2016年安徽省滁州市第一人民医院临床分离菌耐药性监测

徐添天， 谢瑞玉

2016年安徽省滁州市第一人民医院临床分离菌耐药性监测

徐添天， 谢瑞玉

目的了解2016年滁州市第一人民医院常见临床分离菌的分布及耐药情况。方法各类临床分离菌采用MicroScan WalkAway 96 PLUS进行鉴定和药敏试验，采用WHONET5.6软件对数据进行统计分析。结果2016年共分离病原菌1 441株，其中革兰阳性菌409株，占28.4%； 革兰阴性菌1 032株，占71.6%。葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为37.5%和83.0%。葡萄球菌中未见对万古霉素、达托霉素和利奈唑胺耐药的菌株。肠球菌中屎肠球菌对达托霉素、万古霉素和利奈唑胺全敏感，检出1株耐利奈唑胺粪肠球菌，检出率为2.6%。肺炎链球菌主要来源于儿科，对青霉素全敏感。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌产ESBL的检出率分别为49.1%、24.2%和62.5%， 产ESBL株对监测药物的耐药率均高于非产ESBL株。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为10.4%。不动杆菌属（鲍曼不动杆菌占95.0%）对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为79.0%和78.2%。结论2016年该医院分离的革兰阴性杆菌耐药情况严重，肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率呈上升趋势，应引起重视。

细菌耐药性； 耐甲氧西林葡萄球菌； 超广谱β内酰胺酶

Abstract: ObjectiveTo investigate the distribution and antimicrobial resistance profile of the bacterial strains isolated from Chuzhou First People’s Hospital in 2016.MethodsThe bacterial isolates were identi fi ed and tested for antibiotic susceptibility using MicroScan WalkAway 96 PLUS bacterial identi fi cation system. All the data were analyzed with WHONET 5.6 software.ResultsA total of 1 441 clinical isolates were collected during 2016, of which gram-positive organisms accounted for 28.4% and gram-negative organisms 71.6%. Prevalence of methicillin-resistant strains inS. aureus(MRSA) and coagulase negativeStaphylococcus(MRCNS)was 37.5% and 83.0%, respectively. AllStaphylococcusisolates were susceptible to vancomycin, daptomycin and linezolid. AllE. faeciumisolates were susceptible to daptomycin, vancomycin and linezolid. One strain (2.6%) ofE. faecaliswas resistant to linezolid. AllStreptococcus pneumoniaestrains (mainly isolated from children) were susceptible to penicillin. The prevalence of extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) positive strains was 49.1%, 24.2% and 62.5% inE. coli, Klebsiella(K. pneumoniaeandK. oxytoca) andP. mirabilis, respectively. The resistance rate of ESBLs-positive strains was higher than ESBLs-negative strains to most antibiotics. The percentage of theP. aeruginosaisolates resistant to meropenem and imipenem was all 10.4%. The percentage ofAcinetobacter(A. baumanniiaccounted for 95.0%) strains resistant to imipenem and meropenem was 79.0% and 78.2%.ConclusionsThe situation of antibiotic resistance is still very serious in 2016 in this hospital. The prevalence of carbapenemresistantK. pneumoniaeandA. baumanniiis still increasing,which is of great concern.

Key words:antimicrobial resistance; methicillin-resistantStaphylococcus; extended-spectrum beta-lactamase

随着广谱抗菌药物在临床上的大量使用以及不合理使用，导致细菌的耐药性日趋严峻，多重耐药（MDR）和广泛耐药（XDR）株日益增多，尤其是碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）检出率的增加，这些已成为全球关注的公共卫生问题。为此，现对我院2016年临床分离菌的分布及耐药性进行统计分析，报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1菌株来源 收集本院2016年1月1日－12月31日临床标本分离株，剔除同一患者同一部位的重复菌株，共分离病原菌1 441株。

1.1.2药敏纸片和培养基 药敏试验用的Mueller-Hinton（MH）琼脂购自法国生物梅里埃公司，补充药物纸片购自英国OXOID公司。

1.1.3质控菌株 质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212、大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603和铜绿假单胞菌ATCC27853，均购自卫生部临床检验中心。

1.2 方法

1.2.1菌株鉴定及药敏试验 所有临床分离菌株的鉴定和药敏试验均使用德国西门子公司的MicroScan WalkAway 96 PLUS全自动细菌鉴定仪及配套的NC50和PC33检测卡进行。补充药敏试验（头孢唑林、头孢曲松和厄他培南）采用纸片扩散法。药敏试验结果根据CLSI 2015标准判断[1]。

1.2.2耐甲氧西林葡萄球菌和产ESBL株的检测 应用MicroScan WalkAway 96 PLUS全自动细菌鉴定仪根据药敏结果自动判断耐甲氧西林葡萄球菌和产ESBL菌。

1.2.3MDR、XDR和CRE MDR是指对3类或3类以上的抗菌药物耐药；XDR指对所测的抗菌药物均耐药；CRE定义为对亚胺培南、美罗培南或多尼培南中任一种药物耐药者。

1.2.4统计分析 使用WHONET5.6软件对菌株分布和药敏结果进行统计分析。

2 结果

2.1 细菌及其分布

2016年共收集临床非重复分离株1 441株，其中革兰阳性菌409株，占28.4%，革兰阴性菌1 032株，占71.6%；住院患者分离株占98.2%，门诊患者分离株占1.8%；菌株主要来源于痰液等呼吸道标本、尿液、分泌物和血液，分别占50.9%（733株）、16.4%（236株）、10.8%（156株）和8.3%（119株）。痰液等呼吸道标本中分离菌主要为肺炎克雷伯菌175株（23.9%）、铜绿假单胞菌116株（15.8%）、金黄色葡萄球菌110株（15.0%）、鲍曼不动杆菌97株（13.2%）和大肠埃希菌87株（11.9%）；尿液标本中的分离菌主要为大肠埃希菌132株（55.9%）、屎肠球菌23株（9.7%）、粪肠球菌17株（7.2%）、肺炎克雷伯菌14株（5.9%）和凝固酶阴性葡萄球菌8株（3.4%）；分泌物标本中的分离菌主要为大肠埃希菌32株（20.5%）、金黄色葡萄球菌30株（19.2%）、凝固酶阴性葡萄球菌21株（13.5%）、肺炎克雷伯菌14株（9.0%）和粪肠球菌14株（9.0%）；血液标本中分离菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌47株（39.5%）、大肠埃希菌20株（16.8%）、金黄色葡萄球菌10株（8.4%）、肺炎克雷伯菌5株（4.2%）和粪肠球菌5株（4.2%）。主要菌株分布见表1。

2.2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率

2.2.1葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌中MRSA的检出率为37.5%，凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS的检出率为83.0%。葡萄球菌属细菌对达托霉素、利奈唑胺和万古霉素全敏感。见表2。

2.2.2肠球菌属 74株肠球菌属细菌中粪肠球菌39株，占52.7%；屎肠球菌29株，占39.2%；其他肠球菌6株，占8.1%。粪肠球菌对万古霉素和达托霉素全敏感，检出1株耐利奈唑胺粪肠球菌，耐药率为2.6%；屎肠球菌对万古霉素、利奈唑胺和达托霉素全敏感。见表3。

2.2.3 肺炎链球菌 共分离20株肺炎链球菌，全部对青霉素敏感，对红霉素和克林霉素的耐药率达95%，对甲氧苄啶-磺胺甲唑的耐药率为85%。见表4。

2.3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

2.3.1肠杆菌科细菌 大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌产ESBL的检出率分别为49.1%（157/320株）、24.2%（58/240株）和62.5%（30/48株）。产ESBL株对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类等抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBL株。大肠埃希菌对阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦和碳青霉烯类的敏感率均＞95%；克雷伯菌属对阿米卡星和碳青霉烯类的敏感率均＞80%；肠杆菌属细菌对氨基糖苷类和碳青霉烯类的敏感率均＞ 90%；变形杆菌属细菌对哌拉西林-他唑巴坦和碳青霉烯类全敏感，对阿米卡星、头孢他啶和头孢西丁的敏感率也均＞90%。见表5。

表1 2016年临床分离菌株的分布Table 1 Distribution of bacterial isolates in 2016

2.3.2不发酵糖革兰阴性杆菌 134株铜绿假单胞菌对阿米卡星和妥布霉素耐药率分别为3.7%和5.2%，对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为10.4%。119株不动杆菌属细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药率均＜45%，对其余监测抗菌药物的耐药率均＞70%。嗜麦芽窄食单胞菌对甲氧苄啶-磺胺甲唑和米诺环素100%敏感。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中MDR株检出率分别为14.2%和83.2%。不发酵糖革兰阴性杆菌的药敏结果见表6。

2.3.3CRE菌株的分布和药敏结果 本次监测中共检出CRE 60株，检出率为8.2%（60/729），其中肺炎克雷伯菌占73.3%（44/60）、大肠埃希菌占8.3%（5/60）、黏质沙雷菌6.7%（4/60）、雷氏普罗威登斯菌5.0%（3/60）、阴沟肠杆菌3.3%（2/60）、产气肠杆菌3.3%（2/60）；标本类型主要为痰液标本、尿标本、切口分泌物，分别占83.3%（50/60）、13.3%（8/60）、3.3%（2/60）；科室主要分布于ICU、呼吸科、神经外科，分别占45.0%（27/60）、28.3%（17/60）、8.3%（5/60）；患者年龄均大于 60 岁。60株CRE对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素的敏感率分别为41.7%、28.3%和31.7%，对甲氧苄啶-磺胺甲唑的敏感率为75.0%，对四环素的敏感率为56.7%，对喹诺酮类抗菌药物全耐药。

表2 葡萄球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility ofStaphylococcusstrains to antimicrobial agents（%）

表3 肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility ofEnterococcusisolates to antimicrobial agents（%）

表4 肺炎链球菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Susceptibility ofS. pneumoniaeto antimicrobial agents（%）

3 讨论

本次监测结果显示，2016年我院共分离出非重复菌株1 441株，与本院2015年1 499株相比[2]，临床总分离菌株数略有下降。从细菌的分布看，2016年细菌分离前5位的分别是大肠埃希菌、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和不动杆菌属，与2015年CHINET细菌耐药性监测网略有不同[3]，CHINET前5位细菌是大肠埃希菌、克雷伯菌属、不动杆菌属、金黄色葡萄球菌和肠球菌属。

本次分离葡萄球菌中MRSA和MRCNS的检出率分别为37.5%和83.0%， MRSA的检出率低于2015年CHINET细菌耐药性监测网的42.2%和上海市细菌耐药性监测的46.9%[3-4]；统计显示，MRSA对监测药物的耐药率明显高于MSSA，葡萄球菌属细菌对达托霉素、利奈唑胺和万古霉素全敏感。肠球菌属中以粪肠球菌和屎肠球菌为主，其中粪肠球菌的分离率高于屎肠球菌，与2015年本院相比，粪肠球菌的分离率有所增加，屎肠球菌对常用抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌，检出1株耐利奈唑胺的粪肠球菌。本院2016年检出的肺炎链球菌对青霉素全敏感。

肠杆菌科细菌中，大肠埃希菌和克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）产ESBL的检出率分别为49.1%和24.2%，与2015年本院相比有所下降，奇异变形杆菌产ESBL的检出率为62.5%，有所上升。本次监测结果显示，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类敏感性较好，但CRE的检出率为8.2%，其中肺炎克雷伯菌耐药株检出率为19.3%（44/228），大肠埃希菌耐药株检出率为1.6%（5/320），肠杆菌科细菌耐药株检出率为5.3%（4/75），标本以呼吸道标本为主，科室以ICU和呼吸科为主，可能存在耐药克隆株的传播，需进行严密监测。本院CRE的检出率低于2015年CHINET的数据，但仍相对较高。由于CRE菌株，尤其是耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌，检出率呈现逐年增加的趋势，给临床治疗带来了极大困难。大量研究表明，CRE菌株对多种抗菌药物高度耐药，本结果显示，CRE对多数抗菌药物高度耐药，对甲氧苄啶-磺胺甲唑和四环素的耐药率为25.0%和43.3%，对其余抗菌药物的耐药率均较高。多黏菌素对CRE有效，但有报道随着治疗的进展可能出现对多黏菌素的继发性耐药[5-6]。为了有效控制CRE的传播，应该加强医护人员手卫生、加强接触隔离制度、加强环境表面的消毒，同时对重点科室（比如ICU）的患者进行主动筛查，必要时可以通过分子检测了解传播途径，为阻断

其传播提供依据。

表5 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility ofEnterobacteriaceaespecies to antimicrobial agents（%）

表6 不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 6 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（%）

本次监测结果显示，铜绿假单胞菌与过去2年相比[2，7]，对妥布霉素的耐药率大幅下降，耐药率仅为5.2%；其次对亚胺培南和美罗培南的耐药率也有所下降，耐药率均为10.4%；对其余监测抗菌药物的耐药率也都有所下降；但随着抗菌药物的使用，该菌对抗菌药物的耐药性会很快发生变化，临床治疗该菌感染时要密切注意。不动杆菌属细菌对常用抗菌药物的耐药率较高，对妥布霉素、阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为39.5%、40.3%和42.9%，对其余监测抗菌药物耐药率均＞79%。鲍曼不动杆菌主要来自于呼吸道标本和ICU，其多重耐药率检出较高，2016年为83.2%高于2015的本院（76.7%）数据。嗜麦芽窄食单胞菌对甲氧苄啶-磺胺甲唑和米诺环素全敏感，对左氧氟沙星的敏感率达95.7%，对头孢他啶的敏感率仅为39.1%。

综上所述，本院分离菌以革兰阴性杆菌为主，其中呼吸科和ICU的MDR菌和XDR菌检出率较高，应引起高度重视。为有效控制MDR和XDR的产生和传播，必须将抗菌药物的临床应用管理和医院感染防控措施相结合。

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Surveillance of antimicrobial resistance in the strains isolated from Chuzhou First People’s Hospital in 2016

XU Tiantian, XIE Ruiyu. （Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First People's Hospital, Chuzhou Anhui 239000, China）

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 05-0562-06

10.16718/j.1009-7708.2017.05.015

2017-02-14

2017-06-04

安徽省滁州市第一人民医院检验科，安徽滁州 239000。

徐添天（1985—），女，本科，检验师，主要从事临床检验诊断方面的研究。

徐添天，E-mail：45736443@qq.com。