大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药监测

汪 璐，曲远青

(成都军区总医院 检验科，四川 成都610038)

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药监测

汪 璐，曲远青

(成都军区总医院 检验科，四川 成都610038)

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药情况，为临床合理用药提供临床参考。方法采用法国生物梅利埃VITEK2COMPACT 全自动微生物鉴定分析仪对2016年1月到2016年12月我院临床各类标本分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯进行鉴定及药敏分析。结果1920株大肠埃希菌检出最多的标本分别为中段尿(38.28%)，痰液(29.11%)，脓液(11.15%)，1920株大肠埃希菌ESBLs阳性株943株，阳性率49.11%，其中以积液ESBLs阳性率(64.44%)、创面分泌物ESBLs阳性率(62.50%)较高；1236株肺炎克雷伯菌检出最多的标本分别为痰液(32.85%)，咽拭子(26.38%)，脓液(15.86%)，1236株肺炎克雷伯菌ESBLs阳性株549株，阳性率44.42%，其中以血液ESBLs阳性率(57.45%)、积液ESBLs阳性率(50.00%)较高。大肠埃希菌ESBLs阳性株科室分布以泌尿科(22.69%)、ICU(19.62%)、肿瘤科(12.83%)较高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸内科(30.05%)、泌尿科(19.67%)、ICU(15.85%)较高。耐药分析：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs阳性株对阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢吡肟、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐药率均高于ESBLs阴性株，差异有统计学意义(Plt;0.05)。结论肠杆菌科ESBLs阳性菌株的产生、耐药率上升以及多重交叉耐药的普遍性给临床的治疗带来极大的困难，抗生素的合理使用有重要的临床意义。

大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；分布；耐药

(ChinJLabDiagn,2017,21:1893)

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌均属肠杆菌科，也是常见的临床分离菌株，尤其在医院感染致病菌中两种菌株占较大比重[1]。由于抗生素的不合理应用，肠杆菌科主导耐药模式也发生较大转变，外排泵机制逐渐转向超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)机制[2,3]。ESBLs可在菌株间传递等特质大幅提高了医院感染的控制困难性。本研究回顾性分析2016年1月到2017年1月我院临床各类标本分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯的检出情况，旨在了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药情况，为临床合理用药提供临床参考。

1 材料与方法

1.1菌株来源

菌株来源于2016年1月到2016年12月我院住院病人送检的各类标本(尿液、痰标本、拭子、血液、积液、脓液等)，共检出大肠埃希菌1920株、肺炎克雷伯1236株。

1.2培养鉴定

各类标本采集、接种严格按第三版《全国临床检验操作规程》进行，标本接种于血琼脂培养基及麦康凯培养基，35℃培养18-24 h，进行细菌鉴定及药敏试验，培养基由郑州安图生物有限公司提供。细菌鉴定药敏分析采用法国生物梅利埃VITEK2COMPACT 全自动微生物鉴定药敏仪，使用配套试剂，ESBLs检测采用美国临床实验室标准化委员会NCCLS推荐的K-B法，药物纸片为英国Oxid公司提供，质控标准菌株：大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC70603，质控标准菌株由卫生部临床检验中心提供。

1.3统计学处理

采用统计学软件SPSS22.0对数据进行分析处理，率比较采用卡方检验，以Plt;0.05有统计学意义，药敏检测数据应用 WHONET5.6软件进行统计。

2 结果

2.11920株大肠埃希菌及1236株肺炎克雷伯菌来源及构成比

1920株大肠埃希菌检出最多的标本分别为中段尿(38.28%)，痰液(29.11%)，脓液(11.15%)检出较多，1920株大肠埃希菌ESBLs阳性株943株，阳性率49.11%，其中以积液ESBLs阳性率(64.44%)、创面分泌物ESBLs阳性率(62.50%)较高。1236株肺炎克雷伯菌检出最多的标本分别为痰液(32.85%)，咽拭子(26.38%)，脓液(15.86%)，1236株肺炎克雷伯菌ESBLs阳性株549株，阳性率44.42%，其中以血液ESBLs阳性率(57.45%)、积液ESBLs阳性率(50.00%)较高。见表1。

表1 1920株大肠埃希菌及1236株肺炎克雷伯菌来源及构成比(n，%)

2.2大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs阳性株科室分布

大肠埃希菌ESBLs阳性株科室分布以泌尿科(22.69%)、ICU(19.62%)、肿瘤科(12.83%)较高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸内科(30.05%)、泌尿科(19.67%)、ICU(15.85%)较高。见表2。

2.3大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌耐药分析

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌耐药分析见表3，经卡方检验分析，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs阳性株对阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢吡肟、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐药率均高于ESBLs阴性株，差异有统计学意义(Plt;0.05)。

表2 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs阳性株科室分布(n，%)

表3 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌耐药率分析(n，%)

注:*Plt;0.05.

3 讨论

在临床治疗过程中因抗生素的不合理使用所导致的耐药问题正日趋严重。致命性耐药菌株在全世界范围内均多有报道[4]，尤其部分发展中国家抗生素耐药性问题蔓延迅速，其产生因素极为复杂且并不局限于临床抗生素的滥用，部分畜牧业利用抗生素来促进牲畜的生长，或某些国家(例如印度)的药物生产厂商将抗生素释放到废水之中导致环境的恶化[5,6]。抗生素使用的监管已刻不容缓。ESBLs为一种细菌质粒介导可水解和灭活诸如头孢菌素类、青霉素类及氨曲南等单酰胺类抗菌素为特征的β-内酰胺酶，其编码ESBLs基因可在同种和不同种细菌间扩散，产ESBLs菌株多呈现多重耐药，由其诱发的感染极难控制[7]。

产ESBLs菌株以革兰氏阴性杆菌居多，其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌在临床分离菌株中较为多见。本研究1920株大肠埃希菌产ESBLs菌株阳性率为49.11%，1236株肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株阳性率为44.42%，稍高于临床其他研究所报道的20%-40%[8,9]，大肠埃希菌引发的感染高于肺炎克雷伯菌，同时数据也说明本院大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌耐药现象不容乐观。大肠埃希菌检出标本主要来源于中段尿、痰液及脓液，多见于尿路感染、呼吸道感染，与临床研究相符[10]。肺炎克雷伯菌检出标本则多见于痰液、咽拭子及脓液，多见于下呼吸道感染。大肠埃希菌ESBLs阳性株科室分布以泌尿科、ICU、肿瘤科较高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸内科、泌尿科、ICU较高。ICU及肿瘤科患者多病情严重、免疫力低下、广谱抗生素大量使用为发生医院感染的高危人群，医院感染发生率居高不下，医院感染的发生加重了基础疾病的治疗难度，感染也是造成重症患者死亡的重要因素，泌尿科多侵袭性操作、导尿管的留置(留置导管内壁容易形成细菌生物膜，使细菌产生耐药[11])等，呼吸内科患者接触各类病原菌、交叉感染的机率较高也是造成两科室ESBLs阳性株检出率较高的重要原因。ESBLs阳性质粒编码，传播方式多种，接合、转化、转导均可造成耐药基因的扩散[12]，使同种或不同菌种敏感菌变成耐药菌，另一方面抗生素的选择作用使得耐药菌株大量繁殖成为优势菌群同时也加快了 细菌突变的速度产生相应耐药菌株甚至新的耐药菌株[13]。

经统计学分析，本研究中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs阳性株耐药率对阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢吡肟、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐药率均显著高于ESBLs阴性株，与临床其他研究相符。据临床报道[14]：ESBLs阳性菌株多同时携带其他抗生素如氨基糖苷类、磺胺类、氟喹诺酮类多种耐药基因，菌株往往呈现多重交叉耐药。国外研究显示[15]：肠杆菌科ESBLs阳性菌株产生率与三代头孢菌素的消费量呈现正相关，减少三代头孢菌素的使用可减少相应肠杆菌科ESBLs阳性菌株产生。本研究中大肠埃希菌对妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星具有较高的耐药性，肺炎克雷伯菌对左氧氟沙星、阿米卡星、妥布霉素具有相对较高的耐药性，与本院临床相应的经验性用药习惯相符。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药情况的出现尤其值得引起临床重点关注，在类似的国内研究中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药较少，亚胺培南在临床仍是治疗ESBLs的最后一道防线，其耐药率上升的危害性不言而喻。肠杆菌科碳青霉烯类抗生素耐药产生机制多见于AmpC酶过度表达联合OMP丢失，及PBP对碳青霉烯类亲和力的改变[16]。

综上所述，肠杆菌科ESBLs阳性菌株的产生、耐药率上升以及多重交叉耐药的普遍性给临床的治疗带来极大的困难，抗生素的合理使用有重要的临床意义。

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ClinicaldistributionanddrugresistancemonitoringofEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniae

WANGLu,QUYuan-qing.

(DepartmentofLaoratoryMedicine,GeneralHospitalofChengduMilitaryCommand,Chengdu610038,China)

ObjectiveTo study the clinical distribution and drug resistance of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae,and provide clinical reference for clinical rational drug use.MethodsThe biological Melly VITEK2COMPACT automatic microorganism analyzer on January 2016 to January 2017 in our hospital all kinds of isolates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae were identified and the drug sensitivity analysis.ResultsThe specimens of Escherichia coli was the most of 1920 strains were urine (38.28%),(29.11%) sputum,pus (11.15%) detected more,1920 strains of Escherichia coli Coli ESBLs 943 positive strains,the positive rate was 49.11%,the positive rate of ESBLs effusion (64.44%),the positive rate of wound secretion of ESBLs (62.50%) high; 1236 strains of Klebsiella pneumoniae were detected in most of the specimens were sputum (32.85%),pharynx (26.38%),pus (15.86%),1236 strains of Klebsiella pneumoniae ESBLs 549 positive strains,the positive rate was 44.42%,among which the blood ESBLs positive rate (57.45%),the positive rate of ESBLs (50%).Higher ESBLs positive strains of Escherichia coli; distribution of departments in urology (22.69%),ICU (19.62%),oncology (12.83%) high; Klebsiella pneumoniae clinical distribution in the respiratory department (30.05%),urology (19.67%),ICU (15.85%):high; drug resistance analysis of Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae Klebsiella pneumoniae ESBLs positive strains to Amikacin,ciprofloxacin,levofloxacin,cefepime,cefoperazone sulbactam,piperacillin tazobactam,tobramycin resistance rate was higher than that of ESBLs negative strains,the difference was statistically Significance (Plt;0.05).ConclusionEnterobacteriaceae ESBLs positive strains,the resistant rate of rise and universal multiple cross resistance to clinical treatment brings great difficulties,has important clinical significance in the rational use of antibiotics.

Escherichia coli;Klebsiella pneumoniae;distribution;drug resistance

1007-4287(2017)11-1893-04

R372

A

2017-02-21)