国家标准法在食品邻苯二甲酸酯空白值测定中的应用

□ 张 卓 山西农业大学信息学院

国家标准法在食品邻苯二甲酸酯空白值测定中的应用

□ 张 卓 山西农业大学信息学院

本文运用国家标准方法，测定食品邻苯二甲酸酯（PAEs）空白值，就凝胶渗透色谱仪（GPC）系统中溶剂、溶剂的储留时间等因素对空白值的影响进行探讨与分析。最终结果得知，在常规操作状态下，依照国家标准方法做系统空白分析，可检测到DEHP、DIBP、DMP、DBP、DEP，空白值均＜10 μg/L。表明GPC系统中溶剂、溶剂的储留时间，是对空白值造成影响的主要因素。

国家标准法；邻苯二甲酸酯；空白值；影响

邻苯二甲酸酯（PAEs）作为一种液体增塑剂，无味且无色，且还是一类扰乱内分泌的环境雌激素。在食品生产中（果冻、饮料等），经常会添加食用乳化剂，用此来防止产品发生油水分层状况。因邻苯二甲酸酯类增塑剂当中的邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）在增稠、乳化效果方面，与棕榈油相似，因而许多不法商家为了一己私利，用DEHP替换棕榈油，而当作食用乳化剂，使得许多用此种乳化剂的酵素饮品、果汁等遭受污染。本文依照我国于2008年发布的《食品中邻苯二甲酸酯的测定》（GB/T21911-2008）标准，对食品中邻苯二甲酸酯空白值进行检测，并探讨了对空白值造成影响的各类因素，提出了减小空白值的具体方案。

1 资料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

①气相色谱-质谱联用仪，内置有基于气相色谱仪（Varian450-GC）的1200L三重四极杆质谱仪（Varian，USA）；②离子源（ESI源）；③N2-浓缩仪（由美国Associates公司生产，N-EVAP型）；④色谱柱，VF-5ms柱（Agilent，USA）；⑤凝胶渗透色谱仪（GPC）（由美国J2Scientific公司产）；⑥其他：超纯水器、玻璃移液管、微量注射器。

1.1.2 试剂

无水硫酸钠；正己烷；石油醚；乙酸乙酯与丙酮；邻苯二甲酸酯混合标准溶液：邻苯二甲酸二异壬酯（DINP）、邻苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、己酯（DEHP）、邻苯二甲酸二环己酯（DCHP）、邻苯二甲酸二己酯（DHXP）、邻苯二甲酸二（2-乙氧基）、邻苯二甲酸二（BMPP）等；混合内标溶液：D4-DNOP、D4-DBP、D4-DEP、D4-DCHP、D4-DPRP；异辛烷溶剂，20 mg/L；系列标准溶液：分别取邻苯二甲酸酯标准溶液 0 μL、20 μL、50 μL、100 μL、200 μL与500 μL（1 mg/L），另取混合内标溶液10 μl（20 mg/L），稀释（用正己烷）后，至1 mL，混匀，最后铝箔纸隔离，瓶盖密封，保存于冰箱中（-20℃）[1]。

1.2 实验方法

依据《食品中邻苯二甲酸酯的测定》（GB/T21911-2008）当中的样品溶液制备标准，分别取乙酸乙酯、环己烷各10 mL，以1:1比例混匀，GPC净化处理，待5.0～16.0 min时，收集50 mL流出液，减压、旋转式蒸发干可停，将正己烷（1.0 mL）加入，复溶，等待后续进行GC-MS分析。

1.2.1 气相色谱条件

①色谱柱。石英毛细管色谱柱（VF-5ms），内径0.25 mm，柱长为30 m，膜厚0.25 μm；②升温程序。初温控制在60 ℃，持续60 s，后以20 ℃/min的递增温度，持续升至220 ℃，且持续60 s，最后以5 ℃/min温度，增加至280 ℃，持续10 min。③载气，即高纯氦气。恒流模式，控制流速，即1.0 mL/min。④进样方式。柱上进样不分流。另外，传输线温度控制在280 ℃；进样量控制在1 μL。

1.2.2 质谱参考条件

采取电子轰击源（EI）的电离方式，电离能量维持在70 eV，四级杆温度控制在145 ℃，离子源温度控制在225℃，溶剂延迟为5 min，选用离子扫描（SIM）。用内标法计算各邻苯二甲酸酯化合物相应含量。监测离子、保留时间及内标物见表1。

表1 邻苯二甲酸酯的回收率、质谱参数与保留时间（部分）

2 结果与讨论

2.1 回收率、检出限与线性范围

基于特定条件下，各组于10～500 g/L范围内，线性关系较好，r大于0.999，依照S/N（3:1）的仪器方法的检出限进行计算，即加标水平为20 g/L时，平均回收率在89%～91.1%，标准偏差小于12.0%，与空白值定性定量分析需要相满足。见表1。

2.2 背景值考察

《食品中邻苯二甲酸酯的测定》（GB/T21911-2008）对含油脂样品进行分析与检测，是通过环己烷、乙酸乙酯来进行提取的，采用凝胶渗透色谱法（GPC）实施净化操作后，再进行GC/MS检测，所以，溶剂与系统为空白值的主要来源。经过GPC之后而得到的馏分收集液，其总体积为50 mL，针对如此大体积的溶剂，对其进行旋转浓缩之后，其对空白值所产生的影响值得关注。

为深入考察流动相在GPC系统中储留时间与邻苯二甲酸酯空白值增加之间所存在的关系，可进行如下操作：GPC持续停机90 h，然后开机，依照国家标准操作程序，上样操作，对馏分进行收集，开展GC-MS分析检测。对于GPC系统而言，其经流动相浸泡（持续90 h）后，能够检测到的为DEHP、DBP、DIBP、DEP与 DMP，而未检测到的是DINP、DNOP、DCHP、BBP、DPP、BMPP、DMEP、DNP、DPHP、DBEP、DHXP、DEEP。其中，第3收集点时，即49.0 min时，DMP为最大值（3. 25 μg/L），在第4收集点（65 min）时，DEP为最大值，即4.97 μg/L，在第3收集点时（49.0 min），DIBP为最大值，即31.3 μg/L，DEHP最大值出现在第3收集点（49.0 min），即3.90 μg/L，DBP最大值也出现在第收集点，即24.3 μg/L。由最终实验结果可知，在GPC系统中，流动相的储留，可能会造成邻苯二甲酸酯的迁入，由于GPC系统回路的体积约为250 mL，而流动相的常规流速为5 mL/min，由于前段时间（前50 min）所收集到的馏分，均系统当中经过储留，因此，针对前50 min的检出值来讲，其乃是伴随时间而持续增高的，而之后会随之下降，主要因为GPC系统储留的流动相大部分已流出[2]。

3 降低空白值的具体对策

①实验中，不得食用塑料制品，以玻璃器皿为宜。在使用玻璃器皿前，先用洗液全面浸泡。然后用纯净水进行淋洗，经晾干出后，方能使用。②全部试剂、溶液均需保存于玻璃试剂瓶当中，在转移或者量取有机溶剂时，不可用瓶口分配器，在配置各种溶液时，可选用玻璃微量注射器，或者玻璃移液管。③如果GPC系统在一定时间内未使用，在开机后，需先排空系统中的流动相，才能进行上样分析。

4 结语

在系统中的储留，流动相可能会造成DEHP、DBP、DIBP、DMP的迁入，进而增高空白值。欧盟2007/19/EC指令指出，塑料食品包装所用材料中，DBP控制在0.3 mg/kg，而本次研究DBP的空白值达24.3 μg/L，由此表明，如若样品检出具有较低含量的DBP，则需慎重下结论。

[1]肖家勇,李莉,丁利,等.凝胶渗透色谱-高效液相色谱-串联质谱法测定食品中邻苯二甲酸酯类化合物的含量[J].食品安全质量检测学报,2016(1):91-96.

[2]张春雨,王辉,张晓辉,等.凝