中华绒螯蟹水瘪子病不同发病阶段的病理变化特点

陆宏达 田全全 贾相相 张小俊 任芳芳

(上海海洋大学水产动物遗传育种中心, 上海市协同创新中心, 上海海洋大学国家水生动物病原库, 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心, 上海 201306)

中华绒螯蟹水瘪子病不同发病阶段的病理变化特点

陆宏达 田全全 贾相相 张小俊 任芳芳

(上海海洋大学水产动物遗传育种中心, 上海市协同创新中心, 上海海洋大学国家水生动物病原库, 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心, 上海 201306)

为了解中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)“水瘪子”病发生发展的过程, 揭示疾病的本质, 对病蟹进行了较全面的病理特点分析研究。根据病蟹肝胰腺颜色, 将病蟹划分为浅黄、浅粉、乳白和灰白4个发病阶段。研究结果表明, 随着病情的发展, 病蟹肝胰腺与蟹重比逐渐减少, 腔液与蟹重比逐渐增加, 肝胰腺管直径逐渐缩小,各发病阶段病蟹的这些指标都与健康蟹有极显著差异(P＜0.01), 病蟹肝胰腺与蟹重比除乳白阶段与灰白阶段之间和腔液与蟹重比除浅粉阶段与乳白阶段和乳白阶段与灰白阶段之间以及肝胰腺管直径除乳白阶段与灰白阶段之间的差异均不显著(P＞0.05)和浅粉阶段与乳白阶段之间的差异显著(P＜0.05)外, 其他各发病阶段之间这些指标均有极显著差异(P＜0.01); 4个发病阶段病蟹6种组织器官中肝胰腺、鳃、肌肉组织和心脏组织病理变化具有相似性, 浅黄阶段主要是以组织器官水肿和萎缩为主, 是一种可逆的组织病理过程, 但在浅粉阶段肝胰腺和肌肉组织出现细胞坏死, 以后发病阶段更为严重, 鳃和心脏组织在乳白阶段出现细胞坏死, 坏死是一种不可逆的组织病理过程, 神经团和肠道组织病理变化不明显。根据不同发病阶段的病理特点, 在未来确定病因后通过消除病因等方法, 只有在病理变化处于可逆状态的浅黄阶段, 病蟹才有恢复的可能, 才有防控和挽救价值, 而浅粉阶段以后的病蟹由于主要器官组织细胞崩解坏死处于不可逆的病理过程, 即使病因消除病蟹已不可能恢复, 这样的病蟹应及时清除, 减少继续养殖造成进一步的经济损失。

中华绒螯蟹; 水瘪子病; 病理变化; 组织病理变化

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)俗称河蟹、大闸蟹, 因其味道鲜美, 深受广大消费者的喜爱, 河蟹人工繁殖育苗成功后20个世纪90年代初解决了苗种供不应求的问题, 使河蟹养殖业得到了迅猛发展,目前已成为我国主要养殖的经济蟹类。2015年, 在江苏省兴化以及周边等河蟹养殖区大范围出现了一种被当地蟹农称为“水瘪子”病的疾病, 主要表现为病蟹肝胰腺颜色发生变化, 从健康时的黄色肝胰腺变浅到进一步发展至乳白和灰白色的改变, 胸腔积液, 肝胰腺和肌肉大量减少而消瘦等症状。尽管该病病程较长, 死亡率较低, 但由于后期几乎空壳无肉, 病蟹失去商品价值和经济价值, 使养蟹户前期的投入血本无归, 造成巨大的经济损失。杨宗英等[1]调查, 2015年是兴化地区“水瘪子”病首次暴发的一年, 兴化市80%以上的塘口出现了“水瘪子”病,大部分塘口发病率达到30%—40%, 有的甚至高达90%—100%, 2016年“水瘪子”病仍然十分严重, 不仅发生在江苏省所有河蟹养殖市县, 而且在湖北省和安徽省等其他省份养蟹区也有较多的出现。什么原因导致河蟹“水瘪子”病的说法不一, 有些人认为病毒、微孢子虫、细菌等生物因素引起, 也有些人认为一些杀虫药物、养殖水质、种质退化和营养等非生物因素引起, 至今为止, 存在较大的争议,病因尚未明确[2]。为了了解“水瘪子”病的病理变化等特点, 根据病蟹肝胰腺颜色变化, 将该病划分为不同发病阶段, 对各发病阶段的河蟹病理变化进行了分析研究, 研究结果对揭示该病的疾病本质、最终查明病因和确定有效的防控方法等方面都有重要意义。

1 材料与方法

1.1 实验蟹

实验用的病蟹于2015年和2016年的6—10月间采自发病严重的江苏省兴化市安丰镇等河蟹养殖区, 在发病蟹池通过放置蟹笼获取病蟹。健康蟹采自上海崇明河蟹养殖场。

1.2 病理变化

疾病症状在发病季节, 通过观察和比较采集的病蟹, 得到病蟹症状的变化规律, 根据打开病蟹背甲后肝胰腺颜色变化的预观察结果, 将病蟹划分为4个发病阶段, 对采集的健康蟹和各发病阶段病蟹分别进行体重和体长测定。

肝胰腺、腔液与蟹重比和肝胰腺管直径的测定为避免打开蟹背甲时在背甲内的血淋巴液(简称腔液)的流失, 打开背甲时蟹腹部向上, 对健康蟹和各发病阶段病蟹背甲内留有的腔液称重, 计算腔液与蟹重比。取出蟹体内全部肝胰腺称重, 计算肝胰腺与蟹重比。用ZEN pro 2012软件在蔡司体视显微镜SteREO Discovery.V12下, 迅速对距离肝胰腺管末端2.5 mm处的肝胰腺管外直径进行随机测定, 其他剩余的肝胰腺作为组织病理分析的材料。

组织病理分别切取健康蟹和不同发病阶段病蟹(各10只)的肝胰腺、肌肉组织(胸部、螯足和步足)、心脏、鳃、肠道和位于胸腔中央靠近胸甲处的神经团, 在Bouin’s液中分别固定, 24h后70%酒精冲洗, 保存待用。各组织器官经酒精梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后组织切片, 切片厚度4—5 μm, 苏木精伊红(HE)染色, 中性树胶封片。神经团组织除用HE染色外, 还用尼氏小体染色法[3]进行染色。用NIS-Elements F 4.0软件在Nikon Eclipse 55i显微镜下观察拍照。

1.3 数据处理

采用SPSS 19.0统计软件, 对各发病阶段病蟹和健康蟹数据进行方差分析和Duncan氏多重比较,P＜0.05为差异显著,P＜0.01为差异极显著,P＞0.05为差异不显著。除有说明外, 健康蟹和各发病阶段病蟹的所有测定数据的样本数n=20, 实验数据均用平均值±标准差(Mean±SD)表示。

2 结果

2.1 疾病症状

作为对照采集的健康蟹体重为(52.49±8.69) g,壳长为(4.65±0.12) cm, 活力高, 摄食能力强, 甲壳坚硬, 肝胰腺饱满呈橘黄色或黄色(图1a)。刚开始发病的病蟹, 其外表无明显的异常, 病蟹不易察觉, 随着病情发展, 蟹甲壳变软, 活力下降, 摄食能力逐渐减弱, 打开病蟹的背甲, 甲壳内的血淋巴液量增多,肝胰腺颜色发生逐渐变淡的变化, 肝胰腺量减少,同样肌肉组织量减少和在其间的血淋巴液量增多,雌蟹和雄蟹的发病率相近。经预观察, 肝胰腺颜色随着病蟹发病程度加深而有规律地变化, 根据肝胰腺颜色的不同将病蟹划分为4个发病阶段(图1b—e), 分别为肝胰腺浅黄色发病阶段(简称浅黄阶段): 肝胰腺浅黄色或浅橘红色, 采集的病蟹体重为(49.32±9.46) g, 壳长为(4.43±0.35) cm; 肝胰腺浅粉红色发病阶段(简称浅粉阶段): 肝胰腺浅粉红色或浅黄色, 采集的病蟹体重为(50.93±7.52) g, 壳长为(4.50±0.23) cm; 肝胰腺乳白色发病阶段(简称乳白阶段): 肝胰腺乳白色、淡黄色或淡粉红色, 采集的病蟹体重为(49.89±8.70) g, 壳长为(4.46±0.29) cm;肝胰腺灰白发病阶段(简称灰白阶段): 肝胰腺浅灰色或灰白色, 采集的病蟹体重为(50.54±8.94) g, 壳长为(4.49±0.23) cm。浅粉阶段至灰白阶段的病蟹,一般肠中无食或只有少量食物, 严重消瘦, 可食部分的肝胰腺和肌肉大量减少, 已失去食用价值, 病蟹离水后容易死亡, 由于血淋巴液量增多病蟹仍然有重量感, 鳃和心脏有明显的水肿现象。

2.2 肝胰腺和腔液与蟹重比以及肝胰腺管大小

如图2所示, 从健康蟹至灰白阶段的病蟹肝胰腺与蟹重比呈逐渐减少的趋势, 依次为0.090±0.007、0.063±0.010、0.040±0.006、0.028±0.007和0.026±0.005, 各发病阶段病蟹的肝胰腺与蟹重比与健康蟹都有极显著差异(P＜0.01), 病蟹除乳白阶段与灰白阶段之间差异不显著(P＞0.05)外, 其他各发病阶段之间均有极显著差异(P＜0.01); 而健康蟹至灰白阶段的病蟹腔液与蟹重比呈逐渐增加的趋势, 依次为0.005±0.004、0.029±0.005、0.060±0.006、0.063±0.010和0.066±0.005, 各发病阶段病蟹的腔液与蟹重比与健康蟹都有极显著差异(P＜0.01), 病蟹除浅粉阶段与乳白阶段和乳白阶段与灰白阶段之间差异不显著(P＞0.05)外, 其他各发病阶段之间均有极显著差异(P＜0.01); 健康蟹至灰白阶段的病蟹肝胰腺管直径呈逐渐缩小的趋势, 分别为(0.402±0.020)、(0.323±0.026)、(0.273±0.021)、(0.266±0.017)和(0.263±0.015) mm, 各发病阶段病蟹的肝胰腺管直径与健康蟹都有极显著差异(P＜0.01), 病蟹除浅粉阶段与乳白阶段之间差异显著(P＜0.05)和乳白阶段与灰白阶段之间差异不显著(P＞0.05)外, 其他各发病阶段之间均有极显著差异(P＜0.01)。

图1 健康蟹和不同发病阶段病蟹的肝胰腺Fig. 1 Hepatopancreas of healthy crab and diseased crabs in the different stages of disease

图2 健康蟹和各发病阶段病蟹肝胰腺和腔液与蟹重比以及肝胰腺管直径比较Fig. 2 Comparisons of the weight ratio of hepatopancreas with crab body, and the weight ratio of haemolymph in the cavity with crab body and the diameter of hepatopancreatic tube between healthy crab and diseased crab

2.3 肝胰腺组织病理

健康蟹肝胰腺由大量紧密排列的肝胰腺管和管间少量的结缔组织构成, 肝胰腺管由基膜和排列于基膜之上的纤维细胞(F细胞)、泡状细胞(B细胞)、吸收细胞(R细胞)和胚细胞(E细胞)4种柱状肝胰腺细胞组成, 基膜中纤维存在, 细胞核圆形或椭圆形, 核仁1—2个(图版Ⅰ-1)。

不同发病阶段肝胰腺组织病理表现为浅黄阶段: 部分肝胰腺管出现不同程度的萎缩现象, 基膜略增厚并呈轻微波浪型的皱缩, 肝胰腺细胞体积略有缩小, 少数细胞与基膜出现轻度分离(图版Ⅰ-2);浅粉阶段: 大部分肝胰腺管萎缩现象进一步加剧,脱离基膜的肝胰腺细胞与基膜间的空隙增大(图版Ⅰ-3), 局部区域肝胰腺管中肝胰腺细胞出现坏死;乳白阶段: 肝胰腺管严重萎缩, 脱离基膜的肝胰腺细胞与基膜间的空隙进一步增大, 并有较多的肝胰腺细胞坏死, 肝胰腺细胞坏死的肝胰腺管明显增多,坏死细胞胞核固缩、胞质崩解(图版Ⅰ-4); 灰白阶段: 病理变化类似于乳白阶段, 但坏死的区域增多,极大多数从基膜脱落的肝胰腺细胞坏死崩解, 固缩核和崩解的细胞质混合在一起, 失去完整的细胞结构, 许多残留的基膜尽管还是管型, 但由于肝胰腺管的严重萎缩和坏死而呈现严重折叠状或卷曲状(图版Ⅰ-5)。不同发病阶段病蟹肝胰腺管内许多肝胰腺细胞细胞核出现核沟, 随着病情的发展, 有核沟的肝胰腺细胞数量增加, 出现核沟的肝胰腺细胞主要是R细胞(图版Ⅰ-6), 另外在肝胰腺管内常发现有细菌的存在。

2.4 肌肉组织病理

健康蟹肌肉组织主要分布在胸部和螯、步足内, 为骨骼肌, 由许多肌束和包裹其周围的结缔组织肌束膜构成, 肌束膜伸入肌内, 将肌分隔为若干肌束, 肌束中肌纤维由许多肌原纤维组成, 横切面的肌原纤维呈点状(图版Ⅱ-1a), 纵切面显示明、暗带交替的横纹, 排列均匀, 细胞核成梭形或椭圆形,位于肌纤维的边缘(图版Ⅱ-1b)。

经观察同一发病阶段病蟹胸部和螯、步足内肌肉组织病理变化相似。不同发病阶段肌肉组织病理表现为浅黄阶段: 部分肌肉肌纤维出现萎缩,肌纤维间和肌束间水肿而间隙增大, 尤其肌束膜与肌束间的分离现象更为明显, 肌纤维细胞核没有出现明显的病变现象(图版Ⅱ-2)。浅粉阶段: 局部区域出现肌纤维横纹模糊不清, 肌纤维出现坏死, 少量肌纤维断裂, 坏死肌纤维浓染, 肌束膜与肌束分离现象更为严重。乳白阶段: 肌纤维坏死崩解, 横切面呈点状的肌原纤维无法分辨, 肌纤维细胞核固缩浓染, 有些区域坏死崩解成无结构的物质(图版Ⅱ-3), 纵切面坏死的肌纤维横纹消失(图版Ⅱ-4、5); 灰白阶段: 几乎所有的肌纤维坏死, 横纹消失,坏死崩解成无结构的物质, 只残留固缩浓染的肌纤维细胞核, 肌纤维坏死而大量减少使肌束膜与肌束间出现严重分离, 间隙进一步增大(图版Ⅱ-6)。

2.5 心脏组织病理

健康蟹的心脏组织结构分为心外膜、心肌层和心内膜三层, 心外膜和心内膜主要由结缔组织构成, 而很厚的心肌层是由结缔组织和大量的心肌纤维构成, 肌纤维为横纹肌, 并有分支, 排列松散, 整齐, 核椭圆形(图版Ⅲ-1)。

不同发病阶段心肌组织病理表现为浅黄阶段:部分心肌纤维出现水肿现象, 间隙增大, 少数肌纤维纤维素样变, 嗜伊红性增强, 强嗜酸性而成深红色, 横纹不清晰(图版Ⅲ-2); 浅粉阶段: 肌纤维之间出现空隙增多, 纤维素样变的肌纤维增多, 肌纤维出现崩解坏死现象。乳白阶段: 肌纤维之间间隙明显增大, 并出现血淋巴细胞浸润现象, 纤维素样变的肌纤维崩解坏死, 坏死肌纤维出现强的嗜伊红性,横纹完全消失(图版Ⅲ-3、4)。灰白阶段: 纤维素样变肌纤维明显增多, 肌纤维崩解坏死区域增大, 部分区域失去心肌组织应有的结构(图版Ⅲ-5), 并出现大量血淋巴细胞的浸润现象。

2.6 鳃组织病理

健康蟹的每条鳃由鳃轴和鳃叶组成, 鳃叶最外面为角质层, 内为紧靠的单层上皮细胞层, 与柱状细胞一起构成鳃腔, 鳃腔内有游离的血细胞(图版Ⅳ-1)。

不同发病阶段鳃组织病理表现为浅黄阶段: 鳃部分区域出现水肿现象, 一种水肿是出现在鳃叶角质层与上皮细胞间, 使角质层与上皮细胞分离(图版Ⅳ-2), 另外一种是鳃叶的鳃腔增大, 使得整个鳃叶变厚, 而鳃上皮细胞萎缩; 浅粉阶段: 水肿现象更为严重, 鳃腔膨大, 有些区域是正常鳃叶厚度的1—2倍, 上皮细胞核有轻度固缩现象, 上皮细胞细胞质淡染(图版Ⅳ-3); 乳白阶段: 既有浅粉阶段的鳃腔膨大, 也有灰白阶段的细胞坏死崩解的病理现象;灰白阶段: 鳃叶部分区域病变严重, 较多的角质层出现断裂, 组成鳃叶的上皮细胞和柱状细胞坏死崩解, 细胞核溶解消失, 坏死物质淡染(图版Ⅳ-4、5),有些区域柱状细胞坏死, 鳃腔变窄, 甚至鳃腔完全消失, 残留的鳃上皮细胞核固缩浓染(图版Ⅳ-6), 影响鳃的呼吸功能。

2.7 肠和神经团组织病理

不同发病阶段病蟹肠道组织只在浅粉阶段后有轻微的水肿外, 无其他组织病理变化。位于胸腔中央靠近胸甲处的神经团, 与周围的步足和螯足分别有一根神经相连, 神经团中的神经细胞完整, 细胞质内的尼氏小体正常, 在不同发病阶段均未发现神经组织的病理变化现象。

3 讨论

河蟹规模化养殖从20世纪90年代起, 至今已有20多年的历史, 随着养殖规模的扩大, 新的病害不断出现, 包括寄生虫性疾病[4,5]、病毒性疾病[6,7]和细菌性疾病[8], 还有无法确定病因的疾病, 如2007年报道的在江苏东太湖围网养殖的中华绒螯蟹出现肝胰腺白化症, 尽管排除了生物性病因, 但结论是该病的发生与饵料投喂量、动植物饵料之比及水环境有着密切的联系, 最终也没有明确疾病是由哪种非生物性因素引起的[9]。本研究的河蟹水瘪子病发生在养殖池塘, 与时隔十年发生在东太湖养殖的中华绒螯蟹肝胰腺白化症具有相似的症状, 由于都没有明确病因, 两者是否是属于相同病因引起的疾病还有待于进一步证实。2007年宋学宏等[10]对中华绒螯蟹肝胰腺白化症进行了病理方面的研究, 但侧重于超微结构的病理变化, 在显微病理方面只是粗略地对3种组织器官进行了病理观察和简单的描述。本研究不仅从病蟹肝胰腺量和胸腔内血淋巴液量等方面进行了病理变化的分析比较, 且更为系统地分别对病蟹的4个不同发病阶段6种组织器官进行病理观察, 研究了该病发生、发展过程中不同发病阶段的病理变化规律和特点, 对全面掌握“水瘪子”病的病理变化特点和疾病的本质、提供查明该病病因和确定有效防控方法的病理依据等方面都有重要意义。

河蟹水瘪子病肝胰腺不仅颜色发生变化, 肝胰腺量也显著减少, 从健康蟹至灰白阶段的病蟹, 肝胰腺与蟹重比从0.090±0.007减少到0.026±0.005, 减少了约2/3; 肝胰腺管直径从(0.402±0.020) mm缩小到(0.263±0.015) mm, 萎缩了约1/3。肝胰腺由许多肝胰腺管集合而成, 肝胰腺管缩小是肝胰腺量的减少主要因素之一, 不同发病阶段病蟹肝胰腺与蟹重比和肝胰腺管直径呈正相关关系, 都随病情的加深而逐渐减小。肝胰腺与蟹重比和肝胰腺管直径的减少主要发生在发病后的浅黄阶段和浅粉阶段, 几乎呈直线下降, 表现为极显著的差异(P＜0.01), 而从乳白阶段到灰白阶段差异不显著(P＞0.05)。这种减少现象同样显示在肝胰腺的组织病理中, 发病的浅黄阶段肝胰腺细胞萎缩为主导致肝胰腺管萎缩, 浅粉阶段萎缩加剧, 乳白阶段和灰白阶段萎缩的肝胰腺细胞以崩解坏死为主, 但许多坏死细胞仍被严重萎缩呈锯齿形的管状基膜包围着。

腔液与蟹重比随病情的加深而逐渐增加, 与肝胰腺与蟹重比呈负相关关系。河蟹是开放式的循环系统, 血淋巴液主要分布在组织内, 胸腔内也有少量存在, 腔液与蟹重比在健康蟹内只有0.005±0.004, 发病后, 显著增加到灰白阶段0.066±0.005,增加了13倍。腔液与蟹重比的增加主要发生在发病后的浅黄阶段和浅粉阶段, 几乎呈直线上升, 表现为极显著的差异(P＜0.01), 乳白阶段起血淋巴液不再增加, 乳白阶段与灰白阶段之间腔液与蟹重比差异不显著(P＞0.05)。病蟹尤其后期的病蟹严重消瘦, 肝胰腺和肌肉等可食部分已大量减少, 食用时几乎空壳无肉, 但病蟹仍然有重量感, 是因为病蟹体内血淋巴液的增加。肝胰腺和肌肉等组织出现坏死等病变, 机体蛋白质等大分子物质变成小分子等物质后进入血淋巴液, 这种小分子物质的持续增加, 使血淋巴液渗透压持续升高, 通过鳃等组织器官水分从体外进入血淋巴液中以平衡增加的渗透压, 病蟹甲壳内大量血淋巴液增加形成大量积液,导致腔液与蟹重比增加和组织间的水肿现象。

河蟹水瘪子病主要病变出现在肝胰腺、鳃、肌肉组织和心脏, 病理变化都首先出现不同程度的水肿现象, 组织细胞出现不同程度的萎缩, 组织间隙逐渐增大, 然后部分组织细胞变性和坏死, 最终局部组织细胞出现崩解坏死的病变过程。在病蟹4个发病阶段中, 有些病变与其前后邻近的发病阶段病变类似, 有些病变具有发病阶段间的承上启下现象, 即其前个发病阶段的病灶相对较小和程度相对较轻, 而其后个发病阶段的病灶相对较大和程度相对较重, 例如在乳白阶段肝胰腺细胞坏死的病理变化已比较严重, 在其前的浅粉阶段出现轻度的少量坏死, 在其后的灰白阶段有些区域肝胰腺细胞已坏死成一片无结构物质。肝胰腺、鳃、肌肉组织和心脏病变过程具有相似性, 浅黄阶段主要是以组织器官水肿和萎缩为主, 水肿和萎缩是一种可逆的病理过程, 病因消除后可以向正常转化, 但在浅粉阶段肝胰腺和肌肉组织出现细胞坏死, 以后发病阶段更为严重, 鳃和心脏组织在乳白阶段和灰白阶段出现细胞坏死, 坏死是一种不可逆的病理过程。根据不同发病阶段的病理特点, 在未来确定病因后通过消除病因等方法, 只有在病变处于可逆状态的浅黄阶段病蟹才有恢复的可能, 才有防控和挽救价值,而浅粉阶段尤其是乳白阶段和灰白阶段的病蟹由于主要器官组织细胞出现崩解坏死处于不可逆的病理过程, 即使病因消除病蟹已不可能恢复, 这样的病蟹建议及时的清除, 不应该继续养殖, 减少继续养殖造成进一步的经济损失。

同一病蟹的不同组织器官病理变化程度是不同的, 在同一个发病阶段不同病蟹的相同组织器官病理变化程度也存在一定的差异。随着病情的加深, 尽管各发病阶段的主要组织器官肝胰腺、鳃、肌肉组织和心脏病变程度不一, 参差不齐, 但在发病过程中都出现萎缩、水肿、坏死的组织病理变化。蟹壳软是“水瘪子”病的主要症状, 肝胰腺的病变影响消化吸收和合成代谢, 尤其在发病的后阶段得不到充分的营养等原因, 使蜕壳后的新生蟹壳无法进一步硬化, 是蟹壳软主要因素之一; 肌肉组织的病变影响活动能力, 病蟹表现为活力显著下降;心脏的病变影响血淋巴液的循环和鳃的病变影响其呼吸功能, 相对健康蟹而言病蟹离水后在较短时间内就死亡, 有些病蟹病程未达到乳白阶段和灰白阶段就有死亡, 呼吸功能下降是主要原因之一。病蟹肝胰腺细胞细胞核出现核沟, 随着病情的发展,出现核沟的肝胰腺细胞数量增加。核沟常在人的肿瘤细胞中出现, 如人的汗腺腺瘤(Hidradenoma)[11]和乳头状肾细胞癌(Papillary renal cell carcinoma)[12]等疾病, 认为核沟是细胞核核膜凹入的结果, 本研究的病蟹肝胰腺细胞细胞核出现核沟的病理现象是否与“水瘪子”病有一定关系有待进一步证实。

本文采用肝胰腺与蟹重比和腔液与蟹重比, 能够比较真实地反映不同发病阶段病蟹的病理变化状况, 而宋学宏等[9]为了比较健康蟹与白化症病蟹在肥瘦程度上的差异性, 采用夏武平等[13]用于测定大林姬鼠(Apodemus speciosus peninsulaeThomas)肥满度的方法作为测定积有大量血淋巴液的白化症病蟹肥满度, 肥满度等于体重(g)除以体长(cm)的三次方再乘以100, 肥满度与体重和体长有关, 该报道中健康雄蟹和患病雄蟹的肥满度测定结果分别为(69.8±1.9)和(60.6±2.9) g/cm3, 健康雌蟹和患病雌蟹的肥满度分别为(55.1±2.6)和(51.0±1.3) g/cm3, 尽管有显著差异, 但很明显病蟹依然具有很高的肥满度, 与健康蟹差异很小。由于白化症病蟹减少的肝胰腺和肌肉组织重量由增加的血淋巴液取代, 其体重没有出现很大变化, 但很瘦, 尤其到了后期, 空壳无肉, 已失去食用价值, 因此将测定大林姬鼠肥满度的方法使用在具有大量腔液和组织水肿的病蟹上, 不能真实体现实际病蟹肥瘦度和病理变化, 同时会产生误导作用。

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PATHOLOGICAL CHANGES OF SHUI-BIE-ZI DISEASED CHINESE MITTEN CRAB ERIOCHEIR SINENSIS IN THE DIFFERENT STAGES OF DISEASE

LU Hong-Da, TIAN Quan-Quan, JIA Xiang-Xiang, ZHANG Xiao-Jun and REN Fang-Fang
(Shanghai Collaborative Innovation for Aquatic Animal Genetics and Breeding; National Pathogen Collection Center for Aquatic Animals; National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China)

The pathological changes of “shui-bie-zi” diseased Chinese mitten crabEriocheir sinensiswere analyzed in order to understand the process of disease occurrence and development and reveal the nature of disease. According to hepatopancreatic colours of the diseased crabs, the disease was divided into four stages of light yellow, light pink,milky white and grey respectively. The results showed that as the development of the disease, the weight ratio of hepatopancreas with crab body reduced gradually, and the weight ratio of haemolymph in the cavity with crab body and the diameter of hepatopancreatic tube decreased gradually. These indexes of diseased crabs in four stages of disease were extremely significant difference compared to healthy crabs respectively (P＜0.01). Except there were no significant differences of the weight ratios of hepatopancreas with crab body between the milky white stage and the grey stage, and of haemolymph in the cavity with crab body between the light pink stage and the milky white stage and between the milky white stage and the grey stage, and of the diameter of hepatopancreatic tubes between the milky white stage and the grey stage (P＞0.05) and there was significant difference of the diameter of hepatopancreatic tubes between the light pink stage and the milky white stage (P＜0.05), these indexes were extremely significant differences between the other various stages of diseased crabs (P＜0.01). The histopathological changes of hepatopancreas, gill, muscle and cardiac muscle were similar among six kinds of tissues or organs of diseased crabs in the four stages of disease. The main histopathological changes of hepatopancreas, gill, muscle and cardiac muscle were edema and atrophy in the light yellow stage. Edema and atrophy are reversible histopathological processes. Necrosis of hepatopancreas and muscle appeared in the light pink stage and was more serious in the later stages. Necrosis of gills and cardiac tissue appeared in the milky white stage and the grey stage. Necrosis is an irreversible histopathological process. Histopathological changes of nerve and intestinal tract were not obvious. According to the histopathological characteristics in the different stages, diseased crabs could recover only in the light yellow stage by eliminating the cause which will be determined in the future. Diseased crabs are impossible to recover due to the necrosis of major organs or tissues in the light pink stage and the later stages even the cause of disease is eliminated. Diseased crabs should be cleared away in time in order to reduce the economic losses of further breeding.

Eriocheir sinensis; Shui-bie-zi disease; Pathology; Histopathology

S945.6

A

1000-3207(2017)06-1242-09

2017-07-12;

2017-09-04

上海市中华绒螯蟹产业技术体系建设项目(沪农科产字2017-4号); 水产动物遗传育种上海市协同创新中心(ZF1206)资助[Supported by Shanghai Chinese Mitten Crab Industry Technology System Construction Project (Shanghai Agricultural Science Production 2017-4); Shanghai Collaborative Innovation for Aquatic Animal Genetics and Breeding (ZF1206)]

陆宏达(1960—), 男, 江苏启东人; 教授; 主要从事水生动物医学研究。E-mail: hdlu@shou.edu.cn

10.7541/2017.154

图版Ⅰ 肝胰腺组织病理PlateⅠ Histopathology of hepatopancreas

图版Ⅱ 肌肉组织病理PlateⅡ Histopathology of muscle

图版Ⅲ 心脏组织病理PlateⅢ Histopathology of heart

图版Ⅳ 鳃组织病理PlateⅣ Histopathology of gill