当归补血汤与四物汤对血虚模型小鼠补血作用比较研究

金情政 汤 玮

·论 著·

当归补血汤与四物汤对血虚模型小鼠补血作用比较研究

金情政 汤 玮

目的 观察当归补血汤与四物汤对血虚模型小鼠补血作用以及两个方剂的差异性。方法ICR小鼠40只，随机分成正常组、模型组、当归补血汤组和四物汤组，每组10只，除正常组外，另三组复制失血性血虚小鼠模型，当归补血汤组和四物汤组同时分别灌胃当归补血汤和四物汤，连续给药7天，观察小鼠体征特点，测定各组小鼠给药前及造模给药后血红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、血小板计数（PLT）和白细胞（WBC）的值以及第7天出血凝血时间变化。结果 给药7天，当归补血汤组小鼠食欲、行为和毛色等体征特点改善直至完全恢复，四物汤组小鼠体征特点改善不明显。与正常组比较，模型组小鼠各指标均降低[RBC：（6.65±0.87）×1012/L比（9.90±0.95）×1012/L（P＜0.01），HGB：（108.6±11.69）g/L 比（134.4±13.55）g/L（P＜0.01），HCT：（44.37±4.72）%比（52.01±4.98）%（P＜0.01），PLT：（983±7.81）×109/L 比（1218±10.27）×109/L（P＜0.01），WBC：（6.20±0.22）×109/L 比（7.80±0.05）×109/L（P＜0.01）]；与模型组比较，当归补血汤组与四物汤组小鼠各指标均升高[当归补血汤组：RBC（9.31±0.89）×1012/L，HGB：（136.1±11.88）g/L，HCT（53.10±5.24）%，PLT（1005±10.43）×109/L，WBC（8.26±0.31）×109/L，P＜0.05，P＜0.01；四物汤组：RBC[（9.68±0.99）×1012/L，HGB（132.4±14.62）g/L，HCT（53.18±5.89）%，PLT[（1097±6.97）×109/L，WBC（7.63±0.05）×109/L，P＜0.05，P＜0.01]。结论 当归补血汤和四物汤均有较好的补血作用，但两方对模型小鼠的血虚体征特点影响不同。

小鼠；血虚模型；当归补血汤；四物汤；补血作用

急性出血是临床常见症状，患者急性大量出血很可能导致血虚等并发症，血虚证是中医常见证，补气生血系列药物是临床治疗血虚证的重要工具。当归补血汤出自李东垣《内外伤辨惑论》[1]，用于治血虚发热证，以及各种贫血、过敏性紫癜等属血虚气弱者；四物汤出自唐蔺道人《仙授理伤续断秘方》[2]，是中医临床补血调经的常用经典方剂。研究[3-5]报道当归补血汤与四物汤均有补血作用。本实验基于四物汤复方多成分、整体调节作用的特性，当归补血汤多环节改善动物造血功能，建立失血性血虚动物模型，通过比较两种方剂在急性补血方面的作用，从微观和宏观的角度上比较这两个方剂对急性出血的不同影响，以期为临床合理用药提供依据。

1 实验材料

1.1 实验动物 ICR小鼠40只，雌雄各半，体质量18～22g，由浙江省医学科学院实验动物中心提供，合格证：SCXK（浙）2014-0001号。

1.2 实验药物及试剂 当归补血汤组分药材购自衢州南孔中药有限公司，黄芪30g，当归6g，按传统方法煎制而成；四物汤组分药材购自衢州南孔中药有限公司，熟地12g，当归、白芍各9g，川芎6g，按传统方法煎制而成；每毫升含1g生药。生理盐水；凝血酶（华兰生物制药厂，批号16020025）。

1.3 实验仪器 LH-780型全自动血细胞分析仪（美国Beckman公司）；电子秤（上海民桥精密科学仪器有限公司）。

2 实验方法

2.1 分组及给药 小鼠适应性喂养1周后，40只小鼠随机分成正常组、模型组、当归补血汤组和四物汤组，每组10只。造模前各组小鼠眼眶采血，测定正常血象值。除正常组，另三组小鼠眼眶后静脉丛放血0.5mL，造成急性失血性血虚模型[6]。从造模当天起，各给药组灌胃给予相应药物，当归补血汤组和四物汤组均分别灌胃相应药物0.4mL。正常组和模型组给予等量生理盐水，连续给药7天。

2.2 观察指标 每日分别记录每组小鼠的体征特点；测定造模后第 1、3、7 天血液中红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、血小板计数（PLT）和白细胞（WBC）的值（采血后制成抗凝全血样本置血细胞分析仪测定）；测定造模后第7天的凝血时间（小鼠剪尾玻管法测定）。

2.3 统计学方法 应用SPSS15.0统计软件对试验数据进行统计分析，实验数据均以（±s） 表示，多组间计量资料采用单因素方差分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

3 实验结果

3.1 各组小鼠体征变化 造模后，模型组小鼠食欲下降、行动缓慢、团缩嗜睡、毛蓬竖而少光泽，尾苍白而凉。四物汤组小鼠也表现为少食、懒动、嗜睡症状；当归补血汤组小鼠从第4天开始，上述症状有所改善，从第6天开始，食欲恢复正常，行为状态恢复，毛色恢复正常，与正常小鼠差别不明显。

3.2 各组小鼠血RBC比较 给药前各组小鼠血RBC无明显差异。给药后第3天，与模型组比较，当归补血汤组、四物汤组小鼠血RBC均显著升高（P＜0.01），见表 1。

3.3 各组小鼠血HGB比较 给药前，各组小鼠血HGB无明显差异；给药后第3天，与模型组比较，当归补血组、四物汤组小鼠血HGB均显著升高（P＜0.01）；给药后第7天，与模型组比较，当归补血汤组、四物汤组小鼠血 HGB 显著升高（P＜0.05，P＜0.01），见表2。

3.4 各组小鼠血HCT比较 给药前，各组小鼠血HCT无明显差异；在给药后第7天，与模型组比较，当归补血汤组、四物汤组小鼠血HCT显著升高（P＜0.05），见表 3。

表1 各组小鼠血液RBC比较（1012/L，±s）

表1 各组小鼠血液RBC比较（1012/L，±s）

注：与正常组比较，△P＜0.01；与模型组比较，**P＜0.01；RBC：红细胞

组别正常组模型组当归补血汤组四物汤组只数10 10 10 10剂量--1.0g/mL 1.0g/mL给药前9.80±0.65 9.70±0.54 9.74±0.58 9.76±0.55第1d 9.71±0.75 4.71±0.65 4.73±0.48 4.80±0.62第3d 9.93±0.85 5.96±0.91△8.01±0.86**8.41±0.53**第7d 9.90±0.95 6.65±0.87△9.31±0.89**9.68±0.99**

表2 各组小鼠血液HGB比较（g/L，±s）

表2 各组小鼠血液HGB比较（g/L，±s）

注：与正常组比较，△P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；HGB：血红蛋白

组别正常组模型组当归补血汤组四物汤组只数10 10 10 10剂量--1.0g/mL 1.0g/mL给药前135.8±12.75 130.7±11.36 140.2±13.17 131.7±11.84第1d 136.4±13.34 61.71±4.23 63.03±5.96 63.90±5.39第3d 132.8±12.78 66.43±5.29△89.52±7.86**98.54±10.14**第7d 134.4±13.55 108.6±11.69△136.1±11.88**132.4±14.62*

表3 各组小鼠血液HCT比较（%，±s）

表3 各组小鼠血液HCT比较（%，±s）

注：与正常组比较，△P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05；HCT：红细胞压积

组别正常组模型组当归补血汤组四物汤组只数10 10 10 10剂量--1.0g/mL 1.0g/mL给药前50.32±4.87 51.61±5.07 49.04±4.33 50.64±5.55第1d 50.89±5.36 35.10±4.02 35.39±2.76 36.32±3.22第3d 51.67±5.49 39.84±3.85△43.52±3.91 44.37±4.64第7d 52.01±4.98 44.37±4.72△53.10±5.24*53.18±5.89*

表4 各组小鼠血液PLT比较（109/L，±s）

表4 各组小鼠血液PLT比较（109/L，±s）

注：与正常组比较，△P＜0.01；与模型组比较，**P＜0.01；与当归补血汤组比较，▲P＜0.01；PLT：血小板计数

组别正常组模型组当归补血汤组四物汤组只数10 10 10 10剂量--1.0g/mL 1.0g/mL给药前1200.0±6.05 1185.4±5.43 1192.1±4.94 1188.6±6.13第1d 1210.1±6.84 532.6±5.21 574.5±5.84 579.3±6.33第3d 1205.5±7.89 634.9±8.10△750.9±8.34**939.0±10.15**▲第7d 1218.4±10.27 983.4±7.81△△1005.2±10.43**1097.1±6.97**▲

表5 各组小鼠血液WBC比较（109/L，±s）

表5 各组小鼠血液WBC比较（109/L，±s）

注：与正常组比较，△P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与当归补血汤组比较，▲P＜0.01；WBC：白细胞

组别正常组模型组当归补血汤组四物汤组只数10 10 10 10剂量--1.0g/mL 1.0g/mL给药前7.52±0.09 7.38±0.12 7.36±0.14 7.48±0.13第1d 7.41±0.16 4.82±0.07 4.92±0.13 5.00±0.14第3d 7.38±0.14 5.20±0.11△5.66±0.31*6.59±0.14**▲第7d 7.80±0.05 6.20±0.22△8.26±0.31**7.63±0.05**▲

3.5 各组小鼠血PLT比较 给药前各组小鼠血PLT无明显差异；在给药后第3、7天，与模型组比较，当归补血汤组、四物汤组小鼠血PLT均显著升高（P＜0.01），见表 4。

3.6 各组小鼠血WBC比较 给药前各组小鼠血液中WBC无明显差异；给药后第3天，与模型组比较，当归补血汤组、四物汤组小鼠血WBC均显著升高（P＜0.05，P＜0.01）；在给药后第 7 天，与模型组比较，当归补血汤组、四物汤组小鼠血WBC均显著升高（P＜0.01），见表 5。

3.7 各组小鼠凝血时间比较 给药第7天，与模型组比较，当归补血汤组小鼠血凝血时间显著降低（P＜0.01）；与当归补血汤组比较，四物汤组小鼠止血凝血时间显著升高（P＜0.01），见表 6。

4 讨论

血是构成人体和维持人体生命活动最基本的物质之一，血液有运载作用，最主要是运载气，当血液大量流失后，与之相关的气也会受损，气与血是两者不可或缺的，只有气血两足，人才能精力充沛、神志清晰、思维敏捷、情志活动正常。本实验中小鼠大量出血，出现懒动、食欲减少、嗜睡的现象都说明了血虚会造成气虚。

表6 各组小鼠凝血时间比较（min，±s）

表6 各组小鼠凝血时间比较（min，±s）

注：与模型组比较，**P＜0.01；与当归补血汤组比较，▲P＜0.01

组别模型组当归补血汤组四物汤组只数10 10 10剂量-1.0g/mL 1.0g/mL凝血时间5.8±0.4 3.5±0.7**6.8±0.9▲

本实验研究表明，造模给药3天后，与血虚模型组小鼠比较，当归补血汤组和四物汤组小鼠血液中的RBC、HGB、PLT和WBC各项指标均有显著性上升；但从小鼠的体征变化看，当归补血汤组小鼠比四物汤组小鼠略为活跃，食量也较好。造模给药7天后，与模型小鼠比较，当归补血汤1.0g/mL剂量组和四物汤1.0g/mL剂量组小鼠血液中的RBC、HGB、HCT、PLT和WBC各项指标均有显著性变化；但从小鼠的体征变化来看，当归补血汤组小鼠行为活跃，食量增加，毛色有光泽，而四物汤组小鼠行为还是略微迟缓，少食，嗜睡。在给药第3天，与当归补血汤组比较，四物汤组小鼠血液中的PLT和WBC水平均有显著性上升（P＜0.01）；在第7天，与当归补血汤组比较，四物汤组小鼠血液中的PLT水平有显著性上升（P＜0.01），WBC 水平有显著性下降（P＜0.01），但与模型组比较，当归补血汤组和四物汤组小鼠血液中WBC水平均有显著性上升。说明四物汤组小鼠血液各项指标很快上升，但是有少食、懒动、嗜睡的现象，提示四物汤只是在短时间促进造血功能，使指标上升，起到治标的作用，这与四物汤中的阿魏酸、当归多糖、地黄多糖等可明显提高血清中集落刺激因子等造血因子，刺激造血干细胞增殖、分化[7]，促进造血组织造血功能的恢复，重在补血活血[4]有关。当归补血汤组小鼠，给药3天后懒动、少食、嗜睡症状有所改善，给药6天后上述气虚症状基本消失，恢复正常，而且血液中各项指标恢复，提示该方重在补气，气盛而能生血，当归补血汤重用黄芪（5份）大补脾肺之气，以资气血生化之源，为君药，配伍当归（1份）补血和营，为臣药。陈耀辉等[8]研究提示该方能加快血虚动物骨髓有核细胞DNA的合成，增加骨髓有核细胞数量，刺激骨髓造血祖细胞集落的形成，加快血细胞的分化与成熟，促进血虚小鼠外周血细胞数量恢复正常，达到补气生血的功效，能更好的从根本上解决缺血问题。

凝血实验结果表明当小鼠体内血液急剧减少后，会造成血液中各项指标降低，出现气血不足的现象，给予四物汤和当归补血汤一段时间，与模型组比较，四物汤组与当归补血汤组小鼠血液中的PLT均显著升高，四物汤组较当归补血汤组升得更高些。但考虑到中药复方发挥疗效是多成分、多靶点共同作用的结果，郑传柱等[9]文献研究显示，四物汤具有改善血液流变性、延长凝血时间、抑制血小板聚集等活血作用，从而使凝血时间延长，对于急性出血患者很难固本。给予当归补血汤一段时间，血液中各项指标上升，而凝血时间缩短，对于急性出血的患者有很好的疗效。《脾胃论》中说:“血不自生，须得生阳气之药，血自旺矣。”《温病条辩》中说:“血虚者，补其气而血自生。”因此，血虚者补血时，应加入补气之品，以助生化，或者重补气以生血；如因大失血而致血虚者，尤以补气以顾脱，使气旺则血生[10]。中医说急则治标，缓则治本，有形之血生于无形之气，当归补血汤中重用黄芪既是治标也是治本。

本研究结果表明，四物汤与当归补血汤均具有补血的功效。单从功效看，四物汤重在补血活血，当归补血汤重在补气生血。根据中医“有形之血不能速生，无形之气所当急固”的理论，在急性缺血的情况下，中医理论指导重在补气，达到气生血，从根本上解决缺血问题，所以当归补血汤对急性失血的补血效果会更好，凝血时间亦会更短。

［1］金·李杲.内外伤辨惑论［M］.北京：中国医药科技出版社，2011：27.

［2］唐·蔺道人.仙授理伤续断秘方［M］.北京：人民卫生出版社，2006：7.

［3］金若敏，宁炼，陈长勋，等.血虚模型动物制备及当归补血汤的作用研究［J］.中成药，2001，23（4）：268-271.

［4］唐昆,吴希.四物汤的现代药理作用和临床应用［J］.中国中医急症，2006，15（12）：1397-1399.

［5］贾梅，郑传柱，张丽，等.胶艾汤与四物汤对血虚模型大鼠补血功效的比较研究［J］.中草药，2015，46（11）：1640-1644.

［6］黄丽萍，吴素芬，周俊，等.当归补血汤对三种血虚模型小鼠作用比较［J］.中药药理与临床，2011，27（5）：5-8.

［7］刘艳，李毅.浅论血虚证从“心生血”论治［J］.辽宁中医杂志，2010，37（2）：262.

［8］陈耀辉，黄丽萍，吴素芬，等.当归补血汤与人参当归方、灵芝阿胶方的补气生血作用比较［J］.中药药理与临床，2015，31（1）：22-25.

［9］郑传柱，贾梅，张丽，等.胶艾汤与四物汤对血瘀模型大鼠活血功效的比较研究［J］.中草药，2014，45（18）：2652-2657.

［10］郑中甲.方剂学［M］.北京：中国中医药出版社，2005：163.

Comparison of Blood Tonic Effect of Angelicae Sinensis Decoction and Siwu Decoction in Blood Deficiency Model Mice

JIN Qingzheng,TANG Wei
Zhejiang Quhua Hospital,Quzhou(324004),China

Objective To study the effect of Angelicae Sinensis Decoction and Siwu Decoction on blood deficiency model mice and the difference of two prescriptions.Methods Forty ICR mice were randomized into blank,model,Angelicae Sinensis Decoction,and Siwu Decoction groups,with 10 mice in each group.Hemorrhagic blood deficiency models were established in other 3 groups except for blank group.The treatment groups were fed with the corresponding drugs for consecutive 7 days.Physical signs were daily observed;the value of red blood cell（RBC）,hemoglobin（HGB）,hematocrit（HCT）,platelet（PLT）,white blood cell（WBC）were measured before and on day 1,3 and 7 after treatment;the blood coagulation time was determined on day 7.Results On day 7 after treatment,the appetite,the behavior,and the appearance of mice in Angelicae Sinensis Decoction group was greatly improved to the normal level,but such improvement was not noted in Siwu Decoction group.Compared with blank group,the RBC,HGB,HCT,PLT,and WBC levels of mice in model group were significantly lower respectively[RBC:（6.65±0.87）×1012/L vs（9.90±0.95）×1012/L;HGB:（108.6±11.69）g/L vs（134.4±13.55）g/L;HCT:（44.37±4.72）%vs（52.01±4.98）%;PLT:（983±7.81）×109L vs（1218±10.27）×109/L;WBC:（6.20±0.22）×109L vs（7.80±0.05）×109/L;all P＜0.01],but the reduction was reversed in both Angelicae Sinensis Decoction[RBC:（9.31±0.89）×1012/L;HGB:（136.1±11.88）g/L;HCT:（53.10±5.24）%;PLT:（1005±10.43）×109L;WBC:（8.26±0.31）×109L]and Siwu Decoction groups[RBC:（9.68±0.99）×1012/L;HGB:（132.4±14.62）g/L;HCT:（53.18±5.89）%;PLT:（1097±6.97）×109L;WBC:（7.63±0.05）×109L],with P＜0.05 or P＜0.01.Conclusion Angelicae Sinensis Decoction and Siwu Decoction have goodblood enriching effect,but the two kinds of prescriptions have different effects on the characteristics of blood deficiency signs in model mice.

mice;blood deficiency model;angelicae sinensis decoction;siwu decoction;blood enriching effect

浙江衢化医院药剂科（衢州 324004）

金情政，E-mail：jinqingzheng111@126.com

（收稿：2017-04-12 修回：2017-06-21）