分析PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果

郭秋霞 杨俊歌

分析PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果

郭秋霞 杨俊歌

目的 探讨聚合酶链反应(PCR)检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的临床效果。方法 选择某院2015-07—2016-12诊治的行阴道细菌检验的病例中抽取94例作研究对象，并在细菌检验中分别采用PCR检验法、细菌培养法，对比两种方法对阴道细菌的检出率以及对阴道细菌分布情况的检验准确性。结果 ①PCR检验法在本次阴道细菌检验中的阳性率是88.3%，细菌培养法在本次阴道细菌检验中的阳性率是75.5%，差异有统计学意义(P＜0.05)。②PCR检验法对棒状杆菌、加特纳菌检验准确性分别是93.1%、91.2%，与细菌培养法的72.4%、70.6%相比，差异有统计学意义(均P＜0.05)，而PCR检验法和细菌培养法在肠球菌检验准确性中比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 和细菌培养法相比较，PCR检验法用于阴道细菌检验中的临床效果更佳。

PCR检验法；细菌培养法；阴道细菌检验；检出率；阴道细菌分布

阴道炎作为妇科中发病率相当高的炎症性疾病，早期确诊、治疗是应对阴道炎的主要手段，而采取何种诊断方式，成为了现阶段关于本病的研究热点。细菌培养法作为常规诊断阴道炎的方式，伴随研究日益深入，大量临床研究证实，细菌培养法用于阴道炎早期诊断中的检出率较低，且耗费时间较长，患者通常需要多次进行细菌培养才能确诊[1-3]。聚合酶链反应(PCR)检验法作为近年来用于阴道细菌检验的新型手段之一，优势明显。本研究为明确PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的临床效果，对94例行阴道细菌检验的患者应用PCR检验法、细菌培养法，现将2种阴道细菌的检出率以及阴道细菌分布情况报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 本组接受阴道细菌检验的患者共94例，均在2015-07—2016-12就诊，均为育龄期女性。本组患者年龄为30～45岁，平均年龄(33.7±4.6)岁；入院时均主诉不同程度的阴道瘙痒、白带分泌增多、异味等临床表现，符合阴道炎临床诊断标准[4]；经阴道分泌物的细菌学检验、免疫学试验、线索细胞检查和细菌代谢产物测定等多项检查证实：棒状杆菌29株，加特纳菌34株，肠球菌31例；本研究已经医院伦理学委员会审批通过。

作者单位：450000 郑州中医骨伤病医院检验科(郭秋霞)；462300 河南漯河市召陵区人民医院(杨俊歌)

1.2 研究方法

1.2.1 阴道分泌物采集方法 使用无菌棉签，在患者阴道后穹窿部位蘸取阴道分泌物，随后将阴道分泌物置入无菌盐水内贮存，留待阴道细菌检验。

1.2.2 PCR检验法 取1 000 μL阴道分泌物与生理盐水混合液，予以15 min的离心处理，离心速度为12 000转/min，弃掉上层清液后，将剩余组织裂解液置入60℃水中10 min，取出后再次实施15 min的离心处理，12 000转/min，并将所获取的上清液用于DNA模板制作中。检验人员应注意，选用阴性作参考研究，其中不加模板DNA，并在扩增模板DNA时，应在其中置入引物、缓冲对等，置入PCR仪中予以循环处理。

1.2.3 细菌培养法 取出阴道分泌物与生理盐水的混合液置入培养基内，并在CO2孵箱内坚持培养3 d。培养基内长成了菌落后，挑选露滴状、灰色、光滑、半透明样的细菌予以生化鉴定。

1.3 观察指标 统计PCR检验法、细菌培养法在本次阴道细菌检验中的阳性率；统计PCR检验法、细菌培养法在本次阴道细菌分布检验中的准确性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0统计学软件输入本组研究所得数据：对计数资料使用例数(n)表示，组间率(%)对比使用χ2检验；P＜0.05即对比差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PCR检验法、细菌培养法在本次阴道细菌检验中的阳性率比较 PCR检验法在本次阴道细菌检验中的阳性率是88.3%，细菌培养法在本次阴道细菌检验中的阳性率是75.5%，对比差异有统计学意义(P＜0.05，表1)。

表1 PCR检验法、细菌培养法在本次阴道细菌检验中的阳性率比较(n)

2.2 PCR检验法、细菌培养法在本次阴道细菌分布检验中的准确性比较 PCR检验法对棒状杆菌、加特纳菌检验准确性分别是93.1%、91.2%，与细菌培养法的72.4%、70.6%相比均差异有统计学意义(均P＜0.05)，而PCR检验法和细菌培养法在肠球菌检验准确性中比较差异无统计学意义(P＞0.05，表2)。

表2 PCR检验法、细菌培养法在本次阴道细菌分布检验中的准确性比较[n(%)]

3 讨论

现阶段，多项研究证实，白带检查结果能够在很大程度上反映女性健康状态，因而女性一旦出现白带分泌物增多症状，应立即就医，并予以高度重视，为早期诊断、准确治疗妇科病提供相应依据[5-6]。近几年来，伴随国内女性工作压力加大、生活节奏加快、饮食生活习惯改变，女性阴道病发生率呈现出逐年升高的趋势，其中以阴道炎发生率最高[7]。据报道，阴道炎作为女性多发病，与患者阴道中寄生菌群失衡相关[8]。一般而言，女性阴道中的寄生菌群互相平衡，细菌分泌各种物质可维持阴道中环境稳定。一旦阴道菌群失衡，阴道杆菌、阴道上皮细胞等维持菌群平衡的最重要细菌可大量死亡，致病菌可快速增殖，并在繁殖期间消耗大量营养物质，致使阴道上皮细胞失去其应有代谢功能，并引发阴道内酸碱水平紊乱。阴道上皮细胞丧失了屏障保护功能，可引发炎症，表现为白带增多、外阴瘙痒等。

阴道炎的产生、进展均较迟缓，许多阴道炎患者在发病初期无明显症状，而一旦出现明显临床表现时，已经进展成盆腔、腹部疾病。据报道[9]，若阴道炎长期反复发作，可导致患者不孕。鉴于此，探寻一种可早期判断女性是否存在感染、确定致病菌种的方法，成为阴道细菌检验的研究热点。细菌培养法在女性阴道菌群检测中应用效果良好，然而该检验方法中检验时间长、设备要求高、检出率低等弊端日益暴露。PCR检验法作为近年来广泛应用于阴道细菌检验的新型检测技术，可归纳为荧光定量检测方法，是一种融合了DNA杂交特异性、RCP敏感性优势的检验技术，具有精度准、检出率高等优势。经分析，PCR检验法的操作过程简单，对设备要求不高，并能在检验中做到“无菌操作”要求，避免了细菌感染，从而防止检验结果异常。同时，PCR检验法的检验时间较短，能够快速获得检验结果，避免患者多次、重复检验，减少了其在阴道细菌检验过程中花费的时间与精力。据报道[10]，PCR检验法具有操作简单、耗时短、特异性良好、灵敏度高等优点，是最适宜用于阴道细菌检验中的分子生物学检验技术。而相较于PCR检验法，细菌培养法虽然理论知识简单，但耗时长，且容易在检验过程中出现细菌污染，影响检验结果。

本研究结果提示，PCR检验法在本次阴道细菌检验中的阳性率是88.3%，高于细菌培养法，且其对棒状杆菌、加特纳菌检验准确性也高于细菌培养法，可见PCR检验法用于阴道细菌检验中的临床效果优于细菌培养法。

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2017-05-11)

1005-619X(2017)10-1087-02

10.13517/j.cnki.ccm.2017.10.034