赤链蛇达氏腺提取液对小白鼠致死现象的探究

邱思语 史静耸

（1湖北省沙市中学 湖北荆州 434000 2中国科学院脊椎动物起源与人类演化重点实验室 北京 100044 3中国科学院大学 北京 100049）

赤链蛇（Lycodon rufozonatum）在我国分布广泛，数量较多，其性情凶猛，攻击性强，善扑咬。然而，对于赤链蛇是否为毒蛇，不同学者的观点不尽相同。例如《本草纲目》记载：“赤楝，红黑节节相间，俨如赤楝、桑根之状，不甚毒。”其概念提出较为模糊，认为其有毒但毒性不大［1］。吴卯斌则报道赤练蛇上唇鳞皮下发现毒腺（达氏腺），且初步观察到该蛇上颌齿最后2枚无沟也无管，却呈刀刃状，认为其属后毒牙，并初步测定了产毒量（干毒）［2］。吴卯斌次年又报道了2例赤链蛇咬伤案例，这2例案例中的咬伤患者局部有肿胀灼痛现象，其中1例口腔粘膜出现淤血点［3］。但上述观点在后续的研究中并未得到充分关注，例如赵尔宓所著《中国蛇类》和《中国动物志》爬行纲第3卷中，描述链蛇属为无毒蛇［4-5］。

根据本研究所走访调查的部分饲养者描述，赤链蛇咬伤与一般无毒蛇咬伤不同：往往见有多个细小的牙痕，少量出血，伤口周围发红，痛感相对明显，咬伤后次日仍有少许血渗出，但未发现无全身症状。但有部分饲养者被咬伤后出现过敏症状，皮肤上有大面积红疹。

为何有的人被咬伤后会出现中毒症状？是由于赤链蛇吃过有毒的食物（如蟾蜍等），还是由于被赤链蛇口腔中细菌感染，亦或是由于其本身存在一定的未知的毒性？被咬伤的饲养者表示，从未对所饲养的赤链蛇投喂过蟾蜍等自身含有毒素的食物，因此可初步排除食物所含有毒素引起的中毒反应。赤链蛇是否具有毒蛇所具备的毒牙、毒腺？本研究将通过解剖观察及相关的实验探究其是否存在毒性，并初步讨论其毒器结构和注毒机理。

1 研究材料

亚成体赤链蛇（Lycodon rufozonatum）4条，雌、雄各2条，平均肛吻距（53±6）cm。 产地湖北，2015年秋季起，自出壳开始饲养，至实验开始时，尚未成体。饲养过程中仅喂食乳鼠或泥鳅，而不投喂蟾蜍、雨蛙等有毒食物。

另从市场获取3个成年赤链蛇头部，用于头骨解剖工作。

健康小白鼠 10 只，重（55±1）g，编号 001～005为实验组，编号006～010为空白对照组。

实验仪器：烧杯、注射器、量筒、电子天平、手术刀、手术剪、镊子、数码相机、移液器、光学显微镜等。

试剂：生理盐水、无水乙醇、蒸馏水、氢氧化钠溶液（3‰）。

2 研究方法

1）上颌齿观察。用黄粉虫将蛇剩余组织啃噬掉大部分肌肉组织，用加热到70℃的氢氧化钠溶液浸泡后，得到洁净的头骨标本，光学显微镜进一步观察其上颌骨牙齿结构。

2）注毒实验。先后挤压4条实验用活体赤链蛇上颌两侧（达氏腺位于第5～6枚眶上鳞处），从得到乳白色至黄色的乳浊状达氏腺分泌液，用移液器吸取体后，转移至无菌离心管中，累积达到0.03 mL后，注入生理盐水稀释至1%。

取 5只小鼠（001～005号，实验组）分别用1 mL注射器从右后腿内侧皮下注入稀释后的液体0.1 mL，再取等量生理盐水注入另5只小鼠（006～010号，对照组）中，连续观察小鼠的反应并纪录。

3 结果

3.1 解剖观察 从赤链蛇的口腔里可以清晰的看到上颌左右各有2列细小的尖牙（分别为翼骨齿、腭骨齿和上颌齿），这些牙齿向内倾斜，轻微弯曲，其中上颌齿靠近口腔后侧1枚相对较大。继而进行下一步解剖。可以观察到1个卵圆形腺体（达氏腺），直径约 2 mm，位于眼后下方，第5、第6枚上唇鳞所在的皮下，即较大的上颌齿上方。切下赤链蛇达氏腺，可见在其周围有白色细纤维状不明组织（图1）。

图1 赤链蛇头部解剖（达氏腺位于增大的上颌齿上方）

图2 赤链蛇的头骨侧视图（示特化上颌齿）

图3 显微镜下的赤链蛇特化上颌齿（目镜12.5×；物镜4×）

图2、图3可见赤链蛇特化的上颔齿。在低倍显微镜下可清晰观察到外侧牙表面光滑，与上颔骨紧密相连，不易松动，且既无沟也无管，但是其基部宽大，末端尖锐，背侧厚重，而内侧（向咽喉侧）薄而锋利，总体上呈刀刃状，可能具有一定的切割和穿刺作用。

3.2 小鼠注毒观察 所有实验组小鼠在被注射后，活动量明显增加，变得兴奋。约1 min后活动量恢复正常，右后腿注射处皮肤发红，除时常啃咬被注射的右后腿外，其余活动正常。约5 min后，小鼠的右腿（注射处）曲起，不能正常活动。将小鼠放在不光滑的斜面上，小鼠明显出现重心不稳的现象。10 min后，小鼠的活动量开始降低，继而抽搐，精神溃散，半趴于地面不动。小鼠生命体征渐渐衰弱，约2 h后第1只小鼠死亡，其死亡状态为身体扭曲蜷缩，眼睛半合。

其中一只小鼠（编号005）并没有立即死亡，注射后约4 h，活动恢复正常，但不进食，精神萎靡，1 d后转为亢奋状态，开始疯狂啃咬物品。约于注射36 h后死亡。

注入生理盐水的小鼠（编号006～010，空白对照组）无不良反应，一切生命活动正常。

4 结论

本研究采用上颌骨解剖观察及注毒实验的方法，初步证实赤链蛇的上颌骨后侧毒牙有一定的特化现象，增大、并具有刀刃状结构，而赤链蛇具有达氏腺，其达氏腺的提取液注射到小鼠体内有明显的致死作用。这说明，赤链蛇也属于一种后毒牙毒蛇，应引起人们的重视和防范。

5 讨论

本实验初步得出结论，赤链蛇达氏腺提取物对小鼠确切的注射致死作用，但其具体的针对小鼠的半数致死量（LD50）等精确数值还有待进一步测定。解剖发现，其毒器并不发达，有别于其他沟牙、管牙毒蛇，靠近达氏腺的上颌齿并没有发现用以输送毒液的沟或管状结构。在实验中，挤压蛇上颔牙后部腺体时，即可渗出乳色液体。因此可以推测蛇是在吞咬猎物的过程中，通过最后2枚特化的上颔齿造成伤口，以便毒素渗入猎物的体内，从而产生中毒反应。而这种中毒反应仅发生在部分人身上，可能是由于赤链蛇的特化牙齿靠后，咬人时不便发挥作用的缘故。因此，在野外工作和饲养、研究中应多加注意，避免咬伤事件发生。

近年来的系统学研究发现赤链蛇属与白环蛇属关系较近，并建议原链蛇属（Dinodon）并入白环蛇属（Lycodon），而原白环蛇属也一直被认为是无毒蛇。本研究的结果也提示了原白环蛇属可能也存在类似的毒器结构，有待今后通过更多的解剖实验深入了解［6］。

鉴于赤链蛇毒液的分泌不同于其他沟牙、管牙毒蛇，在今后的研究中，可通过组织切片等方式进一步从微观的角度观察其结构，以探究毒液分泌的机理。

本研究证明赤链蛇的达氏腺可自行分泌有毒物质。至于其在野外常捕食的蟾蜍等有毒两栖类的毒素是否可以为其利用，还有待进一步探究。