壮药红背娘不同部位没食子酸含量比较

,2* ,2.广西中医药研究院，广西 南宁 50022；2.广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 50022；.广西分析测试研究中心，广西 南宁 50022

药物研究

壮药红背娘不同部位没食子酸含量比较

梁冰1胡仁传1蒋珍藕1,2*黄岛平3赖茂祥1,2
1.广西中医药研究院，广西 南宁 530022；2.广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022；3.广西分析测试研究中心，广西 南宁 530022

目的对壮药材红背娘不同部位的没食子酸含量进行比较。方法采用HPLC法对不同产地的红背娘的根、茎枝、叶各部位的没食子酸含量进行分析。结果各部位均含有没食子酸成分，含量高低依次为：叶>茎枝>根。结论红背娘不同部位中没食子酸含量差别较大，根中的含量最低，可为红背娘的应用及质量标准的制定提供实验依据。

壮药；红背娘；不同部位；没食子酸；含量比较

壮药材红背娘为大戟科植物红背山麻杆Alchorneatrewioides(Benth.)Mull.Arg.的干燥全株，具有清热利湿、散瘀止血、杀虫止痒的功效，主治前列腺炎、痢疾、小便不利、血尿、尿路结石或炎症，红崩、白带、腰腿痛、跌打肿痛；外用治外伤出血、荨麻疹、湿疹等[1-2]。广西壮族民间常用其治疗各型肝炎。现代研究表明，红背娘主要含生物碱类、酚酸类、黄酮类等成分，没食子酸是其中的酚酸类成分之一，具有保肝护肝作用、抗肾间质纤维化、抗氧化、镇咳、抗菌等药理活性[3-7]。

本课题组曾对红背娘药材质量标准进行了较全面的研究，包括红背娘药材的性状、鉴别、检查、浸出物和没食子酸的含量测定等，为制定壮药材红背娘的质量标准提供实验数据。由于红背娘药用全株，药用部位包括叶、茎、枝、根等，为了探究没食子酸在红背娘的叶、茎、枝、根中的分布情况，笔者对红背娘药材的根、茎、枝、叶等不同部位的没食子酸含量进行了比较分析，为制定更科学合理的含量限度以及临床用药提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Alliancee2695高效液相色谱仪(Waters)；KQ-700DV型超声提取仪(昆山市超声仪器有限公司)；XS205DU十万分之一天平(METTLER TOLEDO)。

1.2 材料 没食子酸对照品(批号110831-201204，中国食品药品检定研究院)；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其余所用试剂均为分析纯。

实验所用红背娘药材样品采自广西不同产地，经广西中医药研究院中药资源研究所赖茂祥研究员鉴定为大戟科山麻杆属植物红背山麻杆Alchorneatrewioides(Benth.)Mull.Arg.。各样品收集地点和时间见表1。

表1 红背娘药材样品来源

2 方法与结果

2.1 色谱条件和系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水-磷酸溶液(6∶94∶0.2)；检测波长：273nm；柱温：室温；流速：0.8mL/min。将对照品溶液和供试品溶液进样分析。在上述色谱条件下，供试品中没食子酸与其它杂质达到基线分离，分离度大于1.5，理论板数按没食子酸峰计算应不低于3000，溶剂对没食子酸测定不产生干扰。如图1所示。

2.2 对照品溶液的制备 取没食子酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含30μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备 取供试样品粉末(过三号筛)1.0 g，精密称定，精密加入10%甲醇溶液50 mL，称定重量，超声60 min，放冷，再称定重量，用10%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性关系考察 精密称取没食子酸对照品(含量为89.9%)10.88mg，置25 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL，分别置于10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液。按上述色谱条件分别进样10 μL测定。以进样量(μg)为横坐标(X)，峰面积值为纵坐标(Y)绘制标准曲线，得回归方程为：Y=3002198X-37874 (r=0.9999)。结果表明：进样量在0.039～0.469 μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验 对同一供试品溶液，按上述色谱条件，连续测定6次，测定结果的RSD为1.09%。

2.6 稳定性试验 对同一供试品溶液，按上述色谱条件，于0、1、2、3、12、24h分别进样测定，测定结果的RSD为1.11%。

2.7 重复性试验 对同一批样品，按上述拟订的方法平行测定6份，没食子酸平均含量为0.4806mg/g，RSD=1.52%。

2.8 加样回收试验 精密称取重复性试验项下的样品约0.5g，平行取6份，精密称定，分别精密加入一定量的没食子酸对照品，按2.3项下方法制备供试品溶液，进样测定，计算回收率，结果平均加样回收率为96.85%，RSD=1.15%。详见表2。

2.9 样品测定 取各供试样品1.0g，各2份，精密称定，按2.3项下制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件进样测定没食子酸含量。结果见表3及图2。

表2 没食子酸对照品加样回收率

表3 样品测定结果 (n=2)

3 讨论

实验结果表明: 红背娘的根、茎枝、叶均含有没食子酸，但各部位没食子酸分布不同、含量差异较大。红背娘药用全株，如果同一批样品，叶、茎枝、根的取样比例不同，没食子酸含量测定结果可能差异较大。因此，在对红背娘进行没食子酸含量的检测时应尽可能保证其各部位都取有一定的量，避免因取样时各部位比例不同而使检测结果出现误差。红背娘不同部位中没食子酸含量高低依次为：叶>茎枝>根。根中的含量最低，而根在整个植株(高1～2m的灌木)中所占的分量很少，因此，可以考虑使用地上部分入药，保留根部不采集，有利于植株的再生长、保护红背娘药材资源和壮药材的可持续利用与发展。

[1]国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草(第四册)[M].上海：上海科学技术出版社，1999：755-756.

[2]江苏新医学院.中药大辞典[M].(第1版·上册).上海：上海科学技术出版社，1977：1005.

[3]胡玉麟．从红背叶得到的新的美登素类肿瘤抑制剂：红背叶素、脱氢红背叶素和脱甲基红背叶素[J]．国外医学药学分册，1982(5)：16．

[4]鲁俊华，文永新，陈月圆，等. 红背山麻杆化学成分的研究[J]. 天然产物研究与开发，2012，24(6)：772-774.

[5]黄永林，刘金磊，陈月圆，等. 红背山麻杆叶的化学成分研究(Ⅱ)-黄酮和苯乙醇苷类化合物[J].广西植物，2014，34(2)：143-147.

[6]覃日懂，程 伟，张庆英，等. 红背叶中酚酸类成分研究[J].药学学报，2012，47(7)：926-929.

[7]黄永林，陈月圆，颜小捷，等. 红背山麻杆叶的化学成分研究(Ⅰ)-酚酸类及相关化合物[J]. 广西植物，2014，34(1)：126-129.

ContentComparisononGallicAcidinDifferentPartsofZhuangMedicineHongbeiniang

LIANG Bing1HU Renchuan1JIANG Zhenou1,2﹡HUANG Daoping3LAI Maoxiang1,2

1.Guangxi Institute of Chinese Medicine and Pharmaceutical Science, Nanning 530022, China;2.Guangxi Key Laboratory of Tradtitonal Chinese Medicaine Quality Stardands, Nanning 530022, China;3.Guangxi Center for Analysis and Test Research, Nanning 530022, China

ObjectiveTo compare the contents of gallic acid in different parts of zhuang medicine Hongbeiniang.MethodsThe contents of gallic acid in roots, stem and branches，leaves of Hongbeiniang were carried out by HPLC.ResultsThe roots and stem and branches and leaves of Hongbeiniang have the gallic acid, The content of the order was the leave>the stem and branch>the root.ConclusionThe contents of gallic acid in different parts of Zhuang Medicine Hongbeiniang had big difference, the lowest content in root. This experimental result provide experimental basis for the application and the establishmend of quality standard of Hongbeiniang

Zhuang Medicine；Hongbeiniang；Different Parts；Gallic Acid；Content Comparison

R284.1

A

1007-8517(2017)17-0006-03

2017-06-28 编辑：陶希睿)

广西中药质量标准研究重点实验室自主研究课题(桂中重自201413)；广西医疗卫生适宜技术研究与开发项目(S2015 55)；广西科学研究与技术开发计划项目(桂科重1598005-10)。

梁冰，女，本科，助理研究员，研究方向为中草药质量标准研究、中药与天然药物的基础研究及中药药理的研究。E-mail：462712902@qq.com

蒋珍藕，女，硕士研究生，主任中药师，研究方向为中草药开发研究及质量评价。E-mail：zhenoujiang@163.com