CPS定量分析在确定原发性肝癌安全边界中的应用及与肿瘤血管生成的相关性研究

庞玉花 马晓明 王金环

·论著·

CPS定量分析在确定原发性肝癌安全边界中的应用及与肿瘤血管生成的相关性研究

庞玉花 马晓明 王金环

目的探讨CPS定量分析在确定原发性肝癌安全边界中的应用及其与肿瘤血管生成的相关性。方法选取2015年9月至2016年9月原发性肝癌患者40例为研究对象，通过超声造影检查患者的病灶及病灶周围背景肝组织、肿瘤中心与不同距离癌周组织的CPS定量参数，采用免疫组织化学染色检测患者的病灶及病灶周围背景肝组织、肿瘤中心与不同距离癌周组织的MVD，采用Pearson法分析其相关性。结果患者病灶的AT、TTP均小于病灶周围背景肝组织，差异有统计学意义(Plt;0.05)；病灶与病灶周围背景肝组织的PI比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)。病灶的MVD为(54.76±22.29)，病灶周围背景肝组织的MVD为(12.51±8.39)，两者比较差异有统计学意义(Plt;0.05)。病灶的TTP与MVD呈负相关性(r=-0.631，P=0.000)；病灶的AT、PI与MVD无线性相关性(Pgt;0.05)。随着癌周组织距离的增加，AT逐渐增加，肿瘤中心的AT与癌周2.5 cm、癌周3.5 cm，癌周1.0 cm与癌周3.5 cm比较，差异有统计学意义(Plt;0.05)；随着癌周组织距离的增加，TTP逐渐增加，肿瘤中心的TTP与癌周3.5 cm比较，差异有统计学意义(Plt;0.05)；随着癌周组织距离的增加，PI逐渐降低，肿瘤中心的PI与癌周1.0 cm、癌周2.5 cm、癌周3.5 cm比较，差异均有统计学意义(Plt;0.05)。肿瘤中心的TTP、PI与MVD呈正相关性(Plt;0.05)；癌周1.0 cm 的PI与MVD呈正相关性(Plt;0.05)。结论原发性肝癌患者的CPS定量参数中TTP、PI与MVD具有相关性，其为患者血供状况的评估提供一定参考价值。

CPS定量分析；原发性肝癌；微血管

目前，国内外对于原发性肝癌的治疗方案以手术切除为主，但其手术切除范围存在争议，肿瘤的切除方案及其范围严重影响患者的预后[1]。随着科技水平的发展，超声造影技术可用于评价组织灌注情况[2]。原发性肝癌的发生、发展及预后均与肿瘤血管生成密切相关[3]。超声造影(CPS)定量分析能够准确显示病灶血管的血流分布情况，定量反映肿瘤及周围组织的血流状态[4]。本研究选取40例原发性肝癌患者为研究对象，通过检测患者病灶的CPS定量参数和肿瘤微血管密度(microvessel density，MVD),分析其相关性，探讨CPS 定量分析在评估原发性肝癌患者安全边界的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年9月至2016年9月收入青海省第四人民医院的原发性肝癌患者40例为研究对象，其中男27例，女13例；年龄25～ 75岁，平均年龄(50.58±2.14)岁；胆管细胞癌2例，混合型肝4癌例，肝细胞肝癌34例。纳入标准：所有患者病理确诊为原发性肝癌[5]。排除标准：(1)超声造影检查禁忌者；(2)病灶位于皮下8.0 cm以上。本研究获医院伦理委员会批准，所有患者自愿签署知情同意书。

1.2 检查方法

1.2.1 超声造影检查:采用彩色多普勒超声诊断仪Acuson Sequoia 512型(德国西门子公司)，配备对比脉冲序列造影成像(CPS)技术，探头频率为2～5 MHz，造影剂选用SonoVue(美国Braeeo公司)，首先患者行彩色多普勒检查，观察病灶位置、大小及回声特点，随后经肘部静脉团注1.5 ml造影剂混合液及5 ml 0.9%氯化钠溶液，机械指数(MI)为0.09～0.19，行超声造影检查，动态造影图像存储于Tometice工作站，运用自定量分析(ACQ)软件，计算病灶的造影剂到达时间(AT)、达峰时间(TTP)、峰值强度(PI)，并对病杜及病灶周围背景肝组织、肿瘤中心与癌周1.0 cm、2.5 cm、3.5 cm区域进行测定。

1.2.2 MVD测定:患者术后病理标本切片，行免疫组织化学染色，根据Weider血管计数法[6]，在100 倍光镜下扫查整个切片，确定 3 个血管高密度区，随后在 400 倍光镜下计数染色阳性血管数，染成棕黄色、单个或数个内皮细胞均作为 1 个微血管计数，取3次平均值为该切片的 MVD值。

2 结果

2.1 病灶及病灶周围背景肝组织的CPS定量分析 患者病灶的AT、TTP均小于病灶周围背景肝组织，差异具有统计学意义(Plt;0.05)；病灶与病灶周围背景肝组织的PI比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)。见表1。

表1 病灶及病灶周围背景肝组织的CPS定量分析结果

2.2 病灶及病灶周围背景肝组织的MVD比较 病灶的MVD为(54.76±22.29)，病灶周围背景肝组织的MVD为(12.51±8.39)，两者比较差异有统计学意义(Plt;0.05)。

2.3 病灶CPS定量参数与MVD相关性 病灶的TTP与MVD呈负相关性(r=-0.631，P=0.000)，病灶的AT、PI与MVD无线性相关性(Pgt;0.05)。见表2。

表2 病灶CPS定量参数与MVD相关性

2.4 肿瘤中心与不同距离癌周组织的CPS定量分析 随着癌周组织距离的增加，AT逐渐增加，肿瘤中心的AT与癌周2.5 cm、癌周3.5 cm，癌周1.0 cm与癌周3.5 cm比较，差异有统计学意义(Plt;0.05)；随着癌周组织距离的增加，TTP逐渐增加，肿瘤中心的TTP与癌周3.5 cm比较，差异具有统计学意义(Plt;0.05)；随着癌周组织距离的增加，PI逐渐降低，肿瘤中心的PI与癌周1.0 cm、癌周2.5 cm、癌周3.5 cm比较，差异均有统计学意义(Plt;0.05)。见表3。

表3 肿瘤中心与不同距离癌周组织的CPS定量分析结果

注：与肿瘤中心比较，*Plt;0.05；与癌周1.0 cm比较，#Plt;0.05

2.5 肿瘤中心与不同距离癌周组织的CPS定量参数与MVD相关性 肿瘤中心的TTP、PI与MVD呈正相关(Plt;0.05)，癌周1.0 cm 的PI与MVD呈正相关(Plt;0.05)。见表4。

3 讨论

原发性肝癌的发生、发展和新生血管密切相关，其为肝癌细胞的增殖提供大量的氧气和营养物质[7]。因此，观察原发性肝癌患者的血供状态有助于患者的诊断、治疗和预后。目前，关于肝癌的治疗研究显著，但其主要的治疗手段仍是外科手术[8]。外科手术治疗对肝癌的根治具有良好的预后，但手术切除的范围存在争议[9]。临床采用免疫组化技术检测肿瘤内的MVD，从而反映肿瘤内血管生成形态[10]。但是由于MVD检测需要组织活检，使患者产生创伤，且活检组织量会造成假阴性或假阳性结果增加，另外活检不能快速及时得到诊断结果[11,12]。因此，我们需要一种快速有有效的评估方式。超声造影检查的优势有无创、结果及时，可重复操作，其已成为诊断原发性肝癌的主要方式[13]。

表4 肿瘤中心与不同距离癌周组织的CPS定量参数与MVD相关性结果

本研究结果显示，患者病灶的AT、TTP均小于病灶周围背景肝组织，差异有统计学意义(Plt;0.05)；病灶的PI高于病灶周围背景肝组织，但差异无统计学意义(Pgt;0.05)。推测由于原发性肝癌患者的病灶组织内微血管数目多于周围背景肝组织，因此在单位时间内病灶组织内的造影剂较多，肿瘤增强速率较快，最终使达AT、TTP较短。本研究发现患者病灶的MVD为(54.76±22.29)，病灶周围背景肝组织的MVD为(12.51±8.39)，两者比较差异有统计学意义(Plt;0.05)。推测由于本研究中原发性肝癌患者多伴有肝硬化或肝炎，由于病灶周围背景肝组织异常，导致肝细胞血液供应异常，引起病灶局部缺血、缺氧，从而刺激新生管的生成[14]。本研究结果显示，患者病灶的TTP与MVD呈负相关性(r=-0.631，P=0.000)；病灶的AT、PI与MVD无线性相关性(Pgt;0.05)。这结果验证以上猜测。表明AT、TTP能够一定程度上间接反映患者的的MVD。因此，其可用于评估患者的血供状态。

本研究结果显示，随着癌周组织距离的增加，AT逐渐增加，肿瘤中心的AT与癌周2.5 cm、癌周3.5 cm，癌周1.0 cm与癌周3.5 cm比较，差异具有统计学意义(Plt;0.05)；随着癌周组织距离的增加，TTP逐渐增加，肿瘤中心的TTP与癌周3.5 cm比较，差异有统计学意义(Plt;0.05)；随着癌周组织距离的增加，PI逐渐降低，肿瘤中心的PI与癌周1.0 cm、癌周2.5 cm、癌周3.5 cm比较，差异均有统计学意义(Plt;0.05)。推测随着原发性肝癌患者癌周组织距离的增加，且组织内微血管数目较多，因此肿瘤增强速率较慢，最终使达AT、TTP较长。肿瘤中心的TTP、PI与MVD呈正相关性(Plt;0.05)；癌周1.0 cm 的PI与MVD呈正相关性(Plt;0.05)。这结果验证以上猜测。表明超声造影与组织活检具有较好的相关性，可以作为临床参考依据。PI仅在癌周1.0 cm与MVD呈正相关性，推测可能和肿瘤位置、超声造影深度有关[15]。

综上所述，原发性肝癌患者的CPS定量参数中TTP、PI与MVD具有相关性，其为患者血供状况的评估提供一定参考价值,从而能够确认患者的肝癌安全边界。但由于本研究的样本数较少，未能完全排除其他因素，仍需大量病例数目，多种研究方法证实。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2017.24.036

810000 西宁市，青海省第四人民医院超声电生理科(庞玉花、王金环)；青海省湟中县第一人民医院普外科(马晓明)

R 735.7

A

1002-7386(2017)24-3799-03

2017-06-05)