黄石地区2 648例就诊者的HPV检测结果分析

张 伟,汪宏良,朱杰稳,蔡小凤

(1黄石市中心医院,湖北 黄石 435000;2肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，湖北 黄石 435000)

*通讯作者：蔡小凤，主治医师,硕士。

黄石地区2 648例就诊者的HPV检测结果分析

张 伟1,2,汪宏良1,2,朱杰稳1,2,蔡小凤1*

(1黄石市中心医院,湖北 黄石 435000;2肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，湖北 黄石 435000)

为研究湖北省黄石地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及其亚型分布,回顾性分析应用导流杂交基因芯片技术检测从 2016年9月至2017年7月2 648例女性宫颈拭子HPV基因分型的结果，比较不同基因型的流行病学特点， 并采用SPSS 17.0 软件对数据进行统计分析。结果为：在2 648例检测标本中，检测出HPV阳性感染率为43.92%(1 163/2 648)。感染年龄分布以>60岁年龄段感染率最高，为63.46%；其次是≤20岁年龄段(47.56%);而后是21～30岁年龄段(47.39%)，51～60岁年龄段(44.69%)，41～50岁年龄段(42.87%)，31～40岁年龄段(40.76%),各年龄组感染率之间无统计学差异(P>0.05)。20种HPV基因亚型中，居前5位的分别是HPV52(20.64%)、HPV16(14.70%)、HPV58(10.83%)、HPV6(6.45%)、HPV33(5.85%)。在不同宫颈病变的HPV感染状况中：宫颈炎组(24.38%)、CIN I组(48.70%)、CIN II组(77.89%)、CIN III组(89.64%)、宫颈癌组(93.23%)，两两比较有统计学意义(P<0.01)。单一型别占总感染例数的75.49%(878/1 163)；多重感染率为24.51%(285/1 163)，其中双重感染率为17.45%(203/1 163)，三重以上混合感染率为7.05%(82/1 163)。湖北省黄石地区女性HPV感染率较高，应加强对HPV的筛检力度，为HPV相关疾病的防治提供重要参考。

人乳头状瘤病毒；基因型；宫颈癌；宫颈上皮内瘤样病变

随着医疗技术和实验方法的不断进步，已在多种疾病(例如：尖锐湿疣、肛管癌、鼻腔内癌等)中检测出人乳头瘤病毒(Human papiliomavirus,Hpv)的亚型。尤其在妇科疾病中，宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、宫颈癌(cervical cancer,CC)等疾病与该病毒的感染密切相关[1]。

学者研究发现[2]，HPV易浸染受损的宫颈上皮，并与宿主基因组整合，整合后的宫颈上皮不利修复，从而导致宫颈上皮内瘤变。若此时没有及时干预治疗，而任其持续感染，就会进一步促进疾病的恶变[3]。同时，有文献报道[4]HPV亚型的分布因地区不同而有所区别，感染与致病力因亚型的不同而有所差异。为探究黄石地区女性宫颈病变患者HPV感染状况和亚型遍布特征，以及与宫颈病变的相关性，本研究对2 648例宫颈病变患者的HPV的检测结果进行分析总结。

1 资料与方法

1.1一般资料

研究对象来源于黄石市中心医院2016年9月至2017年7月门诊及住院的2 648例宫颈病变(宫颈炎、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌)患者，年龄15～78岁，平均年龄37.99±12.3岁。

1.2主要仪器与试剂

基因扩增检测系统(ABI7500型)：美国应用生物系统公司；分子杂交仪(LF-III)：上海比朗仪器制造有限公司；HPV基因分型试剂盒：广东凯普生物科技股份有限公司。

1.3检测方法

采用聚合酶链式反应和基因芯片检测技术，由妇科医生采用HPV专用采样刷采取标本后置于有标记的专用细胞保存液中，扭紧瓶盖。标本采集后，立即送检，若未能及时检测，保存于4 ℃冰箱，一周内完成检测。对宫颈脱落细胞标本进行HPV基因分型检测：DNA的提取→扩增→杂交→孵育→显色严格按照SOP文件执行。

1.4统计学处理

采用SPSS17.0统计软件进行分析。对感染状况、感染亚型等指标采取描述性分析，不同组别HPV感染率的差异性采用X2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1各年龄段HPV感染状况

在2 648例患者标本中，检测出HPV感染的有1 163例，占检测标本的43.92%。对感染年龄分布进行分析得出：60岁以上患者感染率高达63.46%；其次是≤20岁年龄段，为47.56%；而后是21～30岁年龄段，为47.39%；51～60年龄段为44.69%；41～50岁年龄段为42.87%；31～40岁年龄段，为40.76%。各年龄段间HPV阳性率无统计学差异(P>0.05),各年龄段HPV感染状况如图1所示。

图1 各年龄段HPV感染状况

2.2 HPV-DNA分型检测结果

宫颈病变中HPV基因感染构成比如图2所示。居前5位的是HPV52(20.64%)、HPV16(14.70%)、HPV58(10.83%)、HPV6(6.45%)、HPV33(5.85%)。HPV感染在宫颈病变中的检出率有显著差异(X2=83.269，P=0.000)。

图2 宫颈病变中HPV感染构成比

不同型别感染的宫颈病变分布如图3所示。HPV52、HPV16、HPV58 3种亚型在不同宫颈病变中的检出率具有统计学意义(X2=32.312,19.816,15.692；P=0.000,0.002,0.003)，其余亚型检出率无差异性(P>0.05)。用Logistic回归分析HPV52、HPV16、HPV58与病变的相关程度，回归系数分别为：2.582,1.255,0.962;P值分别为0.001,0.062,0.529;OR分别为16.555,6.583,1.867;95%CI分别为3.958～72.172,0.950～26.223,0.686～6.355。HPV52、HPV16、HPV58均为CIN II/CIN III致病的危险因素，其中HPV52的致病风险最高(P<0.05)。

图3 不同型别HPV感染的宫颈病变分布

2.3不同级别宫颈病变HPV感染状况

在不同宫颈病变的HPV感染状况中：宫颈炎组(25.26%)、CIN I组(48.70%)、CIN II组(77.89%)、CIN III组(89.64%)、宫颈癌组(93.23%)，两两比较有统计学意义(P<0.01)。不同宫颈病变中HPV感染状况见表1。

表1不同宫颈病变中HPV感染状况例(%)

HPV感染状况宫颈炎组宫颈上皮内瘤病变组CINI组CINII组CINIII组宫颈癌组阳性(1163例)412①(25.26)169(48.70)155(77.89)303(89.64)124(93.23)阴性(1485例)1219178②44②35②9

注：①与CINI组、CINII组、CINIII组比较，P<0.01；②与宫颈癌组比较，P<0.01

2.4宫颈病变中HPV亚型的感染状况

在1 163例感染的患者中，只有1种基因型别为阳性的有878例，占阳性患者的75.49%；多种基因型共同感染的阳性率为24.51%;2种基因型别共同感染为阳性的有203例，占阳性患者的17.45%;3种以上基因型别混合感染为阳性的有82例，占阳性患者的7.05%。宫颈病变中HPV亚型的单一感染与多重感染比较结果见表2。

表2宫颈病变中HPV亚型的单一感染与多重感染比较例(%)

组别n宫颈炎CINICINIICINIII宫颈癌X2P1、单一感染878285(69.14%)132(77.86%)109(70.63%)266(87.71%)86(69.35%)56.328③0.000③2、双重感染20386(20.86%)26(15.27%)28(18.13%)36(11.96%)27(21.77%)8.256④0.032④3、三重以上8241(10%)11(6.87%)18(11.25%)1(0.33%)11(8.87%)6.862⑤0.022⑤

注：“③”表示A与B比较；“④”表示B与C比较；“⑤”表示A与C比较

3 讨论

在临床工作中，常见的宫颈病变有宫颈炎、宫颈上皮内瘤变、 宫颈癌等。其中宫颈癌在全球女性中发病率比较高，是居第2位的恶性肿瘤[5]。宫颈上皮内瘤变(CIN)是一组与宫颈浸润癌密切相关的癌前病变的统称，包括宫颈不典型增生和宫颈原位癌，反映了宫颈癌发生中连续发展的过程，即由宫颈不典型增生(轻→中→重)→原位癌→早期浸润癌→浸润癌的一系列病理变化[6]。人乳头瘤病毒是一组嗜上皮组织的小双链DNA病毒，其感染具有明显的组织特异性。HPV的分子流行病学研究证实，HPV感染是宫颈癌发生的重要启动因子[7]。

3.1本地区HPV感染年龄分布特点

本研究分析发现HPV感染年龄分布状况为： 60岁以上女性患者HPV的感染率比较高，达63.46%，而后是20岁及以下的女性患者，HPV的感染率为47.56%。其主要原因可能为：从生理学来讲，60岁以上女性已经进入绝经期阶段，此阶段的生理和免疫调节异常是HPV 持续感染的一个重要因素，同时，潜伏期感染病毒也被唤醒，得以复活[8]；30岁以下女性的平均感染率为47.48%，此年龄段感染率较高，可能与此阶段女性性生活较为频繁，长期的刺激会导致局部免疫力低下，HPV的获得易感性增加[9]；20岁以下女性患者的HPV阳性率也比较高，表明本地区的HPV感染已趋于年轻化，需要扩大其筛查的年龄范围。在研究分析中发现较高年龄阶段患者HPV的阳性率间的差异并不明显，可能与来我院诊治患者的人群和标本收集的数量有关，在后继研究中，应加大年龄范围的普查和标本数量的采集。此外，还应增强性知识的健康教育，减少HPV的感染途径，从而达到降低宫颈疾病发病率的目的。

3.2本地区HPV感染型别分布特点

在已经证实的200多种亚型HPV中，约有30～40种以上为嗜肛生殖器粘膜型，生殖器HPV感染是一种最常见的性传播疾病，仅次于衣原体和滴虫病而居第3位。流行病学调查报告[10]显示，日前感染女性的HPV的亚型主要为16，18，31，52 和 58，感染的亚型因地域的不同而有所区别。在欧美等国家，与宫颈病变尤其是宫颈癌有密切关联的亚型是HPV16、HPV18这2个亚型，而在亚洲的一些国家区域里，与宫颈癌有密切关联的亚型是HPV52、HPV58[11]，即提示在这些地区HPV疫苗应包括这2个型别。在本次分析研究中发现，在本地区域内，与宫颈癌有密切关联的亚型是HPV52、HPV16、HPV58，其中CIN II、CIN III以上患者排在前5位的分别是HPV52、HPV16、HPV58、HPV6、HPV33、HPV18。HPV52是本地区域感染率最高的HPV亚型，也是宫颈疾病的最大威胁。这些HPV亚型的分布凸显出黄石地区感染的型别有自身特点，期望这种因地域而异的亚型感染可以为当地医疗卫生部门进行监测和精准防治提供帮助。

3.3 HPV感染与宫颈疾患的关系

数据分析显示，从宫颈炎到宫颈上皮内瘤变再到宫颈癌这一系列病变的逐渐加重变化中，HPV的感染率也是随之增高的，这表明宫颈病变的发生、发展与HPV的连续感染有关。有文献报道，2种以上HPV亚型的感染会增加宫颈病变发生的风险；1种HPV亚型连续感染时，患者宫颈病变为恶性病变的概率为19.9%;当2种及以上亚型同时感染时，这种患病恶性风险的概率提升31.8倍[12]。本研究中单一感染在CIN I、CIN II、CIN III中分别占77.86%，70.63%，87.71%，高于宫颈癌中HPV的感染率69.35%；然而，宫颈癌患者2种及以上HPV亚型的感染率要高于CIN患者，这在很大程度上说明2种及以上HPV亚型的感染较1种亚型的感染更有促进宫颈病变癌变的可能。

综上研究表明，HPV的感染与宫颈病变的发展进程密切相关，在日常医疗健康防护工作中要重视HPV的筛检工作，这对宫颈病变的防治具有重要意义。

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Analysis of Epidemic Epidemiological Characteristics of Female HPV Infection Status of 2,648 Cases in Huangshi

ZhangWei1,2,WangHongliang1,2,ZhuJiewen1,2,CaiXiaofeng1*

(1Huangshi Central Hospital,Huangshi Hubei 435000;2Hubei Key Laboratory of Kidney Disease Pathogenesis and Intervention,Huangshi Hubei 435000)

Objective:To investigate infection status and distribution of cervical human papillomavirus(HPV)in huangshi,hubei province.Methods:All 2,648 cases were studied.Cervical cell specimens and 20 hpv genotypes were analyzed by PCR and reverse dot blot gene chip technology.Results:Total of 1 163 specimens were found with positive HPV among 2 648 cases,the positive rate was 43.92%(1 163/2 648).The infection rate in>60 years old was the highest(63.46%),next was≤20 years old(47.56%),21～30 years old(47.39%)，51～60 years old(44.69%)，41～50 years old(42.87%)，31～40 years old(40.76%).However,there was no satistical difference among age groups(P>0.05).20 kinds of HPV gene subtype,the top five was respectively HPV52(20.64%),HPV16 (14.70%),HPV58(10.83%),HPV6 (6.45%),HPV33 (5.85%).Different cervical lesions of HPV infection status were cervicitis group (24.38%),CIN I(48.70%),CIN II group(77.89%),CIN III group(89.64%),cervical cancer(93.23%),multiple comparison among these was statistically significant(P<0.01).The infection rate of single subybe was 75.49%(878/1 163),Multiple infection rate was 24.51%(285/1 163).With dual infection in 17.45%(203/1 163),more than triple mixed infection rate was 7.05%(82/1 163).Conclusion:HPV infection rate is higher in Huangshi city,the HPV screening should be done and strengthened,which can provide a valuable reference for the prevention and treatment of HPV related disease.

human papillomavirus (HPV);genotype;cervicalcancer;cervical intraepithelial neoplasia lesions(CIN)

2017-08-21

黄石市医药卫生科研立项项目(项目编号[2016]269号-35)。

张伟，主管技师，硕士。

10.3969/j.issn.2095-4565.2017.05.012

R711.74

A

2095-4565(2017)05-0055-04

(责任编辑吴鸿霞)