水体理化因子对感染WSSV凡纳滨对虾存活时间的综合影响

黄海洪，曾丽娟，李朝云，刘小林，张运生，类延菊，杨品红，罗玉双

(1.湖南文理学院 生命科学学院，水产高效健康生产湖南省协同创新中心，环洞庭湖水产健康养殖及加工湖南省重点实验室，湖南省高校动物学重点实验室，湖南常德 415000；2.孟津县畜牧局，河南孟津 471100；3.西北农林科技大学 动物科技学院，陕西杨凌 712100)

水体理化因子对感染WSSV凡纳滨对虾存活时间的综合影响

黄海洪1，曾丽娟1，李朝云2，刘小林3，张运生1，类延菊1，杨品红1，罗玉双1

(1.湖南文理学院 生命科学学院，水产高效健康生产湖南省协同创新中心，环洞庭湖水产健康养殖及加工湖南省重点实验室，湖南省高校动物学重点实验室，湖南常德 415000；2.孟津县畜牧局，河南孟津 471100；3.西北农林科技大学 动物科技学院，陕西杨凌 712100)

凡纳滨对虾；白斑病毒(WSSV)；水体理化因子；多因素方差分析；多元回归分析

凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)，俗称南美白对虾，在世界各地被广泛养殖。该品种于1988年引入中国，现已成为海、淡水第一大对虾养殖品种[1]，2014年产量达158万t，约占中国虾类养殖总产量的53.9%[2]，是中国居民优质食物蛋白摄取的重要来源之一。但是，在凡纳滨对虾养殖快速发展的同时，也伴随着许多问题，其中尤以疾病问题最为严重。据估计，凡纳滨对虾养殖业由疾病造成的经济损失全球每年可高达10亿美元[3]。中国也经历类似的情况，随着养殖密度越来越高，养殖水环境持续恶化，病毒病和细菌病，如白斑病毒(WSSV)病和弧菌病，严重威胁着对虾的健康和品质，已经成为困扰凡纳滨对虾养殖业健康发展最为突出的问题[1,4-6]。

但是，水体理化因子众多，关系复杂，开展多因素试验比较困难。本文对文献报道的单因子试验数据进行收集并重新整理，利用统计软件进行多因素分析，再与文献中多因素试验的分析结果进行比较，探讨文献数据再利用的可行性，充分挖掘和利用文献数据，减少重复研究，以期为凡纳滨对虾疾病综合防控研究提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 试验方案

1.2 数据收集与整理

表1 不同盐度-N、pH及WSSV注射量条件下凡纳滨对虾的存活时间Table 1 The survival time of L. vannamei under different -N,pH and WSSV copies

(续表1 Continued table 1)

因素水平Factorslevel盐度/‰SalinityNH+4-N/(mg/L)NO-2-N/(mg/L)pHWSSV注射量/CopiesWSSVinjected平均存活时间/hMeansurvivaltime平均存活时间校正Modificationofmeansurvivaltime试验时长/hDuration校准时长/hStandardduration死亡率/%Cumulativemortality校正平均存活时间/hModifiedmeansurvivaltime31.030.000.0117.94645054.2206.0435.310054.231.030.000.0117.94645067.1206.0435.310067.131.030.000.0117.940206.0206.0435.30435.331.00.050.0117.94645080.5278.0435.310080.531.00.050.0117.94645079.8278.0435.310079.831.00.050.0117.94645084.1278.0435.310084.131.00.050.0117.940278.0278.0435.30435.331.00.0510.007.94645077.9278.0435.310077.931.00.0510.007.94645074.6278.0435.310074.631.00.0510.007.94645070.8278.0435.310070.831.00.0510.007.940278.0278.0435.30435.331.00.0520.007.94645075.3278.0435.310075.331.00.0520.007.94645077.5278.0435.310077.531.00.0520.007.94645088.9278.0435.310088.931.00.0520.007.940278.0278.0435.30435.331.00.0530.007.94645076.9278.0435.310076.931.00.0530.007.94645074.0278.0435.310074.031.00.0530.007.94645077.1278.0435.310077.131.00.0530.007.940278.0278.0435.30435.331.00.050.0115.006450371.9435.3435.322.2371.931.00.050.0115.006450324.6435.3435.333.3324.631.00.050.0115.006450365.9435.3435.325365.931.00.050.0115.000331.8435.3435.325331.831.00.050.0116.006450186.2435.3435.377.8186.231.00.050.0116.006450108.3435.3435.390.9108.331.00.050.0116.006450166.3435.3435.377.8166.331.00.050.0116.000406.3435.3435.310406.331.00.050.0117.00645053.8435.3435.310053.831.00.050.0117.00645054.6435.3435.310054.631.00.050.0117.00645065.4435.3435.310065.431.00.050.0117.000402.2435.3435.39.1402.231.00.050.0117.946450206.1435.3435.377.8206.131.00.050.0117.946450261.9435.3435.355.6261.931.00.050.0117.946450196.1435.3435.366.7196.131.00.050.0117.940435.3435.3435.30435.331.00.050.0119.00645010.4435.3435.310010.431.00.050.0119.00645014.9435.3435.310014.931.00.050.0119.00645025.1435.3435.310025.131.00.050.0119.0005.1435.3435.31005.1

1.2.2 数据标准化 陈勇贵[8]虽然没有单独研究WSSV注射量对凡纳滨对虾存活时间的影响，但每个单因子试验均设有试验组和对照组，试验组注射量均为每尾对虾6 450拷贝数 WSSV，对照组均注射PBS，即WSSV注射量为0。因此，本研究将WSSV注射量整理为2个水平，即6 450拷贝数和0拷贝数(表1)。

假设试验时长为te，试验对虾数量为n，死亡率为m，死亡对虾的平均存活时间为td，对虾最终存活数量为s，那么对虾死亡率(m)和平均存活时间(t0)计算公式为：

假设试验时长由te变为校准时长ts，那么平均存活时间(tm)计算公式为：

将td计算公式代入，可得平均存活时间的校准公式为:

tm=t0+(1-m)×(ts-te)

其中tm为校正后平均死亡时间，t0为平均存活时间，m为死亡率，ts为校准时长，te为原始试验时长。

1.3 数据分析

采用SPSS22.0(SPSSInc)软件对数据进行统计分析。多因素方差分析多重比较采用TukeyHSD方法，多元回归分析采用逐步线性回归方法。

2 结果与分析

2.1 多因素方差分析

表2 盐度-N、pH和WSSV注射量对凡纳滨对虾存活时间影响的多因素方差分析Table 2 Multivariate analysis of variance of effects of -N,pH and WSSV copies on survival time of L. vannamei injected with WSSV

2.2 多元回归分析

最后，建立pH和WSSV注射量与凡纳滨对虾存活时间关系的模型。该模型经方差分析(F=46.012，P<0.001)，表明pH和WSSV注射量与凡纳滨对虾存活时间具有线性关系。经逐步线性回归分析，pH和WSSV注射量与凡纳滨对虾存活时间回归方程如下：

Y=827.6-57.5X1-0.045X2(R=0.820)

3 讨 论

黄灿华等[11]研究显示，对虾在低盐环境中的耐受性比在高盐环境中的强。本研究分析结果也表明，只有盐度31.0‰与40.0‰对凡纳滨对虾存活时间影响差异显著，其他盐度之间差异均不显著，而文献[8]的单因子试验结果显示，20.0‰和31.0‰的影响差异不显著，但盐度10.0‰与20.0‰和31.0‰的影响差异极显著或显著，这可能与对单因子试验结果进行分析时未将有关数据纳入分析有关。单因子试验中，每个盐度水平均包括注射WSSV的试验组和注射PBS的对照组，但是在分析数据时，并未考虑对照组的数据[8]。而且，单因子试验中，盐度40.0‰的注射PBS的对虾出现死亡，说明盐度对凡纳滨对虾存活时间有影响，但分析结果时没有纳入这组数据，这组数据被当作异常数据剔除[8]，表明单因子试验具有一定的局限性，分析结果时没有综合考虑其他因素的影响。

综上所述，本文研究结果与文献中单因子和多因子试验结果均一致，而且克服单因子试验不能综合利用其他数据，以及多因子正交试验忽略交互作用的缺点，表明本研究的数据综合分析方法是可行的，而且能够对文献数据进行重新挖掘和利用，有利于减少重复研究，为凡纳滨对虾疾病综合防控及多因子研究提供新的思路。

4 结 论

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(责任编辑：顾玉兰 Responsible editor:GU Yulan)

Effect of Water Physiochemical Factors on Survival Time ofLitopenaeusvannameiInfected by WSSV

HUANG Haihong1,ZENG Lijuan1,LI Chaoyun2,LIU Xiaolin3,ZHANG Yunsheng1,LEI Yanju1,YANG Pinhong1and LUO Yushuang1

(1.Collaborative Innovation Center for Efficient and Health Production of Fisheries/ Key Laboratory of Health Aquaculture and Product Processing in Dongting Lake Area/Zoology Key Laboratory of Hunan Higher Education,College of Life Science,Hunan University of Arts and Science,Changde Hunan 415000,China; 2.Mengjin Animal Husbandry Bureau,Mengjin Henan 471100,China; 3.College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,China)

Litopenaeusvannamei; White spot syndrome virus(WSSV); Physiochemical factors; Multivariate analysis of variance; Multiple linear regression analysis

2016-04-29 Returned 2016-06-21

The Sponsoring and Promoting Project for Scientific Research in Hunan University of Arts and Science(No.15BSQD06); the Northwest A&F University Experimental Demonstration Station(Base) and Innovation of Science and Technology Achievement Transformation Project(No.XNY2013-4); Innovation Project of College Student in Hunan University of Arts and Science(No.ZC1525); the Construct Program of the Key Discipline in Hunan Province.

HUANG Haihong,male,Ph.D,lecturer. Research area: water quality and disease control in aquaculture. E-mail: shinkanh@nwsuaf.edu.cn

日期：2017-08-18

2016-04-29

2016-06-21

湖南文理学院博士科研启动、支撑项目(15BSQD06)；西北农林科技大学试验示范站(基地)科技创新与成果转化(XNY2013-4)；湖南文理学院大学生创新创业研究(ZC1525)；湖南省重点学科建设。

黄海洪，男，博士，讲师，研究方向为水质生态调控与疾病防控。E-mail: shinkhanh@nwsuaf.edu.cn

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A

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