4种地区野葛花粉活性及测定方法的比较

郭坤元　张宇　王华　穆森　何美军

摘要：本研究利用TTC、1-K1和醋酸洋红染色法对湖南桃源、江西横峰、四川阿坝、湖北恩施4个地区的野葛花粉活性进行了测定，结果发现TTC法和醋酸洋红染色法比较适合野葛的花粉染色，而I-KI法则不太适合。另外，在4个地区中江西横峰的花粉活性比较高，四川阿坝的花粉活性比较低。

关键词：野葛；花粉活性；测定方法

野葛为豆科葛属植物，富含淀粉及异黄酮类物质，具有降血压，防癌圈和保护肝功能等作用。本研究对野葛花粉活力进行了测定，比较它们在不同测定方法下的活性差异，希望为后期的工作提供研究基础。

1材料和方法

1.1材料

选用收集到的湖南桃源、江西横峰、四川阿坝、湖北恩施4个不同地区的野葛为实验材料。选择盛花期间的藤条带回实验室，作为实验材料备用。

1.2测定方法

采用TTC法、I-KI法和醋酸洋红染色法进行花粉活性测定，具体参照《植物生理生化试验原理和技术》，染色后置于显微镜下观察，试验重复3次以上。

2结果和分析

2.1TTC法测定花粉活性

试验结果发现，4个不同地区野葛花的花粉活力均随着时间的延长，经历了从弱变强再变弱这么一个过程，且花粉活力在0-20d内呈现出上升的趋势，最高染色率约为35%，在20-35d内花粉活力保持在一个最高水平，在第35d后，花粉活力开始下降。在4个地区中，江西横峰的花粉活力最高，其次为湖南桃源和湖北恩施，而四川阿坝的花粉活力最低。在染色的过程中，花粉细胞出现了红色、淡红色和无色3种颜色反应，且随着时间的延长，细胞的染色率逐渐下降。

2.2I-KI法测定花粉活性

I-KI法测定野葛花花粉活性时也经历了从弱变强再变弱这样一个过程，但是我们发现，4个地区的花粉染色率均不高，活力最高时的染色率约为8%左右，远低于TTC法的染色率，且在染色过程中，理论上应该出现蓝色和褐色2种反应颜色，但是在显微镜下没有观察到明显的颜色变化，因此I-KI法不适合测定野葛花的花粉活力。

2.3醋酸洋红染色法测定花粉活性

醋酸洋红染色法也可以较好地测定出野葛花的花粉活力，4个不同地区的花粉活力同样呈现出从弱变强再变弱的过程，且江西横峰的花粉活力依然最高，约为30%左右，而四川阿壩的花粉活力还是最低。

3讨论

测定花粉活性的方法有很多种，常用的有TTC法、I-KI法和醋酸洋红染色等方法。本研究利用以上3种方法对4个不同地区野葛花粉活性进行了比较，结果发现TTC法和醋酸洋红染色法比较适合野葛的花粉染色，而I-KI法则不太适合野葛的花粉染色。在4个地区中，发现江西横峰的花粉活性最高，四川阿坝的花粉活性最低，分析可能是因为四川阿坝位于四川西北部，与青海、甘肃交界，海拔较高，而江西横峰位于江西省东北部，海拔较低，不同地理条件下采集的品种之间存在着一定的地理差异，这种地理条件差异造成花粉活性之间也存在着差异。