试论南五味子有效部位前处理及提取工艺

单钰毓 李云涛 任瑞涛 王丽娜

摘要：五味子是一种使用较频繁的中药，它有南北之分，南五味子色红，北五味子色黑，目前，南五味子主要指华中五味子的干燥成熟果实。南五味子具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的作用，用于遗尿尿频、久泻不止、自汗、梦遗滑精、津伤口渴、心悸失眠、支气管哮喘、久嗽虚喘等症。本文主要对南五味子有效部位前处理及提取工艺进行研究，通过具体的实验来进行工艺优选，从而实现为南五味子的开发提供科学的、可靠的依据。

关键词：南五味子；有效部位；前处理；提取工艺

引言：

南五味子的各个部位含有六中木脂素类成分，这些成分在药理上主要表现为益智安神的作用，笔者通过对多方面的文献进行学习与研究发现对南五味子有效部位前处理工艺的说明较少，很多都是对提取方法进行的介绍与说明，因此笔者结合文献以及资料，通过实验来对南五味子有效部位前处理及醇提取工艺进行研究和探讨，并对工艺进行优化，目的是为其的工业成产及复方药物的研制提供实验依据。

一、主要工艺及实验材料

1.实验的材料以及实验仪器

南五味子（经中医药大学中药鉴定研究所专业鉴定的华中五味子干燥成熟果实）；五味子酯甲、甲素对照表，主要为含量的检测用，乙腈、甲醇、经过蒸馏的高纯水，另外还包括分析纯试剂。在该提取优化实验中所用到的实验仪器为：选用日本岛津LC-10AVP紫外检测器，Rheodyne7725i进样阀以及AX205电子分析天平。

2.实验的主要工艺

（1）色谱条件

色谱柱：YMCODS-AC18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈一水（36：64）；流速：1.Oml/min，检测波长：254nm；进样量：供试液、对照液均匀为20L；柱温：3O℃。

（2）对照品溶液配制

要精密的对五味子酯甲对照品进行质量的称取，具体的称取量为8.25mg，同时加如甲醇进行溶解操作，并且定容于25mL量瓶中，即得五味子醋甲对照品溶液0.33mg/mL；再分别吸取上述对照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0mL于5mL容量瓶中加甲醇定容至刻度，配制浓度分别为0.033、0.066、0.132、0.264mg/mL的标准品溶液。

（3）供试品溶液的制备

精密量取各五昧子提取液适量，用80%乙醇稀释至含生药0.01g/mL，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过即得。

二、实验结果分析及说明

1.标准曲线的绘制

精密吸取“1.2.2”项下各浓度对照品溶液20μL注入高效液相色谱仪测定峰面积，以五味子酯甲的进样量（x）为横坐标，峰面积的积分值（Y）为纵坐标作图得到标准曲线。回归方程为：Y=2939685X+13232（R=0.99994）。

结果表明，五味子酯甲在0.66～6.6μg范围内呈良好的线性关系。

2.工艺条件考察

（1）水蒸汽蒸馏法除挥发油的工艺条件优选

对影响挥发油提取工艺的主要因素：提取时间A、溶剂量B和油水分离器换水次数C按正交表，以挥发油的提取率指标，并考察五味子酯甲的损失率，进行正交实验（每组300g药材粗粉），优选最佳的水蒸汽蒸馏法除挥发油工艺条件。

结果及分析：正交各组五味子酯甲的损失率均1%～2%，其损失可忽略。经方差分析，影响提取的因素大小顺序为：A>B>C，其中A（提取时问）影响最大，具有高显著性，B（溶剂量）的影响也具有显著性。从正交结果可看出，提取时间4h的效果较好；溶剂量、换水次数影响稍小，为生产成本考虑，选择8倍量水提取，每2h换1次水。优选的最佳条件与正交实验第7组的条件相同，提取率为95.95%。

（2）水煎煮除去水溶性杂质工艺条件的选择

对影响水煎煮提取工艺的两个主要因素加水量和煎煮时间进行了考察，指标为水煎液固形物量，并考察五昧子酯甲的损失率。将1320g药材粗粉，加8倍量水，蒸馏4h，水煎液弃去，药渣分为6份，其中3份分别加水6、8、10倍，煎煮30min；另3份分别加水6倍，煎煮20、30、40min，取滤出的水煎液进行考察。

结果及分析：考察加水量实验各组水煎液固形物的量为6倍水固形物为16.22g，8倍水固形物为17.06g，12倍水固形物为17.38g，因此这一数值基本相近，而酯甲的损失率分别为6倍水-1.39%、8倍水-2.41、12倍水-2.79。因此基于此结果，发现选择6倍水进行煎煮可以在收到固形物量基本相同的情况下，实现酯甲的最低损耗，因此选择6倍水最为适宜；在对煎煮时间进行研究，通过实验我们可以知道，在水煎的时间为20min时，固形物为16.34g，在水煎的时间为30min时，固形物的质量有微量的增加为16.57g，在水煎的时间达到40分钟时固形物的质量仍然没有太多的增加为16.97g。而在三个时间中，酯甲的损失率相差无几，为20min-0.98%、30min-0.97%、40min-1.29%。基于此我们发现在20min与30min的时间进行煎煮。酯甲的损失幅度率小，达到40min的水煎时间后，酯甲的损失率同比增加较大，因此最终我们确定水煎的时间为20min，不仅可以节省时间，提升提取效率，还可以减少酯甲的损耗。综上优选的最佳条件为药渣加6倍药材量的水煎煮20min。

（3）乙醇提取工艺条件的选择

药材经过前两步除杂工艺，已除去高极性和挥发性杂质，需要提取的有效部位为中小极性成分，故选择乙醇进行提取。对影响醇回流工艺的主要因素：醇浓度A、醇用量B、提取时间C进行正交试验（每组250g药材粗粉，加8倍量水蒸馏4h，残渣加6倍量水煎20min，残渣晾干再进行醇提正交实验）。

结果及分析：影响提取的因素大小顺序为：B>C>A。结合因素水平确定的最佳工艺组合为l8倍量80%乙醇分2次提取，每次2h。

结语：

最终经过实验我们得到优选后的工艺，我们发现除杂醇提取工艺在提取物得率百分比上明显要小于直接醇提取工艺，而在五味子酯甲含量上去是直接醇提取的4.44倍。因此除杂醇提取具有成分损失少，纯度高的特点，并且能为有效部位的进一步纯化与开发提供基础。

参考文献：

[1]李振，孟憲纬，管延珍，等.南、北五味子提取物的抑菌及抗氧化作用研究[J].中国调味品，2017，42（1）：28-30；

[2]陈靓，杨燕云，单会娇，等.五味子和南五味子药材及其各部位的6种木脂素含量测定[C]//世界中医药学会联合会中药鉴定专业委员会学术年会.2015.