黑果腺肋花楸的组织培养快繁技术

马冬菁

（辽宁省林业科学研究院，辽宁沈阳 110032）

黑果腺肋花楸的组织培养快繁技术

马冬菁

（辽宁省林业科学研究院，辽宁沈阳 110032）

为建立黑果腺肋花楸高效的离体再生体系，对其组织培养快繁技术进行系统研究。结果表明：以茎尖和幼嫩茎段为外植体，最佳诱导培养基为MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1，诱导率均在90%以上；最佳增殖培养基MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1，增殖系数达9.0；最佳生根培养基为1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1，生根率达100%。

黑果腺肋花楸；组织培养；快速繁殖

黑果腺肋花楸Aronia melanocarpa系蔷薇科腺肋花楸属落叶灌木，浆果，果实甜酸略微涩，富含黄酮、花青素和多酚等物质，其提取物对治疗心脏病、高血压等心脑血管疾病有特效。在欧美和东亚地区，该树种在园林绿化方面的应用非常广泛；由果实加工的药品、保健饮料和食品在市场上非常普及和流行。该树种适应性强、结果早、经济价值高，无论作为特种经济林栽培，还是用于园林绿化，都具有广阔的市场前景。因此，开展该树种的组织培养快繁技术研究，为该树种的快速开发推广奠定了技术基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

辽宁省林业科学研究院凤城苗圃引进栽植的2～3年生黑果腺肋花楸扦插苗，剪取幼嫩枝条作为外植体。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体的消毒处理

将外植体去掉叶片，用清水冲洗2～3 h；剪取黑果腺肋花楸的茎尖和带腋芽的茎段部位，切割成长3～5 cm的材料；先用稀释15倍的洁尔灭溶液浸泡3 min，再用流水冲洗30 min左右；置于超净工作台上用70%的酒精加两滴土温20消毒40 s，用无菌水冲洗3次后，再用浓度0.1%HgCl2浸泡5～7 min，无菌水冲洗5次后放在培养皿中，切成1.0～2.0 cm的单芽备用。

1.2.2 培养基的筛选

诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1；继代培养以MS为基础培养基，分别添加 6-BA(0.5、1.0 mg·L-1)和 NAA(0.1、0.2、0.3、0.5 mg·L-1)共8个处理，各接种15个单芽茎段，培养30 d后统计不同激素浓度对增殖效果的影响；壮苗培养基为6-BA0.15 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1；生根培养基以1/2 MS为基础，添加生根粉ABT（2、4、6 mg·L-1）、IBA(0.1、0.2、0.5 mg·L-1)和NAA(0.1、0.2、0.5 mg·L-1)共12个处理，20 d后观察生根情况，统计生根率和生长状况等指标。上述培养基均添加蔗糖30 g·L-1，琼脂粉6 g·L-1，pH值5.8。培养温度(25±2)℃，每日光照16 h，黑暗8 h，光照强度为2 000～2 500 lx。

1.2.3 生根苗的驯化移栽

当试管苗长至5 cm左右、苗根长1.5 cm时，把生根瓶苗放在室内自然光下炼苗2～3 d，打开封口膜，控制温度在15～26℃、湿度≥60%，向瓶内喷少量水，瓶苗叶片湿润即可，使瓶苗接触有菌环境；2 d后将生根苗从瓶中取出，用自来水冲洗净根部培养基，以避免移栽后烂根；然后将组培苗移栽到用0.1%高锰酸钾消毒过的装有细河沙和珍珠岩（2∶1）的育苗穴盘中，喷施10%(体积浓度)的蒸腾抑制剂[1]，遮荫、浇水，保持湿度70%以上，光照1 500～2 000lx，20 d后揭开覆盖物，成活率达90%以上。

2 结果与分析

2.1 芽的诱导分化

黑果腺肋花楸不同的取材部位在诱导培养基上接种10 d后，芽开始萌发，茎尖生长较快，20 d后芽可伸长至2～3 cm。对不同取材部位的芽诱导情况进行了统计（表1），茎尖和幼嫩茎段的芽诱导率均在90%以上[2]。

表1 不同取材部位对黑果腺肋花楸芽诱导分化的影响

2.2 不同激素浓度配比对黑果腺肋花楸芽继代增殖的影响

不同的激素浓度对黑果腺肋花楸芽的生长有一定的影响。随着激素水平的提高，芽的长势和增殖都在逐渐提高，当6-BA浓度1.0 mg·L-1、NAA浓度0.3 mg·L-1时，逐渐出现玻璃化现象，茎芽的生长质量下降（表2）。而当6-BA浓度为1.0 mg·L-1，NAA浓度为0.2 mg·L-1时增殖效果最好，增殖系数达到9.0。

表2 不同激素浓度对黑果腺肋花楸芽继代增殖的影响

2.3 不同激素浓度对黑果腺肋花楸生根的影响

将组培苗壮苗培养后，接种到生根培养基上，10 d左右茎段基部产生根原基，20 d后长出4～6条白色嫩根，平均根长约3.5 cm，生根率达100%。由表3和表4可以看出，培养基1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1的生根效果最好，根系发达，且苗长势好。

表3 IBA和NAA配比对黑果腺肋花楸苗生根的影响

表4 ABT浓度对黑果腺肋花楸苗生根的影响

3 结 论

以黑果腺肋花楸茎尖和幼嫩茎段作为外植体，70%的酒精加两滴土温20消毒40 s、0.1%HgCl2消毒5～7 min，接种在培养基MS+6-BA 1 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1中的诱导率均在90%以上。最佳增殖培养基为MS+6-BA 1 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1，增殖系数达9.0，苗木生长旺盛，基部产生大量丛生芽。最佳生根培养基为1/2MS+ABT 6.0 mg·L-1，生根效果显著，生根率达100%，根系发达，苗木粗壮。生根苗驯化后移栽到装有基质细河沙和珍珠岩（2∶1）的育苗穴盘中，成活率在90%以上。

［1］叶景丰.美国白蜡组培快繁技术研究[J].林业实用技术，2010，（11）：30-31.

［2］陈罡.贴梗海棠组培快繁技术研究[J].北方园艺，2008，（8）：186-187.

（责任编辑：张素清）

S793.9

A

1001-1714（2017）05-0034-02

2017-03-30

马冬菁（1979-），女，高级工程师，主要从事林木组培技术研究。E-mail：413577543@qq.com。