 对豚鼠耳银屑病模型的影响

空白组角质层薄，呈网状交织，约1～2层，颗粒层清晰；棘层细胞3～5层；基底层单层柱状细胞，表皮突平坦；真皮层无浅层毛细管扩张，分布有少量淋巴细胞。阴性组可见角化过度或角化不全，颗粒层消失或变薄，棘层肥厚，真皮毛细血管扩张还有轻中度炎细胞浸润，Baker评分结果见表2。阴性组与空白组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，证明造模成功。光镜观察，各给药组角化不全或过度角化现象减轻，棘层变薄，颗粒层增加，表明给药组对改善豚鼠银屑病样病变均有效，中药祛银胶囊高剂量组优于阳性组和低剂量组，呈现剂量依赖型量效关系。

表2 对豚鼠耳银屑病模型Baker评分的影响

2.3 对小鼠碳粒廓清速率的影响

见表3研究结果显示，各给药组与阴性组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)；祛银胶囊高剂量组优于阳性组和低剂量组，表明中药祛银胶囊能降低单核巨噬细胞对异物的吞噬能力，抑制机体非特异性免疫功能。

3 讨 论

银屑病人群发病率0.1%～2%，部分欧洲国家可达到3%[5]。其发病机制未完全明了，目前研究认为表皮细胞的过度增殖，炎症和免疫学异常在寻常型银屑病发展中起重要作用[6]。本实验证实祛银胶囊能促进小鼠尾部鳞片表皮颗粒层的形成，抑制小鼠阴道上皮细胞有丝分裂，显著改善豚鼠耳部银屑病模型的病理改变，抑制单核巨噬细胞对异物的吞噬和机体非特异免疫功能，实验结果为祛银胶囊治疗银屑病提供了药效学依据。

表3 对小鼠碳粒廓清功能的影响(x ± s)

[1]阿布都吉力力·阿布都艾尼，尤力都孜·买买提，热比姑丽·伊斯拉木.土大黄根提取物对小鼠尾部鳞片角化不全模型的影响[J].中国医药导报，2016，13(20):4-7,29.

[2]杨皓瑜，王金平，李梦琳，等.清热凉血中药对小鼠银屑病模型的干预机制[J].北京中医药大学学报，2015，38(2):111-114.

[3]杨正生，李力，王亚斐，等.姜黄素对豚鼠银屑病样动物模型的药效评价及对增殖细胞核抗原表达的影响[J].中华皮肤科杂志，2015，48(3):175-178.

[4]刘晏，魏刚，朱丰林，等.新痹痛灵对小鼠免疫功能的影响[J].长春中医药大学学报，2015，31(5):908-910.

[5]TanJ,WolfeB.A patient decision aid for psoriasis based on current clinical practice guidelines[J].Arch Dermatol,2012,148(6):718-723.

[6]Kim J,Krueger JG.The immunopathogenesis of psoriasis[J].Dermatol Clin,2015,33(1):13-23.

Study on the Mechanism of Quyin Capsules in Treating Psoriasis

FU Rui, YANG Jun
(Dermatology hospital of jining city, Shandong Province, 272000, China)

Objective Pharmacodynamic Mechanism of Quyin Capsules in the Treatment of Psoriasis.Methods The effects of Quyin Capsules on the immune function of mice were observed by using mouse tail scale epidermis model and guinea pig ear psoriasis model.The effects of Quyin Capsules on simulated psoriasis animal model were observed.Results Quyin Capsules can promote the formation of granular layer on the tail scale epidermis of model mice,improve the pathological changes of guinea pig ear psoriasis model and inhibit the non-specific immune function of mice.Conclution Quyin Capsules has the effect of treating psoriasis.

Quyin Capsules;Psoriasis;Psoriasis animal model;Pharmacodynamics

10.19593/j.issn.2095-0721.2017.12.031

济宁市中医药科技项目（项目编号ZYY2016-24）

付锐（1976-）女，汉族，山东济宁人，硕士学历，副主任医师。