中西药物治疗奶牛持久黄体的B超影像学监测

刘伟，程波，蒋瑞东，任书男，李云章，查斯图，王军

（1.内蒙古农业大学兽医学院，呼和浩特 010018；2.巴林左旗动物卫生监督所，赤峰 025450；3.内蒙古大学生命科学学院，呼和浩特 010021）

★繁殖育种

中西药物治疗奶牛持久黄体的B超影像学监测

刘伟1，程波1，蒋瑞东1，任书男1，李云章1，查斯图2，王军3

（1.内蒙古农业大学兽医学院，呼和浩特 010018；2.巴林左旗动物卫生监督所，赤峰 025450；3.内蒙古大学生命科学学院，呼和浩特 010021）

为应用中药和西药治疗奶牛持久黄体提供理论依据，本试验将26头持久黄体奶牛分为中药治疗组、西药治疗组和阴性对照组，中药治疗组灌服中药催情散，阴性对照灌服温性自来水，连续灌服4d，西药治疗组肌注氯前列醇钠；应用B超对卵巢长宽、子宫角、子宫颈纵径进行测量，每3d进行一次，监测周期为22d。结果中药、西药物治疗组总有效率为70%、90%，两组相比差异显著（P<0.05）；与阴性对照组16.7%有效率相比差异极显著（P<0.01）。从B超影像学上来看，中、西药物治疗组奶牛持久黄体侧卵巢平均长宽在停药后均有所降低，但差异不显著（P>0.05），阴性对照组在整个监测周期内总体趋势基本保持不变；中、西药物治疗组奶牛子宫角和子宫颈纵径在停药后升高，但差异不显著（P>0.05），阴性对照组在整个监测周期内变化相对比较平稳。从三组有效率和B超监测结果上来看，中药催情散对黄体的溶解和子宫机能的恢复起到有效作用，西药氯前列醇钠对黄体有特异性溶解作用。

奶牛；持久黄体；中药；西药；直肠检查；B超影像学

不孕症作为奶牛的四大疾病之一，是影响奶牛繁殖和养殖经济效益的主要因素，其中卵巢疾病是导致奶牛不孕的主要原因，而奶牛持久黄体是常见的卵巢疾病[1,2]。持久性黄体可持续分泌孕酮、抑制卵泡发育，从而使发情周期停止循环而出现乏情现象，导致奶牛空怀时间及产犊间隔延长，最终降低奶牛场经济效益[3]。临床已有中西药物治疗奶牛卵巢疾病的报道[4～6]，但国内外应用B超影像学监测中西药物治疗奶牛卵巢疾病效果的报道不多。本试验是在用中西药物对持久黄体奶牛治疗的同时，应用B超对卵巢和子宫进行连续跟踪监测，以便为其治疗持久黄体的作用机理提供可靠依据。

1 材料

1.1 仪器耗材

50s型 Tringa Vet 兽用便携式B超仪一台，配备5.0-7.5MHz 变频线阵探头，Pimmed ICAL 公司生产。中药催情散由淫羊藿、阳起石、肉苁蓉、菟丝子、当归、川芎、熟地、香附、木香、厚朴、陈皮、甘草等12味中药组成，本方剂是由《内蒙古奶牛不孕症的病因调查及中西医综合治疗集成》课题组相关人员根据中兽医理论研制而成，中药材购自内蒙古惠丰堂大药房连锁有限公司；西药氯前列醇钠注射液由宁波第二激素厂生产，兽药字（2015）110252445。

1.2 试验动物

试验动物由内蒙古鄂尔多斯市达拉特旗解放滩镇康泰仑农牧业股份有限公司二期牧场提供，结合繁殖资料，对体况评分在2.75～3.25分、2胎及以上并且在产后60d以上顺产的中国荷斯坦牛，采用直肠及B超检查技术对卵巢上存有直径小于2.50cm黄体、间隔7d后检查黄体依然存在且大小无明显变化的奶牛作为诊断和纳入标准；伴发其他临床疾病的作为排除标准[7～9]，最终挑选出26例试验奶牛。

2 方法

2.1 试验分组及给药

将26头试验奶牛分为中药治疗组（10头）、西药治疗组（10头）和阴性对照组（6头）。中药治疗组每头奶牛每天用5L温性自来水灌服315g（推荐剂量）的催情散粉剂，连续灌服4d；西药治疗组每头奶牛肌肉注射0.3mg（临床剂量）氯前列醇钠；阴性对照组每头奶牛每天灌服5L温性自来水，连续灌服4d。

2.2 试验奶牛的B超影像学检查

使用B超对奶牛卵巢及子宫在用药前1d及用药后的一个情期（22d）内不同时间段进行动态跟踪扫描，每隔3d测量1次，适时观察图像，当显示出卵巢、黄体及子宫清晰图像后，将画面冻结，通过B超仪内置电子标尺对卵巢、黄体及子宫等指标进行测量，测量时以各指标的最大直径为标准，最后将B超储存的图像传输到电脑中。

2.3 疗效判定

中药治疗组在停药后30d、西药治疗组在停药后15d内，经直肠和B超检查黄体消退且发情症状明显可配种者记为治愈；有大卵泡生成未出现发情者记为显效；有中等卵泡生成者记为有效；卵巢上有小卵泡生成或黄体未消退者记为无效。（注：小卵泡直径0.1～0.5cm、中等卵泡直径0.5～1cm、大卵泡直径大于1cm）。

2.4 统计分析

数据用Excel进行整理，应用SPSS20.0进行统计分析，试验数据用“平均值±标准差”表示。

3 结果与分析

3.1 奶牛持久黄体B超诊断声像图

图1为一例持久黄体奶牛的B超声像图。2016年9月20日产犊，胎次3胎，产后63d无发情记录，2016年11月22日直肠及B超检查，左侧卵巢上有蘑菇状突起，声像图显示为较强回声，黄体直径2.47cm（图1A），间隔7d，11月30日第二次检查发现黄体未消失，直径为2.44cm（图1B），确诊为持久黄体。

图1 持久黄体奶牛B超声像图

3.2 中西药物治疗奶牛持久黄体的临床效果

中西药物治疗奶牛持久黄体的效果见表1。中药治疗组和西药治疗组总有效率分别为70%和90%，而阴性对照组总有效率为16.7%。中药治疗组和西药治疗组总有效率相比差异显著（P<0.05），与阴性对照组相比差异极显著（P<0.01）。

表1 中西药物治疗奶牛持久黄体的效果

3.3 用药前后持久黄体奶牛卵巢和子宫的形态变化

3.3.1 用药前后持久黄体奶牛有持久黄体侧卵巢长度的变化

表2 用药前后持久黄体奶牛有持久黄体侧卵巢长度的变化 单位：cm

表3 用药前后持久黄体奶牛有持久黄体侧卵巢宽度的变化 单位：cm

表4 用药前后持久黄体奶牛子宫角纵径的变化 单位：cm

表5 用药前后持久黄体奶牛子宫颈纵径的变化 单位：cm

由表2可知，持久黄体奶牛卵巢长度变化中药和西药治疗组用药前后差异不显著（P>0.05），治疗组与对照组相比差异也不显著（P>0.05）；中药治疗组在停药后1～10d卵巢长度开始下降，之后开始升高，第16天达到高峰；西药治疗组在停药后1～7d卵巢长度呈下降趋势且幅度比中药治疗组大，之后到第13天逐渐升高，第13～16天开始下降；阴性对照组整个监测周期内卵巢长度变化不明显。

3.3.2 用药前后持久黄体奶牛有持久黄体侧卵巢宽度的变化

由表3可知，中药、西药组用药前后卵巢宽度差异不显著（P>0.05），治疗组与对照组相比差异也不显著（P>0.05）；中药治疗组奶牛持久黄体侧卵巢宽度在停药后1～10d呈现下降趋势，之后到16d逐渐升高；西药治疗组在停药后1～7d呈下降趋势，之后到第13天逐渐升高；阴性对照组在整个监测周期内整体变化趋势不明显。

3.3.3 用药前后持久黄体奶牛子宫角纵径的变化

由表4可知，中药、西药组用药前后子宫角纵径差异不显著（P>0.05），治疗组与对照组相比差异也不显著（P>0.05）。中药治疗组子宫角纵径在停药后4～22d有小幅度升高趋势。西药治疗组子宫角纵径在停药后1～13d呈现升高趋势，16～22d呈下降趋势。阴性对照组在整个监测周期内变化相对比较平稳。

3.3.4 用药前后持久黄体奶牛子宫颈纵径的变化

由表5可知，中药、西药组用药前后子宫颈纵径差异不显著（P>0.05），治疗组与对照组相比差异也不显著（P>0.05）；中药治疗组子宫颈纵径在停药后1～22d呈上升趋势；西药治疗组子宫颈纵径在停药后7～13d开始升高。而阴性对照组在整个监测周期内变化比较平稳。

4 讨论

4.1 中西药治疗奶牛持久黄体的作用机理

中医认为持久黄体的发病机理主要为三方面：第一是肾虚，由肾虚导致的“肾虚-天癸-冲任-胞宫”生殖轴功能紊乱是导致该病发生的重要原因[10]；第二是肝气郁结，夹有肾虚、痰湿和血[11]；第三是气血 滞所致的黄体功能不全，多因生殖器官病变导致卵巢供血不足而影响黄体功能[12]。根据中兽医辩证理论，催情散中的阳起石、淫羊藿、肉苁蓉、菟丝子归肾经，起到温肾补肾、壮阳固精的作用；而当归、川芎、熟地具有补血养血、活血祛 ，调节冲任二脉的作用；香附、木香、厚朴、陈皮具有行气解郁的作用，而甘草具有益气补中、调和诸药之疗效，从上述三个发病机理出发，从而达到治疗的目的[13]。淫羊藿中主要成分是总黄酮，具有一定植物性雌激素的作用，雌激素可增加子宫肌对催产素的敏感性，促进子宫收缩，有助前列腺素的生成，从而起到溶解黄体的作用[14]。

目前，临床上常用的西药为外源性PGF2α类药物，主要有THAMPGF2α（天然PGF2α的氨基丁三醇盐类化合物）和氯前列醇钠（人工合成的PGF2α类似物）[15,16]。在反刍类家畜，黄体退化是由子宫内膜上皮产生的PGF2α及黄体分泌的催产素在雌激素和孕酮调解下相互作用的结果[17]。有研究表明，PGF2α溶解黄体的机制也和黄体上表达的受体以及一些基因表达的变化有关，阻断孕酮的生物合成是溶解黄体的主要生理机制。PGF2α溶解黄体的关键是DAX-1基因，StAR和LH受体表达的变化使黄体孕酮的生物合成被抑制[18]。

4.2 中西药物治疗奶牛持久黄体的疗效

本试验，中、西药物治疗组治愈奶牛的平均发情时间分别为（21.30±1.39）d和（12.40±1.56）d，相差将近8d，且西药治疗组比中药治疗组总有效率高，而且差异显著（P<0.05），说明中药催情散对持久黄体仅起到有效作用，而西药氯前列醇钠对持久黄体有特异性的溶解作用。

4.3 中西药物对持久黄体奶牛卵巢形态的影响

本试验中，中药治疗组奶牛持久黄体侧卵巢平均长宽与用药前相比有所下降，甚至恢复正常大小[9]，但差异不显著（P>0.05），说明催情散有溶解黄体的作用。西药治疗组奶牛持久黄体侧卵巢平均长宽与用药前相比体积也有所下降，但差异不显著（P>0.05）。阴性对照组在整个监测周期内变化比较平稳。而对于阴性对照组表现为显效奶牛的合理解释为，随着产后天数的增加，奶牛逐渐渡过产奶高峰期，营养得到改善；在B超直肠检查过程中相当于间接按摩奶牛子宫、卵巢等生殖器官，能够改善局部血液循环和新陈代谢，刺激相关激素的分泌，从而促进了卵泡的发育[19,20]。

4.4 中西药物对持久黄体奶牛子宫形态的影响

本试验中，中药治疗组奶牛子宫角和子宫颈平均纵径与用药前相比有所增加，但差异不显著（P>0.05），说明中药催情散对子宫机能的恢复起到一定作用。西药治疗组奶牛子宫角和子宫颈平均纵径与用药前相比有所增加，差异也不显著（P>0.05），但子宫颈相对子宫角变化不明显，这与前列腺素对奶牛子宫平滑肌有收缩作用而对子宫颈有松弛作用有关。阴性对照组在整个监测周期内变化比较平缓。

5 结论

中药催情散对持久黄体的溶解和子宫机能的恢复起到有效的作用，而西药氯前列醇钠对持久黄体具有特异性溶解作用。直肠按摩奶牛生殖器官对持久黄体有一定的辅助治疗作用。

[1]胡路锋,高树,杨恒,等. 口服促孕散治疗前后持久黄体奶牛B超影像学的研究[J]. 中国畜牧兽医,2013,40(6):184-189.

[2]Gilbert RO. Management of Reproductive Disease in Dairy Cows[J].Vet Clin North Am Food Anim Pract, 2016,32(2):387-410.

[3]周胜春,王文晶. 奶牛持久黄体的发生与激素疗法[J]. 草食动物,2015,6:58.

[4]闫宝琪,王东升,张世栋,等. 藿芪灌注液治疗奶牛卵巢静止和持久黄体的临床试验[J]. 动物医学进展,2016,37(12):122-125.

[5]高树,杨恒,胡路锋. 口服促孕散治疗奶牛卵巢静止的B超影像学研究[J]. 中国奶牛,2016,6:15-21.

[6]Luttgenau J,Kogel T1,Bollwein H. Effects of GnRH or PGF2αin week 5 postpartum on the incidence of cystic ovarian follicles and persistent corpora lutea and on fertility parameters in dairy cows[J]. Theriogenology,2016,85(5):904-1013.

[7]赵兴绪. 兽医产科学[M]. 北京:中国农业出版社,2009.

[8]崔中林. 奶牛疾病学[M]. 北京:中国农业出版社,2007.

[9]高树,杨恒,胡路锋,等. 口服理囊散治疗卵泡囊肿奶牛B超影像学研究[J]. 西北农业学报,2013,22(1):27-33.

[10]张慧珍,张彦丽,魏小萌,等. 中药周期疗法治疗肾虚型黄体功能不全42例临床观察[J].中国中医基础医学杂志,2014,20(7):1008-1010.

[11]钟佩,王静洲. 补肾疏肝促黄体汤治疗肝郁肾虚型黄体功能不全性不孕症临床研究[J].新中医,2015,47(12):153-155.

[12]王飞虹,谈勇. 黄体功能不全性不孕中西医治疗进展[J].吉林中医药,2015,35(3):319-324.

[13]刘钟杰,许剑琴. 中兽医学[M].北京:中国农业出版社,2005.

[14]樊凤娇,董至恒,付改玲. 雌激素对奶牛输卵管上皮细胞前列腺素E2和F2α合成酶mRNA表达的影响[J].中国畜牧兽医,2013,40(3):130-133.

[15]Nak Y,Dagalp SB,Cetin C,et al. Course and Severity of Postpartum Metritis Cases Following Antibiotic and PGF2α Administration in Postpartum Metritis Cows Infected with BoHV-4[J].TransboundnEmerg Dis,2011,58(1):31-36.

[16]Santos VG,Carvalho PD,Maia C,et al. Adding a second prostaglandin F2α treatment to but not reducing the duration of a PRID-Dynch protocol increases fertility after resynchronization of ovulation in lactating Holstein cows[J].J Dairy Sci,2016,99(5):3869-3879.

[17]Santos JE,Bisinotto RS,Ribeiro ES. Mechanisms underlying reduced fertility in anovular dairy cows[J]. Thriogenology,2016,86(1):254-262.

[18]Struve K,Herzog K,Mataga F,et al. The effect of metritis on luteal function in dairy cows[J].BMC Vet Res,2013,9:244.

[19]李建斌,侯明海,仲跻峰.DHI测定在牛群管理中的应用—以高峰奶、持续力和脂蛋白比指标为例[J]. 中国畜牧杂志,2016,52(24):39-49.

[20]乔新平. 通过直肠按摩生殖器官促进奶牛发情受孕的探讨[J].中国奶牛,1998,1:35-36.

S823.3

A

1004-4264（2017）10-0016-04

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.10.004

2017-04-27

内蒙古自治区科技计划项目“奶牛不孕症的病因调查及中西医综合治疗集成（20130224）”。

刘伟（1993-），男 ，汉族，内蒙古通辽市扎鲁特旗人，执业兽医师， 硕士研究生，主要研究方向为临床兽医外产科学。

李云章（1956-），男，蒙古族，内蒙古呼和浩特市人，教授，博导，研究方向为赛马及奶牛疾病。