根不同提取物降酶退黄作用研究

吴晓华，田素英 ，郭巧玲

（1.广东省新兴中药学校，广东肇庆527400；2.广东药科大学医药化工学院，广东广州510006；3.广东省化妆品工程技术研究中心，广东中山528458）

根不同提取物降酶退黄作用研究

吴晓华1，田素英2，3，郭巧玲1

（1.广东省新兴中药学校，广东肇庆527400；2.广东药科大学医药化工学院，广东广州510006；3.广东省化妆品工程技术研究中心，广东中山528458）

目的研究根不同溶剂提取物的降酶退黄作用。方法将小鼠随机分为正常组、模型组、水提取物组、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组和茵栀黄组，各10只。各治疗组连续灌胃给药12 d后，以 －萘异硫氰酸酯(ANIT)诱发黄疸模型，48 h后摘眼球取血，分离血清，以血清肝功能指标、肝脏指数为观察指标。结果与模型组比较，水提取物组、正丁醇提取物组的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、 －谷氨酰基转移酶（GGT）肝脏指数均显著下降(P＜0.01或P＜0.05)，且组间无显著性差异(P＞0.05)。结论根可降低试验性胆汁淤积大鼠血清胆红素、转氨酶，有较好的降酶退黄作用，且其活性成分多溶于极性较大的溶剂中。

根；降酶；退黄；提取物

随着生活水平的提高，肥餐厚味导致的黄疸肝炎成为目前的常见病、多发病[1]，采用中医药治疗可取得较好疗效。根为芸香科花椒属植物Zanthoxylum avicennae Lam.DC.的干燥根，又名土花椒、鹰不泊、刺苍根、鸟不宿等，在广东、广西、云南、海南、江西、湖南、贵州等地区广泛分布，是我国南方地区习用药，治疗急、慢性肝炎及肝癌[2－3]疗效好。其味苦辛，性温，归肝、胃、肾经，具有祛风化湿、消肿通络的功效[4－5]。研究证明，其治疗慢性丙型肝炎的功效，其同属植物两面针也有较好的抗肝损伤作用[6－7]。近几年，对根化学成分有所研究，但对其治疗黄疸、肝癌等的作用机制尚未见报道。本研究中以α－萘异硫氰酸酯(ANIT)制备黄疸模型，探讨了根不同溶剂提取物的降酶退黄作用，为进一步开发利用根提供参考。

1 仪器、材料与动物

1.1 仪器

TGL－16G型离心机（上海安平科学仪器有限公司）；7170A型自动生化分析仪（日本日立公司）；UV－265型紫外－可见分光光度计（日本岛津公司）。

1.2 材料

根采自广东省新兴县，经广东药科大学田素英副教授鉴定为芸香科植物Zanthoxylum avicennae Lam.DC.的干燥根，标本保存在广东省新兴中药学校。250 g根粗粉，经水煎煮浓缩至含药材2.5 g/mL的药液；500 g粗粉，经90%乙醇回流提取，回收溶剂至无醇味得浸膏，依次加石油醚、乙酸乙酯、正丁醇溶解萃取浸膏，得各提取物，用时以蒸馏水溶解得混悬液。茵栀黄颗粒（鲁南厚普制药有限公司，批号为1610273）；α－萘异硫氰酸酯(北京恒业精细化学品有限公司，批号为080621)。

1.3 动物

KM小鼠70只，雌雄各半，体质量（20±2）g，购自广东药科大学实验动物中心，生产许可证号SCXK＜粤＞2013－0002。饲养条件为温度(20±2)℃，相对湿度(60±5)%，正常饲养3 d后供试。

2 方法与结果

2.1 肉眼观察实体

与试验前比较，模型组小鼠活动频率明显减少，饮食、进水量均明显减少，毛无光泽，尿液呈深黄色，肝脏普遍肿大，明显黄染，表面有坏死斑，大小不等。水提取物、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组及茵栀黄组小鼠肝脏变化远较模型组小，尿液色较淡，而正常组小鼠则未见异常。

2.2 降酶退黄试验[8]

取小鼠70只，随机分为正常组、模型组、水提取物组、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、茵栀黄组，各10只。除正常组和模型组外，其他组分别连续给药15 d，1次/日，灌胃给药(0.15 mL/10 g)。第13天给药1 h后，正常组给予等量花生油，其他各组均灌胃给药(0.10 mL/10 g)ANIT花生油溶液。第14天晚禁食不禁水12 h后，第15天给药1 h后摘眼球取血，以4 000 r/min的速度离心5 min分离血清，测量丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰基移移酶（GGT）。并处死小鼠，迅速取肝脏，称定质量，以肝脏质量与体质量的百分比对比为肝脏指数。数据以X±s表示，采用SPSS 13.0统计软件进行SNK方差分析。

与正常组比较，模型组小鼠血清ALT，AST，ALP，GGT活性均显著升高(P＜0.01)，说明造模成功。与模型组比较，水提取物组、正丁醇提取物组能显著降低ANIT所致胆汁淤积模型小鼠肝脏指数(P＜0.05)，降低ALT，AST，ALP，GGT活性(P＜0.01)；石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组中的各指标均低于模型组，但组间差异不显著。表明根有较好的降酶退黄作用，但其作用略低于茵栀黄颗粒。结果见表1。

表1 各组小鼠血清指标及肝脏指数变化比较（，n＝10）

表1 各组小鼠血清指标及肝脏指数变化比较（，n＝10）

注：与模型组比较，aP＜0.01，bP＜0.05；与水提取物组比较，cP＜0.05。

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3 讨论

中医认为，黄疸为机体被湿热疫毒所侵导致肝胆功能失调，胆液随血外溢而致目黄、身黄、尿黄为主要临床表现的肝胆病证。关于保肝的药理作用，有多种试验方法[9]。四氯化碳(CCl4)法是直接损伤肝细胞膜，大量Ca2＋涌入细胞并主要聚集在线粒体内致线粒体膜电势丧失，呼吸链功能障碍，促进氧自由基的产生，同时肝细胞膜通透性增加[10]。而ANIT诱发的小鼠肝损伤的生物化学和发病机制类似于人体的胆汁淤积病变，一般均用于药物的退黄降酶作用研究[11]，因此用ANIT造模。西医认为，肝胆功能失调主要表现血清中胆红素、转氨酶升高[12]。本试验中模型组与正常组比较，小鼠血清ALT，AST，ALP，GGT的酶活性、肝脏指数均显著升高(P＜0.05)，提示造模成功。

根降酶退黄保肝作用早有应用。Huang等[13]通过尝试不同方法提取根皮内的物质，并用包含该提取物质的药物治疗肝癌，最终提取到一种有效抗癌物质，能抑制肝癌细胞增殖和转移，并诱导肝癌细胞凋亡。本试验结果表明，根可明显降低肝脏中ALT，AST，ALP，GGT的活性和肝脏指数，其提取物降酶保肝的活性从高到低依次为正丁醇＞水＞乙酸乙酯＞石油醚。说明根提取物可降低肝脏血清中因损伤、瘀阻等所致的ALT，AST，ALP，GGT含量，肝脏指数有所改变，说明不但可改善黄疸症状，对乙型肝炎、丙型肝炎、肝癌也有一定的辅助治疗作用。

根活性成分多在极性大的溶剂中，根在民间有瘦肉煲汤治疗乙型肝炎的用法，与民间用水煎煮

根治疗黄疸提供了科学依据。的根皮和树皮含有香豆素、生物碱、橙皮苷等[13－14]，均有较强的生物活性，其降酶保肝的活性与哪类成分呈正相关，还有待进一步研究。

李峙臻等[15]的研究表明，治疗乙型肝炎多采用西药，如恩替卡韦、阿德福韦酯片等，未进行辨证论治，经济性、安全性有待全面考虑。我国的传统中医药有辨证施治、整体观念的综合考虑，有丰富的中药资源。广泛分布于岭南地区，生长条件粗放，资源丰富，可进行充分开发利用。

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Reducing Enzyme and Jaundice Effects of Different Extracts from Radix Zanthoxylum Avicennae

Wu Xiaohua1,Tian Suying2,3,Guo Qiaoling1
(1.Guangdongsheng Xinxing Zhongyao Xuexiao，Zhaoqing，Guangdong，China527400；2.School of Chemistry and Chemical Engineering，Pharmaceutical University，Guangzhou,Guangdong，China 510006；3.Guangdong Cosmetics Engineering＆Technology Research Center，Zhongshan，Guangdong，China528458)

ObjectiveTo study reducing enzyme and jaundice effects of different extracts from Radix Zanthoxylum avicennae,in order to lay the foundation for further development and utilization.MethodsThe mice were randomly divided into normal group,model group,water extract group and petroleum ether extract group,ethyl acetate extract group,n－butanol extract group and Yinzhihuang group,10 cases in each group.After 12 d of intragastric administration,the jaundice model was induced by ANIT in each treatment group,after 48 h,blood was taken from eyeball and serum was separated,the indexes of serum liver function and liver index were taken as observation indexes.ResultsCompared with the model group,the liver index of ALT,AST,ALP and GGT decreased significantly in the water extract group and n－butanol extract group(P＜0.01 orP＜0.05),but there was no significant difference between the two groups(P＞0.05).ConclusionRadix Zanthoxylum avicennae can reduce the serum bilirubin and transaminase in mice with experimental cholestasis,it has a better effect of reducing enzyme and jaundice,and the active ingredients are dissolved in polar solvents.

Radix Zanthoxylum avicennae;reducing enzyme;reducing jaundice;extract

R285.5；R282.71

A

1006－4931(2017)21－0018－03

10.3969/j.issn.1006－4931.2017.21.007

广东省中医药管理局课题[20142169]。

吴晓华（1975－），女，大学本科，实验师，主要从事药理及中药药理教学与研究工作，（电子信箱）346204031＠qq.com。

田素英（1968－），女，硕士研究生，副教授，主要从事中药应用教学与研究工作，（电子信箱）zsxqtsy＠126.com。

2017－05－23；

2017－08－01)