田国彬/中国农科院哈尔滨兽医研究所
禽流感流行现状与防控措施
田国彬/中国农科院哈尔滨兽医研究所
流感病毒免疫原性主要由HA决定,H亚型相同即可起保护作用,N亚型对免疫保护也有一定作用。不同H亚型无交叉免疫保护作用。同一亚型的流感病毒的抗原性可能不同,因而使保护力存在差别,疫苗株与流行株抗原性差别越大,免疫效果越差。
1.禽流感病毒对热非常敏感。它对低温有很强的适应力,如果在零下20℃左右它可以存活几年;在4℃的气温下,最多可存活30~35 d;但在20℃的温度下只能存活7 d;在56℃下30 min可灭活;70℃下数分钟就能灭活;100℃下,1~2 min可灭活。
2.流感病毒最适PH为7.0~8.0。在PH3.0以下和PH10.0以上感染力迅速被破坏。
3.流感病毒可被紫外线灭活。但与此同时也易引起病毒的多重复活,故生产流感灭活疫苗时,不适用采用紫外线照射法。
4.流感病毒对有机溶剂敏感。因为流感病毒为一种带囊膜的病毒,故对乙醚、氯仿、丙酮等有机溶剂均敏感。20%乙醚4℃处理过夜,病毒感染力被破坏,等量乙醚作用2h,可使病毒裂解。1%高锰酸钾处理3 min,75%酒精5 min,1%碘酒和1%盐酸3min,1%甲醛30 min,流感病毒均被灭活。乳酸、醋酸、三乙烯甘醇均可使病毒灭活。故可用化学试剂浸泡、擦抹用具及蒸熏消毒空气。
2016年在广东、广西、浙江、江苏、上海、福建、山东、安徽等24个省市的267个市场、15个屠宰场、366个养殖场,共采集27 934份病原学样品,包括咽喉拭子和泄殖腔拭子25 701份,环境拭子2478份,样品来自1 199个鸡群、704个鸭群、72个鹅群,79个鸽群;野鸟粪便917份+1 020份。
共分离禽流感病毒1118株,病毒主要为H3(128株)、H5(320株)、H6(147株)和H9(415株)亚型。
1.疫苗免疫。
2.加强环境控制,改善兽医卫生条件。冬季注意通风、保暖、减少应激。减少或避免合并感染和继发感染。
2013年3月31日,国家卫生与计划生育委员会对外宣布上海和安徽有人感染H7N9亚型流感病毒。
2004年,世界上每年都有多个国家发生H5或H7亚型禽流感,其中在巴基斯坦、荷兰、加拿大、美国、埃及、丹麦、保加利亚、捷克、澳大利亚、朝鲜、日本、韩国、中国台湾等多个国家和地区的家禽或候鸟都发生或分离到H7亚型禽流感病毒。如:1985年的维多利亚发生的H7N7型的HPAI,虽未造成大流行,但仍耗资200多万美元用于扑灭和净化;1994年巴基斯坦暴发的H7N3亚型禽流感,死亡率超过63%,经济损失惨重。
近年也发生了多起禽源流感病毒感染人的事件。2003年至今,在越南、泰国、印尼、柬埔寨、中国,发病人数已经高达859人,死亡率高达453人。H7亚型临床表现主要为结膜炎与轻型的上呼吸道感染。
H7N9流感病毒主要依据病毒分离的宿主来命名。人感染H7N9流感的来源为家禽、野鸟、环境,人的H7N9流感并不完全与禽无关,但是尽管如此,过分强调甚至炒作接触家禽或食用家禽产品所带来的危害也是不正确的。
(1)基因来源相同,基因具有高度的同源性。人源和禽源分离的H7N9流感病毒的2个表现基因和6个内部基因均来自家禽或野鸟。
(2)人源和禽源病毒绝大部分都获得结合人型受体的能力。即具备感染人的能力,且试验的禽源病毒在小鼠体内复制变异导致致病性增强。不同点在于人源病毒复制滴度更高。
(3)对小鼠的致病力不同,大剂量人源病毒感染小鼠能使小鼠体重下降和死亡,而禽源的不能。
(4)禽源病毒与人源病毒在某些位点的氨基酸不同。H7N9病毒在人体复制获得关键的突变使其致病力增强。
在25个省的319个活禽市场和587个养殖场,采集了216个群体共26 500多份样品,根据禽流感病毒分离鉴定,优先关注H5和H7亚型。结果显示,319个活禽市场中有48个市场呈H5病毒阳性,分布在10个省市;160个市场H7N9阳性,分布在21个省市。587个养殖场中,5个养殖场病毒阳性,分布在4个省市;58个养殖场H7N9阳性,分布在16个省市。
2015-2016年在我国7个省份分离到了其它H7NX流感病毒,均为鸭源或环境样品分离,这些病毒对家禽呈低致病力,但对鸡群有一定的潜在感染风险,对哺乳动物的致病力逐渐加强。
3周龄SPF鸡接种106EID50剂量的禽源H7N9病毒(CK/S1053)后,第1周所有感染鸡血清转阳,之后持续升高,最高抗体水平平均滴度为6.4 log2,之后缓慢下降,至感染后63日抗体滴度仍然保持在4.8 log2。
H7N9流感病毒分为低致病性H7N9病毒和高致病性H7N9病毒。低致病性H7N9病毒的感染人群主要为老人和免疫力低下者,死亡率约在35%;高致病性H7N9病毒可感染任何年龄的人,死亡率在50%左右。与H5高致病性病毒相同,H7N9高致病性流感病毒对家禽和人都高度致死;但与H5病毒不同的是,H7N9高致病性病毒极有可能在人与人之间传播。
1.季节性明显。冬春多发,2014年7~10月份、2015年6~11月份,家禽H7N9病原学监测均为阴性。
2.宿主。绝大部分来源于鸡,另有少量来源于鸭、鸽和鹅等。开产后蛋鸡多发。
3.病毒来源。2016年以前对鸡均呈低致病性。2017年开始出现高致病性禽流感病毒,而且在部分鸡场出现。
4.病原学检测阳性和血清学阳性并不完全对应。病原阳性期短,而抗体能维持较长时间。
H7禽流感临床症状复杂,包括从无任何临床症状至极高的发病率和死亡率。
1.高致病性H7。其临床症状和剖检病变均为与高致病性H5类似。典型症状有鸡冠出血或发绀,头部和面部血肿,脚鳞出血,种鸡产蛋量突然大幅下降等。眼观可见消化道、呼吸道粘膜广泛充血、出血;腺胃粘液增多,腺胃乳头出血,腺胃和肌胃之间交界处粘膜可见带状出血;心冠及腹部脂肪出血等。
2.低致病性H7。一般与其他细菌或病毒混合感染出现一定的病症,类似H9病毒,出现呼吸道症状、生殖道病变、蛋鸡产蛋下降等。
实验室确诊可选用以下方法:
(1)HI试验。用H7抗原检测血清抗体(未免疫鸡群),阳性代表曾经或正在感染,按政策所有阳性鸡群需要处理。
(2)病原学检测。①试剂盒:反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量RT-PCR技术。②病毒分离和鉴定:H5和H7高致病性禽流感病毒分离及相关研究活动,必须经农业部批准,在指定的高生物安全级别实验室内进行操作。
当前疫苗免疫是非法的,因为阳性鸡群面临被扑杀,无人敢承认其疫苗中存在H7抗原。唯一可做的就是综合防控,降低其发病可能性。
避免散养、混养及开放式饲养,实行全进全出,推行优质肉鸡饲养模式的转型升级,减少发病机会。
做好检疫工作。引进任何日龄和用途的鸡时,应进行该病发病状况的调查,避免引进发病或携带病毒的鸡,必要时进行病原或血清学检测。
1.防止病原传入。
污道和净道分开,设有有效的消毒、防鸟防鼠设施等。禁止外来车辆、人员进入生产区。避免病毒通过运输鸡雏、商品肉鸡、淘汰鸡或鸡粪的车辆以及人员流动带入鸡场。
2.提供健康的生活环境。
(1)空气质量。质量差引起呼吸道疾病。NH3、CO2等有害气体浓度增加。氨气浓度增加后,严重损害或刺激局部黏膜组织,使之收到损害,引起粘膜下层淋巴免疫组织的破坏,导致局部粘膜屏障损害或缺失。
(2)应激反应。如冷风,使隐性感染者发病、传播。
1.定期进行全面的消毒。禽流感病毒对消毒药敏感,有效消毒药均可使禽流感病毒杀灭。一切进入生产区的车辆、人员及物品均须严格消毒。彻底清洗后消毒更佳,消毒药一般难以杀灭粪便等有机物包裹的病毒。
2.病死鸡随时无害化处理。怀疑发生高致病性禽流感时,应及时上报疫情,彻底消灭病原,防止病毒扩散。
1110制度即“一日一清洗,一周一消毒,一月一休市,过夜零存栏”。1110制度可有效消灭病毒,减少病毒扩散和重组的机会,减少对人的威胁。
百密或有一疏,尽管养殖场已经做了大量工作来严防禽流感病原的传入,但还是有可能会有一些禽流感病毒突破重重防线而进入养殖场,那么,用疫苗免疫则成为避免家禽因感染禽流感而造成巨大经济损失的最后一道防线。明确疫苗的种类和各自的特点,准确合理的是使用疫苗,对于防控禽流感具有十分重要的意义。
1.疫苗的分类。
(1)灭活疫苗。自然分离株研制的疫苗;重组病毒研制的疫苗(自然重组、利用反向基因操作技术重建)。
(2)减毒活疫苗。自然弱毒株研制;冷适应弱毒株疫苗(自然株培育或利用反向基因操作技术构建)。
(3)基因工程疫苗。①重组病毒疫苗(H5、H7、H9):禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗(H5亚型);新城疫、禽流感重组二联活疫苗(rL-H5株)。②亚单位疫苗(H5、H7)。③DNA疫苗(H5、H7),又称核酸疫苗。
此外还有RNA复制子疫苗、表位疫苗、复制缺陷型流感病毒灭活疫苗等。
2.现用于H5禽流感系列的疫苗。
(1)灭活疫苗:H5亚型二价灭活疫苗(Re-6株+Re-8株),推荐用于水禽(因目前未见水禽感染7.2分支病毒);重组禽流感病毒H5三价灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6+Re-7+Re-8株)推荐用于鸡等;禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)(仅用于水禽),毒株类似于Re-6株;禽流感H5+H9二价灭活疫苗。
(2)活疫苗:禽流感、新城疫重组二联活疫苗(rLH5-6);禽流感、新城疫重组二联活疫苗(rLH5-8),主要用于鸡。