阴道炎五联检验法在白带清洁度、病原体诊断中的应用价值

马 勇

河南省信阳职业技术学院附属医院(464000)

阴道炎五联检验法在白带清洁度、病原体诊断中的应用价值

马 勇

河南省信阳职业技术学院附属医院(464000)

阴道炎是妇科常见病、多发病，具有病因复杂、发病率高等特点。临床评价女性泌尿生殖道健康水平多采用白带常规检查。白带常规检查主要包括泌尿生殖道有无感染、明确泌尿生殖道感染病原体种类[1]，方法多选用显微镜下悬滴法，其具有用时短、操作简单等优点，但对检验医师诊断水平依赖性较大，因此对病原体类型的诊断灵敏度、特异性相对较低[2]。在快速诊断技术的发展下，阴道炎五联检验法在病原体诊断中的应用越来越多，该检验法具有准确率高的优点，逐渐有取代传统悬滴法趋势。本研究旨在探讨阴道炎五联检验法在白带清洁度及病原体诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取本院2016年1月-2017年1月接诊的800例疑为阴道炎的患者作为研究对象。年龄34.8±4.1(19～51)岁，病程3.6±2.3(1 ～12)周；已婚511例，未婚289例。纳入标准：有不同程度的阴道瘙痒、白带增多、异味等症状；采集阴道分泌物后2h内完成检验；对本次研究知情了解，签署知情同意书。排除标准：哺乳期、妊娠期女性；子宫器质病变者；阴道用药者；检验前3d有过性生活史者；月经经期者；入组前3个月内应用过相关药物治疗者；合并其他炎症疾病者。

1.2取材及检验

患者取膀胱截石位，暴露宫颈口，擦拭宫颈口多余分泌物，将无菌棉签插入宫颈口，在阴道后穹窿或后位处采集标本，将棉签朝着同一方向旋转3～5圈，使阴道分泌物充分附着在棉签上，分泌物附着以清晰可见为准。共采集两份，分别用于常规镜检和阴道炎五联检验。

1.2.1常规镜检使用无菌棉拭子将阴道分泌物标本在载玻片上涂抹均匀，盖上盖玻片进行标本固定。使用革兰氏染色法染色，在显微镜下观察标本中各种细菌(霉菌、滴虫、念珠菌、加特纳菌等)的数量及白带清洁度，做好记录。

1.2.2阴道炎五联检验将采集到的阴道分泌物放置在盛有40μl稀释液的试管中稀释，挤压棉签并均匀晃动试管，使阴道分泌物充分融入到稀释液中。将稀释后的标本溶液分别滴入五联试剂盒的5个盒孔中。在盒孔中置入唾液酸苷酶、显色液，置于37℃的恒温环境中反应10～15min。在盒孔中滴入终止液、乙酰氨基葡萄糖苷酶终止反应。检测标本的pH值、白细胞酯酶、脯氨酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、唾液酸苷酶、过氧化氢水平以及病原体类型、白带清洁度，并做好记录。

1.3判定标准

1.3.1常规镜检镜检可见阴道毛滴虫、卵圆形孢子、芽生孢子或假菌丝，即可判定为滴虫性阴道炎或念珠菌性阴道炎。白带清洁度根据镜下上皮细胞、白细胞、杂菌、阴道杆菌数量综合判定，结果分为：①Ⅰ度，阴道杆菌居多、有大量上皮细胞；②Ⅱ度，部分阴道杆菌、上皮细胞，还有部分杂菌、脓细胞；③Ⅲ度，少量阴道杆菌，大量杂菌和脓细胞；④Ⅳ度，无阴道杆菌，基本上都为杂菌和脓细胞。Ⅰ～Ⅱ度为正常，Ⅲ～Ⅳ度为异常。

1.3.2五联检验过氧化氢检验呈淡黄色或无色判定为阳性；白细胞酯酶检验呈蓝色判定为阳性，呈浅淡色或不显色判定为阴性；唾液酸苷酶检验呈淡红色、红色、紫红或蓝色、黑褐色判定为阳性，呈桔黄色或不显色判定为阴性；乙酰氨基葡萄糖苷酶检验呈淡黄色、黄色判定为阳性，呈浅淡色或不显色判定为阴性；若pH≥4.8判定为滴虫性阴道炎，若pH≤4.6判定为念珠菌阴道炎。

1.4统计学方法

数据处理用SPSS20.0软件，计数资料(%)比较用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1阴道环境

白细胞酯酶、脯氨酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、唾液酸苷酶、过氧化氢阳性的检出率及pH>4.7的检出率五联检验法均高于常规镜检法阳性率(P<0.05)。见表1。

2.2病原体

念珠菌、加纳特菌感染率及总感染率检出率五联检验法均高于常规镜检(P<0.05)，但滴虫、白细胞、其他病原菌及混合感染率两种方法检出率无差异(P>0.05)。见表2。

表1 两种检测方法测得的阴道环境结果对比[例(%)]

表2 两种检测方法病原体检测结果比较[例(%)]

2.3白带清洁度

白带清洁度异常检出率五联检验法[44.25%(354/800)]与常规镜检[41.25%(330/800)]无差异(χ2=1.420，P>0.05)。见表3。

表3 两种检验方法测得的白带清洁度比较(例)

3 讨论

细菌、真菌、滴虫等是引起阴道炎的主要病原体。临床上广泛使用的悬滴镜检法在白带常规检查中具有操作简单、方便快捷等优点，但对真菌、滴虫感染引起的阴道炎有较高的检出率，而对细菌感染引起的阴道炎敏感性并不高[3]。细菌性阴道炎是临床最为常见的一种女性下生殖道感染疾病，在阴道分泌物异常者中有近40%的人会发生细菌性阴道炎，高于真菌和滴虫感染引起的阴道炎发病率[4]。因此，采用传统镜检法进行白带常规检查诊断阴道炎，易发生细菌性阴道炎漏诊。临床有必要寻找一种特异性、敏感性更高的细菌性阴道炎检验方法。

3.1五联检验法的临床检验应用

随着酶学检验法的不断进步、发展，酶学法被逐步用于白带常规的检验。阴道炎五联检验为阴道分泌物检验开辟了一条新的思路，阴道炎五联检验法是一种酶学检验法，其主要通过检测5种与致病菌感染密切相关的酶类(过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、凝固酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶)浓度来判定是否发生了细菌性阴道炎[7]。截止目前国内外已有多篇文献报道证实了其优越性。张爽等[6]分别采用五联检试剂盒和常规镜检法对232份白带标本进行检测，结果显示五联检试剂盒的阴道清洁度检验结果与常规镜检法的符合率为84.5%，念珠菌阴道炎检验符合率为94.8%，滴虫性阴道炎检验符合率为97.8%，细菌性阴道炎检验符合率为95.3%。对于滴虫、真菌、阴道清洁度，五联检的漏诊率更低；对于细菌性阴道炎，五联检的准确率、阳性检出率则更高。

3.2五联检验法检测原理

过氧化氢是阴道有益菌群的代谢产物，通过测定过氧化氢浓度可以反映出阴道有益菌群情况，若过氧化氢检测结果呈阴性，表明乳杆菌水平较高，阴道菌群状态良好，反之则说明阴道菌群失调，可能发生了感染。白细胞酯酶是由白细胞分泌的特异性酶类，通过检测白细胞酯酶可以判定白细胞的有无，但由于白细胞酯酶近存在中心粒细胞内，所以其不能判定出是否存在其他类型的白细胞，仅能用于炎性细胞的诊断。阴道分泌物标本检出白细胞酯酶阳性，仅能说明阴道内存在着炎症情况，但不能具体说明是哪一类病原引起的炎症。唾液酸苷酶是由部分厌氧菌及加德纳菌分泌产生的，阴道内菌群失调的情况下，产生唾液酸苷酶的致病菌会进入到阴道内膜进行繁殖，若唾液酸苷酶水平>7U/ml，则可引发感染性疾病，故临床将这一临界值作为判定是否发生细菌感染的诊断标准。乙酰氨基葡萄糖苷酶能够对作用于内膜基底膜中的多糖成分，使其发生水解，其可作为阴道有无损伤的判定指标[7]。另一方面，乙酰氨基葡萄糖苷酶还会参与炎症因子的转移与侵袭，所以检测乙酰氨基葡萄糖苷酶水平还可作为判定炎症因子转移侵袭状态的重要指标。五联检验法对上述五项指标同时进行检测，能够有效提高阴道炎的诊断准确性，结果不易受到主观因素的影响，具有准确性高、操作方便、出结果快速等优势。

3.3五联检验法具有的优势

本次研究结果显示，与传统镜检法相比，五联检验法对白细胞酯酶、脯氨酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、唾液酸苷酶、过氧化氢阳性的检出率及pH>4.7的检出率更高。在病原菌诊断方面，五联检验法检出的念珠菌、加纳特菌感染率及总感染率均高于常规镜检。而在滴虫、白细胞、其他病原菌及混合感染等检出率方面两种方法未见差异。这一结果与国内外多篇文献报道[8-9]结果相符。说明阴道炎五联检验法对细菌性阴道炎病原体的诊断特异性更高，而对非细菌性阴道炎病原体的诊断准确性与传统镜检法相当。在白带清洁度方面两种检验法未见异常检出率差异。因此，总体说来，与传统镜检法相比，五联检验法对阴道炎的诊断准确率更高，不仅可用于诊断阴道炎病原体，还可用于评估白带清洁度，值得推广应用。

[1] 潘万俊,陆岩平,毛菊秀，等.522例女性阴道分泌物检验结果分析[J].国际检验医学杂志,2014,(11):1496-1497.

[2] 于霞,蔡晓燕,吴友惠，等.阴道炎五联检联合显微镜检查对常见阴道病的诊断价值[J].国际检验医学杂志,2014,(11):1405-1406,1409.

[3] 张希同.阴道炎五联检测法与湿片镜检法在阴道分泌物化验中的结果比较分析[J].中国保健营养,2016,26(13):136.

[4] 李绍持.评价2种方法在检测阴道分泌物中的价值[J].国际检验医学杂志,2015,(11):1554-1556.

[5] 张爽,许安春,艾承锦，等.阴道炎五联检试剂盒的临床应用[J].检验医学与临床,2011,08(10):1170-1172.

[6] 徐健,谢元宏,周广，等.5186例阴道分泌物五联检检测结果的回顾性分析[J].四川解剖学杂志,2014,22(1):18-20.

[7] Levi AW,Harigopal M,Hui P et al.Comparison of Affirm VPIII and Papanicolaou tests in the detection of infectious vaginitis.[J].American Journal of Clinical Pathology: Official Publication of American Society of Clinical Pathologists,2011,135(3):442-447.

[8] Cartwright CP,Lembke BD,Ramachandran K,et al.Comparison of nucleic acid amplification assays with BD affirm VPIII for diagnosis of vaginitis in symptomatic women[J].Journal of Clinical Microbiology,2013,51(11):3694-3699.

[9] 金新华.阴道炎五项指标自动化检测法与阴道分泌物镜检方法的联合应用[J].实用医技杂志,2015,(2):168-170,171.

[责任编辑：董 琳]

10.3969/j.issn.1004-8189.2017.06.015

2017-03-06

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