I型糖尿病并发慢性胆囊炎与IL-6基因多态性的关联研究

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(1.湖北医药学院附属人民医院消化内科，湖北 十堰 442000 2.湖北医药学院附属人民医院药学部)

·临床医学·

I型糖尿病并发慢性胆囊炎与IL-6基因多态性的关联研究

吴军1，尚瑞1*,郑雪皎2

(1.湖北医药学院附属人民医院消化内科，湖北 十堰 442000 2.湖北医药学院附属人民医院药学部)

目的探讨I型糖尿病并发慢性胆囊炎与IL-6基因多态性的相关性。方法收集I型糖尿病并发慢性胆囊炎患者110例和对照者120例。采用PCR技术进行基因多态性检测，结合问卷调查等进行病例对照研究。结果结果提示病例组CC基因型比例高GG基因型比例低;病例组C等位基因分布较高。单因素分析提示携带IL-6 174 C等位基因的OR值为1.357；高血压现病史的OR值为1.324；多因素Logistics回归分析结果提示携带IL-6 174 C等位基因、高血压、肥胖/超重以及饮酒史为潜在危险因素。结论IL-6 -174C/G基因多态性与慢性胆囊炎并发I型糖尿病患者的易感性可能存在关联。

白细胞介素-6; 慢性胆囊炎； I型糖尿病； 基因多态性

慢性胆囊炎常常见于急性或亚急性胆囊炎反复发作或胆囊结石引起的胆囊功能异常，患者可能存在细菌感染，是临床上常见的一种慢性炎症性疾病[1-2]。Ⅰ型糖尿病(Type 1 Diabetes Mellitus,T1DM)也是临床不容忽视的一种慢性疾病，其发生更多地与免疫和遗传因素密切相关。近年来很多研究报道糖尿病患者合并胆囊疾病的发病率有不断增高的趋势[3-5]。白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6) 是一种由单核巨噬细胞分泌的多功能细胞因子,人类的IL-6 基因定位于7p21,含五个外显子和四个内含子,其启动子区含有多个不同的调控元件，IL-6主要在人体的免疫调节中发挥作用，可以参与炎症反应[6-7]。临床上包括糖尿病以及胆囊疾病在内的许多疾病患者都可能出现血清IL-6 水平升高，IL-6 基因具有多态性,比如其基因启动子区3个位点单核苷酸多态性的分布与慢性乙型肝炎病毒感染、肝细胞癌等许多肝胆消化系统疾病存在关联，同时也有不少报道提示IL-6的基因多态性与糖尿病及其大血管病变关联密切[6-7]。鉴于IL-6基因多态性与T1DM并发慢性胆囊炎的关联究尚鲜有研究涉及，故本研究就此进行初步分析讨论。

1 材料与方法

1.1一般资料本研究得到本院伦理委员会批准。将2013年1月至2015年12月在本院治疗的T1DM并发慢性胆囊炎患者110例作为病例组，同时收集年龄性别可比的120例健康受试者作为对照者。两组性别年龄可比，病例组的BMI指数28.15±3.98 kg/m2,高于对照组26.86±6.52kg/m2,P<0.05;病例组的高血压现患例数65例，构成比例为59.09%，高于对照组的39例(32.50%),P<0.01;病例组的糖尿病家族史比例高于对照组，分别为60(例占54.55%)和13例(占10.83%),P<0.01;吸烟和饮酒史的比例也为病例组较高，吸烟史病例组15例(占13.64%)对照组为14例(11.67%)，P<0.05；饮酒史病例组21例(占19.09%)，对照组10例(8.33%)，P<0.01。详见表1所示。

表1 研究对象临床资料及一般情况的特征分布比较(n,%)

与对照组比，a:P<0.05，b:P<0.01

1.2诊断标准和排除标准慢性胆囊炎的诊断标准参照该病临床表现多不典型，有厌油腻食物、腹胀、嗳气、上腹部不适等症状，查体无明显阳性体征等临床表现，并参考尿胆红素阳性而尿胆原减少，辅以B超等检查。T1DM的诊断标准根据ADA1997年发布的诊断与分型标准进行[9]。排除标准；排除Graves病、系统性红斑狼疮、桥本氏甲状腺炎等自身免疫性疾病。全部受试者均知情同意，并签署知情同意书。

1.3 PCR法检测外周血IL-6 174C/G基因型根据文献涉及PCR引物扩增目标材料，分别以Hin1I酶切前、后的模板DNA，进行IL-6 174C/G 基因的扩增，扩增体系为 20 μL:混匀离心；设置 RT-PCR 反应条件：95 ℃ 10 min，40个循环，在ABI StepOne/StepOnePlus 实时荧光定量PCR仪上完成，通过软件分析扩增情况，循环结束后进行熔解曲线分析。每个样品设两个复孔，结果取其平均值。计算基因型频率和等位基因频率，并结合问卷调查和临床检查的相关信息进行病例对照分析研究。研究对象外周静脉血5 mL，EDTA抗凝，-20 ℃保存备用于试剂盒法血液基因组 DNA提取。

2 结 果

2.1血IL-6 174G/C基因多态性本研究中，病例组和对照组中IL-6三种基因型的分布特征比较结果提示存在差别，病例组CC基因型比例高，比例为40.91%，对照组为28.33%，P<0.05;而GG基因型病例组为7.27%，对照组为19.17%，P<0.05;此外，C等位基因分布在病例组为52.73%，对照组为15.00%，P<0.01。如表2所示。

表2 两组人群血IL-6 174G/C基因多态性比较(n,%)

与对照组比，a:P<0.05，b:P<0.01

2.2影响T1DM并慢性胆囊炎的潜在危险因素分析单因素分析结果提示携带IL-6 174 C等位基因的OR值为1.357(1.037～1.776)；高血压现病史的OR值为1.324(1.187～1.476)；超重或肥胖以及饮酒史也都表现为危险因素，OR值分别为1.165(1.087～1.249)和1.113(1.046～1.184)；在单因素分析的结果基础上，并结合临床实际，对可能影响本病发生的的潜在因素进行多因素Logistics回归分析，结果提示携带IL-6 174 C等位基因、高血压以及肥胖/超重为潜在危险因素，OR值及其95%可信区间饮酒史的OR值详见表3。

3 讨 论

白细胞介素是细胞因子网络中重要成分之一，是具有多种功能的细胞因子，在人体中白介素会通过复杂的细胞信号传导途径调节细胞的生长、分化、凋亡、转化等过程[6-7]。IL-6 的基因多态性一方面可能来源于基因组中重复序列拷贝数的差异,另一方面也可能来源于单拷贝序列的变异[8]。最近越来越多的研究结果显示，IL-6相关信号传导通路异常激活、过度表达减弱或缺失等与众多慢性病的发生以及发展过程均存在关联。另有研究提示，在慢性结石性胆囊炎组织中，重组人猬因子SHH(Sonic Hedgehog,SHH)信号通路异常激活与胆囊上皮细胞的过度增殖以及恶变可能存在联系，同时钙粘蛋白抑癌基因表达下调可能导致胆囊上皮细胞结构和功能破坏，与此同时IL-6的表达上调有可能引起胆囊上皮细胞的过度增殖，这三者存在一定相关性[9]。不同种族背景的人群中对T1DM患者IL-6 174 GG 基因型频率进行分析可见明显升高趋势以及CC 基因型的明显减低，另也有研究结果支持糖尿病发生危险性与IL-6 基因-174 G/C 多态性没有明显相关[10-11]。

表3 IL-6 174G/C基因多态性等因素与T1DM并慢性胆囊炎的关联分析

本研究结果提示病例组CC基因型比例高而GG基因型比例低，而C等位基因分布较高;此外，多因素Logistics回归分析提示携带IL-6 -174 C等位基因、高血压、肥胖/超重以及饮酒史为潜在危险因素，OR值分别为1.258,1.225,1.167和1.111。进一步证明IL-6 -174C/G基因多态性与慢性胆囊炎并发1型糖尿病患者的易感性存在联系，且C等位基因是潜在危险因素，同时也提示血压异常、肥胖以及饮酒等环境因素也对T1DM并发慢性胆囊炎的发病也是促发因素，这与其他研究一致[12]。

综上，IL-6 174C/G基因多态性与T1DM并发慢性胆囊炎患者的易感性确实存在着一定的关联，且受到一些环境因素的影响。

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10.15972/j.cnki.43-1509/r.2017.04.016

2016-09-26；

2017-05-02

*通讯作者，E-mail:shangree@126.com.

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