高效液相色谱法测定洛伐他汀胶囊的含量

李月明

摘 要：本文采用高校液相测定了洛伐他汀胶囊中洛伐他汀的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），甲醇-10mmol/L甲酸铵-0.2%甲酸水溶液（70：30）为流动相，检测波长为238nm，流速1.0mL·min-1，柱温：30℃。洛伐他汀在30～110μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。洛伐他汀的平均回收率为99.3%，RSD为0.81%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于洛伐他汀胶囊中洛伐他汀的含量测定。

关键词：洛伐他汀胶囊；洛伐他汀；含量

洛伐他汀胶囊在体内竞争性地抑制胆固醇合成过程中的限速酶羟甲戊二酰辅酶A还原酶，使胆固醇的合成减少，也使低密度脂蛋白受体合成增加，结果使血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平降低，适用于高脂血症，高胆固醇血症等症状。洛伐他汀胶囊还可降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。洛伐他汀胶囊最常见的不良反应为胃肠道不适、腹泻、胀气等。本文采用高校液相测定了洛伐他汀胶囊中洛伐他汀的含量。

1 仪器与试药

Dura 12/24超纯水系统（上海和泰仪器有限公司）；CLEAN PH200便携式酸碱度测试仪（西安优普仪器设备有限公司）；SPECORD250 PLUS紫外可见分光光度计（德国耶拿分析仪器股份公司）；实验室玻璃器皿自动洗瓶机（西安优普仪器设备有限公司）；PTX-FA110万分之一天平（上海鑫仓电子科技有限公司）；KQ250DE超声波清洗器超声波检测仪器（烟台鑫康商贸有限公司）；LDW-S实验室污水处理机（上海路岛分析仪器有限公司）；LC3000高效液相色谱仪（山东滕州市滕海分析仪器有限公司）。洛伐他汀对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（山东浩中化工科技有限公司）、三乙胺（山东浩中化工科技有限公司）、磷酸（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、甲醇（山东浩中化工科技有限公司）、甲酸铵（山东浩中化工科技有限公司）、甲酸（山东浩中化工科技有限公司）、冰醋酸（山东浩中化工科技有限公司）、磷酸氢二钠（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、三乙胺（山东浩中化工科技有限公司）、氢氧化钠（山东浩中化工科技有限公司）。

2 含量测定

2.1 色谱条件。依据查阅文献及考查的结果 ，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；甲醇-10mmol/L甲酸铵-0.2%甲酸水溶液（70：30）为流动相；检测波长为238nm。理论板数按洛伐他汀峰计算应不得低于2000。

2.2 供试品溶液的制备。取洛伐他汀胶囊内容物，精密称取，加甲醇超声处理5分钟，放冷，滤过，滤液置25ml量瓶中，用流动相分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 对照品溶液的制备。精密称取洛伐他汀对照品约5mg，用甲醇溶解并稀释成每1ml中含50？滋g的溶液，作为对照溶液。

2.4 阴性溶液的制备。依照处方取除洛伐他汀的原辅料，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在洛伐他汀出峰处阴性液无色譜峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

2.5 准曲线的制备。制备浓度为30、40、50、60、70、80、90、100、110μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，洛伐他汀对照品在30～110μg·mL-1范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验。依照2.3项下制备对照品溶液，精密吸取洛伐他汀对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.79%。结果表明，本实验精密度良好。

2.7 重现性试验。称取同一批的洛伐他汀胶囊样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.73%，结果表明此方法的重现性良好。

2.8 稳定性试验。依照2.2项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品洛伐他汀峰面积积分值的RSD为0.81%。结果表明洛伐他汀至少在4小时内稳定。

2.9 回收率试验。采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的洛伐他汀对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.81%。

2.10 样品含量测定。依照上述含量测定方法，测定洛伐他汀胶囊三批样品中洛伐他汀的含量，含量为标示量的99.1%、99.3%、100.5%。

3 讨论

分别考察甲醇-10mmol/L甲酸铵-0.2%甲酸水溶液（70：30），甲醇-10mmol/L甲酸铵-0.2%甲酸水溶液（60：40），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（10：20：70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（10：10：80），0.1%磷酸液（用氢氧化钠调pH4.0）-乙腈（40：60），甲醇-10mmol/L甲酸铵-0.2%甲酸水溶液（55：45），甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至7.0）（75∶25），甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至6.0）（70∶30）不同比例的流动相，结果以甲醇-10mmol/L甲酸铵-0.2%甲酸水溶液（70：30）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-10mmol/L甲酸铵-0.2%甲酸水溶液（70：30）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于洛伐他汀胶囊中洛伐他汀的含量测定。洛伐他汀胶囊中洛伐他汀的含量应为标示量的95-105%。

参考文献

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