不同样本和方法对测定大鼠血液生化指标的影响

李 迎，崔晓霞，尚世臣，赵 权，李桂军，王冬平*，陈振文

(1.军事医学科学院实验动物中心，北京 100071； 2.首都医科大学实验动物科学部，北京 100069； 3.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118)

研究报告

不同样本和方法对测定大鼠血液生化指标的影响

李 迎1,3，崔晓霞1，尚世臣1，赵 权3，李桂军1，王冬平1*，陈振文2*

(1.军事医学科学院实验动物中心，北京 100071； 2.首都医科大学实验动物科学部，北京 100069； 3.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118)

目的比较血清和血浆两种不同样本和不同测试方法对大鼠血液生化指标测定值、血糖测定值的影响。方法用血糖仪测定来源相同大鼠的全血血糖值，然后对其血清和血浆样本进行常规生化指标检测。结果在血清与血浆样本进行19个常规生化项目检测中，ALB、TP、ALP、CHOL、URIC、GLU、Mg、LD、Ca差异有显著性(P< 0.05),在其余10项血清与血浆检测值比较中，差异无显著性(P> 0.05)。不同样本和不同方法对血糖的检测结果分析差异有显著性(P< 0.05)。结论不同样本和方法对血清与血浆中部分生化项目检测时存在差异，不同方法和样本检测血糖结果也存在差异。

生化指标；血清；血浆；大鼠

实验动物血液生化参考值的建立是判断动物健康状况和选择合格动物的标准，是临床医疗和生物医学研究中的重要基础数据[1]。随着科学技术不断发展，实验动物的血液生理生化指标的检测方法和仪器发生了很大的变化，检测数据与传统的方法有一定的差异。为确定检测数据的可比性，本实验采用全自动生化仪和血糖仪对同一来源成年大鼠的血清和血浆进行常规生化指标测定，探讨血清和血浆对常规生化指标检测结果的影响以及不同的检测方法和样本对血糖检测指标的影响。

1 材料和方法

1.1实验动物

清洁级Wistar雌性大鼠29只，8周龄，体重180～220 g。军事医学科学院实验动物中心提供[SCXK(军)2012—0004]，动物饲养于屏障环境内，日常饲喂以60Co照射消毒饲料及饮用消毒用水，实验于军事医学科学院实验动物中心实验室进行[SYXK(军)2012—0021]。本实验通过首都医科大学实验动物和动物实验伦理委员会批准(No.AEEI-2017-032)。

1.2主要试剂与仪器

Beckman公司提供的原装配套试剂；乙二胺四乙酸二甲(EDTA-K2)作为抗凝剂；罗康全活力型血糖试纸、罗康全活力型血糖仪(型号：Accu-Chek Active、厂家：德国罗氏诊断有限公司)；Beckman全自动生化分析仪(型号：CX5PRO、厂家：美国贝克曼库尔特公司)；低温离心机(型号：CF16RX、厂家：HITACHI)。

1.3实验方法

1.3.1 血液标本的采集和处理

Wistar大鼠空腹12～24 h后，眼眶静脉取血，静止30 min，5000 r/min离心10 min制备血清，同时在抗凝管加入血液颠倒混匀(抗凝剂枸橼酸钠和血液的比例为1∶9)，离心(离心条件同上)后所得的上清液即为血浆。

1.3.2 血糖仪的检测

采血即时应用血糖仪测定血糖值。

1.3.3 样品检测指标

应用Beckman全自动生化分析仪CX5的血清和血浆两种检测模式检测，检测项目包括：镁(Mg)、钙(Ca)、磷(PO4)、葡萄糖(GLU)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG-B)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLD)、总胆红素(TBIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LD)、肌酸激酶(CK)、淀粉酶(AMY7)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR-S)、尿酸(URIC)。

1.4统计学方法

2 结果

2.1检测结果及统计分析

19项指标检测的结果：ALB、CHOL、URIC、GLU差异有显著性(P< 0.05)，TP、ALP、Mg、LD、Ca差异有显著性(P< 0.01)，其它指标差异无显著性。(见表1)。

2.2不同的检测方法和介质对血糖检测的影响

血糖仪直接测定的血糖值与生化仪测定的血清和血浆中葡萄糖值(见图1)。不同介质对常规生化指标检测结果的比较使用ANOVA单因素方差分析，同时进行方差齐性检验，方差齐时使用LSD统计方法进行组间两两比较，P< 0.05为差异有显著性(见表2)。

表1 血清与血浆19项生化指标检测结果比较

注：与血清比，*P< 0.05，**P< 0.01。

Note.*P< 0.05，**P<0.01，vs. the serum.

表 2 不同的检测方法和介质对血糖检测的结果

注：括号内的数据为动物数。与血糖仪值比较，*P< 0.05。

Note.The data in parentheses are number of animals. Compared with the results detected with blood gluometer showing a significant difference(P<0.05).

图1 三者血糖值比较图Fig.1 Comparison of the serum and plasma glucose levels detected with a glucometer

3 讨论

国内外关于血浆与血清检测结果比较分析的报道较多，但说法各不相同[2]。血浆标本具有无需等待血液凝固，缩短检验时间和提高检验效率等优点，因此成为血常规生化检验的理想研究标本，但血浆和血清两者自身成分差异决定了检查结果存在必然差异[3]。我们通过对血清和血浆19项生化指标检测结果进行比较，在常规生化指标检测中ALB、TP、ALP、CHOL、URIC、GLU、Mg、LD、Ca差异均有显著性(P< 0.05)。在血糖仪和生化仪中血清血浆三者的方差分析中，P值为0.000(P<0.05),差异有显著性。因此在动物实验研究中，血液生化指标检测有必要进行方法的一致性检测并加以标注，以确保实验的准确性和可重复性。

实验表明，不同介质对常规生化指标检测结果有影响，而且不同的检测方法和介质对血糖检测影响较大。在检查特定生化项目时，张正云等[4]报道血浆标本检测中Ca、TP、ALT、AST存在显著差异，本实验结果ALT、AST差异不显著。

罗氏血糖试纸说明书标明血糖仪测定值是应用血浆进行测试，但在本实验结果中，虽然血糖的不同介质和方法测试结果差异显著，但是血糖仪测定值却与血清测定的葡萄糖值相近。

综上所述，各实验室在采集标本的过程中应根据测定的项目来选择合适的标本和适当的方法，这样才不会影响检查结果的准确性和可重复性。本实验结果提示，不同的检测方法和检测标本所获得的生化和血糖指标存在较大差异。

[1] 王冬平,隋丽华,尚世臣,等.清洁级SD大鼠血液生理生化指标的测定[J].中国比较医学杂志,2009,19(9):44-46.

[2] 梁吉平,孙振涛.在生化项目检测中不同血液样本的检测结果比较[J].中国保健营养,2012,22(9):3538.

[3] 姚维菊.不同血液样本在常规生化项目检测中的结果比较[J].检验医学与临床,2013,10(4):468-469.

[4] 张正云,何清.急诊患者三种血液标本检测电解质的可比性[J].检验医学与临床，2013，10(6):734-735.

Effectsofdifferentsamplesandmethodsonthedeterminationofbloodbiochemicalindexesinrats

LI Ying1,3， CUI Xiao-xia1， SHANG Shi-chen1， ZHAO Quan3， LI Gui-jun1， WANG Dong-ping1*， CHEN Zhen-wen2*

(1.Military Academy of Medical Sciences Laboratory Animal Center，Beijing 100071,China； 2.Capital University of Medical Sciences Laboratory Animal Department，Beijing 100069； 3.Jilin Agricultural University College of Animal Science and Technology，Changchun 130118)

ObjectiveTo compare the effects of two different samples and different test methods on blood biochemical indexes and blood glucose values in rats.MethodsGlucose levels in the serum and plasma samples were detected with a blood glucometer, and the biochemical parameters in the serum and plasma were determined by routine blood biochemistry.The data were statistically compared and analyzed to determine if there are some significant differences.ResultsAmong the 19 biochemical indexes of serum and plasma specimens, nine parameters, i.e., ALB,TP,ALP,CHOL,URIC,GLU,Mg,LD,Ca showed significant differences(P< 0.05),while the other 10 indexes showed no significant difference (P> 0.05).Different samples and different methods had significant differences in the detection of blood glucose (P< 0.05).ConclusionsDifferent method and samples impact on the detection of blood glucose and some other serum and plasma biochemical indexes.

Routine biochemical test; Serum; Plasma; Rat

R-33

A

1671-7856(2017) 10-0007-03

10.3969.j.issn.1671-7856. 2017.10.002

2016-12-05

国家科技支撑计划课题(2015BA109B01-04)；国家自然科学基金项目(3137227)。

李迎(1993-)，女，硕士，研究方向：实验动物生物学特性研究。E-mail: 651998038@qq.com

王冬平(1964-)，女，副研究员，研究方向：实验动物生物学特性研究。E-mail: Wangdp6493@126.com。

陈振文(1959-)，男，教授，研究方向：实验动物遗传学。E-mail: czwen@ccmu.edu.cn。*共同通讯