藕粉中菌落总数测定结果不确定度的评定

周露　马蓉

摘 要：目的：对藕粉中菌落总数检验结果进行不确定度评定。方法：根据GB 4789.2-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》，对藕粉样品中菌落总数进行了测定和对测定过程中引入的不确定度分量进行评定。结果：合成不确定度为0.0475，扩展不确定度为0.095。结论：研究建立的方法适合于类似检测条件下菌落总数不确定度的评定。

关键词：藕粉；菌落总数；不确定度评定

中图分类号 TS207.4 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）15-0132-3

Abstract：[Objective]Evaluate the uncertainty of the aerobic plate count in lotus root starch.[Method]According to the method of GB 4789.2-2016 national food safety standard microbiological examination in food，aerobic plate count and the method of JJF 1059.1-2012 evaluation and expression of uncertainty in measurements to measure the aerobic plate count in lotus root starch and determine the uncertainty components introduced in the experiment. [Result]The combined uncertainty was 0.0475，the expanded uncertainty was 0.095.[Conclusion]This method established in this study can be used in the uncertainty evaluation of aerobic plate count under similar circumstances.

Key words：Lotus root starch；Aerobic plate count；Uncertainty evaluation

1 引言

GB 4789.2-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》中规定菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数[1]。菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。

测量不确定度是与测量结果关联的一个参数，用于表征合理赋予被测量的值的分散性。国认实〔2016〕33号文最新发布的《检验检测机构资质认定评审准则》中4.5.21当不确定度与检测结果的有效性或应用有关，或客户的指令中有要求，或当对测量结果依据规范的限制进行符合性判定时，需要提供有关不确定度的信息[2]。本文依据GB 4789.2-2016《食品安全国家标准 食品微生物学檢验 菌落总数测定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》对藕粉样品中菌落总数进行了测定和对测定过程中引入的不确定度分量进行评定。

1 实验部分

1.1 检验依据 GB 4789-2-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》。

1.2 仪器和试剂 仪器：电热恒温培养箱（上海精宏实验设备有限公司）；高压灭菌锅（日本RAYAMAHI）；电子天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；均质器（天津市恒奥科技发展有限公司）；超纯水机（美国Millipore）；数显恒温水浴锅（金坛市荣华仪器制造有限公司）；1mL移液管；10mL移液管。试剂：平板计数琼脂（广州环凯微生物科技有限公司）；氯化钠（国药集团化学试剂有限公司）。

1.3 样品 藕粉样品：在江苏省宝应县内藕粉生产企业的藕粉样品。

1.4 检测过程 准确称取25g藕粉样品于225mL生理盐水中匀质制成成1[∶]10样品匀液，用1mL无菌吸管吸取1[∶]10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注入盛有9mL生理盐水的无菌试管中，混匀，制成1[∶]100的样品匀液。根据对样品污染情况，选择2个适宜稀释度的样品匀液，在进行10倍递增稀释时，吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时做空白试验。及时将冷却至46℃的平板计数琼脂倾注平皿，摇匀，翻转，36℃培养48h。选取30～300CFU之间的平板菌落数计数。

1.5 检测结果 详见表1。

2 不确定度

2.1 不确定度来源 菌落总数测定实验过程中结果的不确定度主要来源：（1）由随机误差导入的不确定度：包括样品重复性测定，涉及取样、样品稀释、菌落分布和人员操作引入的不确定度；（2）由系统误差导入的不确定度：包括培养基、培养时间、培养温度等引入的不确定度和计量器具（吸管、天平、量筒）等引入的不确定度[3]。本方法研究稀释过程中引入的不确定度、加样体积引入的不确定度和测量重复性引起的不确定度。

2.2 数学模型 计算公式如下：

3 结果

通过以上分析得到藕粉的结果取值区间为（3.7063±0.095），取反对数取值区间为（4086，6328）。

4 讨论

本方法研究的是稀释过程中引入的不确定度、加样体积引入的不确定度和测量重复性引起的不确定度。因为微生物检测过程是一个动态的过程，样品中菌落总数检测结果存在较大的分散性，如果直接用标准偏差公式进行计算，所得到的不确定度结果并不是适合每个项目的不确定度评定，因此采用取对数的方法进行不确定度评定更适合菌落总数检测不确定度的评定[5]。

在计算不确定度时，应该根据需要改进数学模型的建立方式，数学计算模型应能反映出不同变量之间的逻辑关系，如果数学模型过于简单，就不能很好的反映出各种影响不确定度的因素之间的关系，如果没有充分认识到稀释倍数和加样体积的重要作用，就会影响到不确定度计算的可靠性[6]。

此方法能够有效的分析不确定度，提升实际检测结果的可靠性，同时适用类似检测条件下的不确定度评定，为食品中菌落总数的检测保驾护航。

参考文献

[1]GB 4789.2-2016食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定[S].

[2]检验检测机构资质认定评审准则[S].中国国家认证认可监督管理委员会，2016.

[3]袁平，吴春敏，林仲，等.牛食品中菌落总数测定不确定度评定数学模型的建立[J].预防医学论坛，2016，22（7）：540-545.

[4]JJG 196-2006常用玻璃量器检定规程[S].

[5]张秀丰，翟硕莉，王雪莲，等.速冻草莓菌落总数检验中不确定度的评定[J].食品安全质量检测学报，2014，5（6）：1831-1833.

[6]彭永艳.食品检验中菌落总数的不确定度评定[J].现代食品，2017，28（8）：81-83.

（责编：张宏民）