马超数排卵技术研究进展

文│郭少仙（河南省焦作市博爱县动物疫病预防控制中心）张阳阳（河南省武陟县动物卫生监督所）姚利双（河南省焦作市博爱县农产品质量综合检测中心）

马超数排卵技术研究进展

文│郭少仙（河南省焦作市博爱县动物疫病预防控制中心）张阳阳（河南省武陟县动物卫生监督所）姚利双（河南省焦作市博爱县农产品质量综合检测中心）

近年来，随着经济的不断发展，各种马术运动逐渐在国内广泛开展，因此对马匹的数量、质量要求也日趋提高。但是，马是繁殖周期较长的单胎动物，通常情况下母马一年只能生产一匹小马驹，严重制约着马的扩繁。胚胎移植技术是优良种马快速扩繁的有效途径，而超数排卵是胚胎移植的一个重要环节，简化和提高马的超数排卵技术具有重要的生产应用价值。本文对母马的生理特点、超数排卵的机理、超数排卵药物、超数排卵胚胎的活力及对妊娠率的影响等方面进行了综述。

一、母马生理特点

1.发情周期。马是季节性繁殖动物，繁殖季节一般在较为温暖的季节，我国母马的发情季节一般在3～8月份。母马发情周期平均为21天（16～25天），发情期5～10天，也有延长至12天的情况；母马妊娠期平均为340天，分娩后6～13天母马开始发情，称为产后发情。产后发情配种一般比较容易受胎。

2.卵巢。母马卵巢的结构特殊，卵巢髓质在外，皮质在内，具有排卵窝；只有排卵窝有生殖上皮，成熟卵泡只能从排卵窝处破裂排卵，故排卵过程较长。此外，卵巢对促卵泡素（FSH）的反应不如其他家畜敏感，使得卵泡发育到成熟的时间也较其他家畜长，所以母马的发情期持续时间较长。母马一般为单侧排卵，两侧卵巢的排卵几率不同，一般情况下左侧卵巢排卵比右侧排卵多。随着卵泡发育，促卵泡素的分泌不断增加，又会通过大脑的神经组织使垂体分泌促黄体素，促使卵泡里的卵子成熟，使卵泡破裂排卵，破裂的卵泡里面形成黄体；母马排卵后14天左右黄体达到最大，此时黄体细胞很大，周围出现空腔，排卵后17天黄体开始退化，约需7周时间黄体才能完全退化。

二、超数排卵的机理

哺乳动物卵巢的卵泡，根据不同的发育阶段可分为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡和成熟卵泡。动物出生后早期，一定数量的卵泡开始生长，但大多数处于静止状态，开始生长的卵泡经过初级卵泡、次级卵泡形成有腔卵泡，大多数卵泡在此阶段闭锁。如果初情期后有促性腺激素的刺激，有些卵泡通过周期性的选择及生长，达到排卵。实验证明，动物有腔卵泡闭锁之前，注射FSH或孕马血清促性腺激素（PMSG）能使大量卵泡不闭锁而发育成熟；在排卵之前注射促黄体生成素（LH）或人绒毛膜促性腺激素（HCG），可以保证大量成熟卵母细胞同时排卵。超数排卵的过程就是应用超过体内正常水平的外源促卵泡激素，使将要闭锁的有腔卵泡发育成熟而排卵。

三、超数排卵药物

从1974年第一次成功对母马超数排卵以来，已经有许多学者尝试运用不同的激素对母马进行超数排卵。用于母马超数排卵的激素主要FSH、LH、PMSG和HCG等。

Fortune和Kimmich （1983）比较了不同剂量猪FSH诱导母马超数排卵的效果，结果显示，得到了1.5～1.8的排卵率，其中50%～83%的母马排双卵。Woods和Ginther（1983）的研究显示，用马垂体提取物（EPE；主要是FSH和LH）处理母马得到的平均排卵率为3.0枚，70%的母马排两个以上卵。Squires等（1986）比较了运用EPE和猪FSH超数排卵的效果，给母马注射EPE得到的排卵率为2.2枚，注射150毫克猪FSH得到的排卵率为1.6枚。这些数据清晰地表明，EPE诱导母马超数排卵效果较好，每个发情周期能得到2～3枚卵。

由于EPE中LH的含量变化很大，在很多实验中，FSH和LH的精确含量没有报道，但在牛超数排卵时，FSH制剂中LH的量太高一般会降低排卵反应。因此，许多学者开始使用一种纯化的马垂体制剂产品（eFSH）。许多研究均表明，eFSH处理成功地提高了发情周期母马的排卵率和胚胎回收率。PMSG由于半衰期长，能对卵巢产生持续刺激，从而引起卵巢的不良反应，且用于马的超数排卵效果不好，实际生产中较少使用。HCG与LH的生物学功能基本相似，常与FSH配合使用，具有促进卵泡成熟和排卵并形成黄体的作用。

四、超数排卵胚胎的活力及对妊娠率的影响

1.超数排卵胚胎的活力。Squires 等（1987）移植了自发排卵和超数排卵母马的胚胎，得到了相同的群体妊娠率。此外，Dippert等（1994）分别从超数排卵母马和自发排卵母马输卵管回收胚胎，并培养了10天，发育情况相似。因此表明，超数排卵与自发排卵获得的胚胎的生存能力没有显著差异。

2.超数排卵与妊娠率。正常母马的超数排卵可以增加卵母细胞数量，通过人工授精从而提高母马的个体妊娠率。Niswender等通过对比试验研究结果显示，对母马每天注射两次eFSH，每次12.5毫克，用2500国际单位的HCG诱导排卵方法的母马的排卵率和妊娠率最高（排卵率为3.4±0.7，妊娠率为1.8±0.8）。Raz等研究显示，eFSH处理母马排卵率（2.2±1.9）高于对照组（1.1±0.3），但是，16匹eFSH处理母马中8匹妊娠，妊娠率为50%；26匹对照母马中16匹妊娠，妊娠率为62%。Squires等表示，在eFSH处理的母马之间排卵率变化相当大，且eFSH处理的母马大约有25%的母马在冲胚时不能收集到胚胎。造成排卵率和胚胎回收率变化的原因尚不清楚，或许eFSH能更有效的提高个体的胚胎回收率，对提高一群母马的胚胎回收率和妊娠率还有待研究。

五、小结

目前，超数排卵技术已经广泛应用于生产实践中，但是个体之间超数排卵效果差异较大。同一种超数排卵方法对不同个体之间的超排效果不同，这除了个体本身的差异外，激素药物的使用剂量、注射途径、生产厂家、生产批号的不同，都影响着超数排卵的效果。同时，超数排卵胚胎的活力和妊娠率也直接影响着生产效益。在生产实践中，为了加快优良母马的繁殖速率，提高优秀种马的利用率，除了保证良好的饲养管理条件，进行选种选配外，还要制定可行的超排方案，开展马的超数排卵工作，为优良品种的胚胎移植工作打下良好基础。